基因工程菌株产生人类绒毛膜促性腺激素抗原的研究——Ⅰ.β-Galactosidase-hCG的分离纯化与鉴定

通过寡核苷酸合成仪,用化学方法合成相当于hcGβ链C末端36肽基因的片段,成功地克隆到噬菌体载体λgt11中,并在宿主菌株E. coli y_(1089)中得到表达。含λgt11 hCG重组体的E. coli y_(1089)所合成的含人类绒毛膜促性腺激素β链c末36肽的杂交蛋白(下称:β—galactosidase—hCG),通过硫酸铵沉淀、亲和层析和制备性聚丙烯酰胺凝胶电泳,可得电泳纯单一色带的β—gaIactosidase—hCG。蛋白质转印(Western Blot)技术证实β—galactasidase—hCG具有hCGβ链c末端36肽的免疫特性。对流免疫电泳和免疫双扩散试验结果表明β—galactosidase—hCG具免疫原性。从一立升培养液的菌体中可分离纯化约3.8毫克的β—galaetosidase—hCG。     

人绒毛膜促性腺激素β亚基(hCG-β)单克隆抗体的制备及鉴定

为了获得抗人绒毛膜促性腺激素β亚基(hCG-β)单克隆抗体,以hCG为免疫原,经细胞融合和有限稀释后,得到4株分泌抗hCG-β单克隆抗体(McAb)细胞株.酶联免疫吸附测定(ELISA)结果表明,所得抗体均为IgG1,κ型,其腹水效价均可达10-6.     

基因工程菌株产生的含人类绒毛膜促性腺激素抗原的研究 Ⅲ.β—Galactosidase—hCG 免疫和生物活性的初步探讨

基因工程菌株产生的含人类绒毛膜促性腺激素(hCG)β亚单位 C 末端36肽的β-半乳糖苷酶杂交蛋白(简称:β-Galactosidasc-hCG),主动免疫昆明种小白鼠,能诱发特异抗 hCG 抗体的产生。其抗体滴度的高低与免疫原用量有关。通过对小鼠子宫增重抑制试验,表明其抗血清能中和 hCG 的生物活性。     

富产多烯不饱和脂肪酸(PUFA)细菌的分离

为了利用生物技术合成多烯不饱和脂肪酸(ＰＵＦＡ),从新鲜的海洋鱼类肠道中分离和筛选出富产ＰＵＦＡ的细菌,在纯化后的２１株菌中,通过利用气相色谱和色谱 质谱联用仪、苏丹黑染色等微生物学检验和脂肪酸不饱和度的测定,确定了多烯不饱和脂肪酸(ＰＵＦＡ)产率较高的ＷＬ １０２１为目的菌株,并对其进行了微生物形态学研究·结果表明细胞形状呈短杆状、细胞大小为０－７μｍ×１－６μｍ、有极性单生鞭毛、有运动性、无孢子及Ｇ氏染色呈Ｇ－,为工业合成ＰＵＦＡ奠定了基础·     

提高水貂（Mustela vison）生育力的研究：Ⅲ.人绒毛膜促性腺激素和雌二醇对休情期母貂发情的诱导作用

研究了人绒毛膜促性腺激素对水貂生育力的影响，实验结果表明：人绒毛膜促进腺激素剂量以166～200IU/头诱导母貂发情的效果较好，其中以hCG166IU/头处理后几天内加注一针效果更佳，雌二醇诱导母貂子宫等副性器官发育效果最好，但未能使卵巢卵泡发育达到成熟阶段，因而雌二醇不是提高母貂生育力的理想激素。     

乌江网箱养殖丁(魚歲)细菌的分离与分子鉴定

利用微生物学常用的细菌分离、纯化方法从丁(魚歲)中分离出9株菌株,编号分别为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ.分别扩增出9株菌株的16S rRNA基因约600 bp的片段,并对其测序,将测序结果输入到NCBI(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/)中,用BLAST工具对序列进行同源性比对分析,并利用MEGA4绘制系统进化树,结果表明:9株菌株的16S rRNA基因测序结果分别与不动杆菌(Acinetobacter)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophi-la)、希瓦氏菌(Shewanella baltica)、不动杆菌(Acinetobacter)、希瓦氏菌(Shewanella baltica)、霍乱弧菌(Vibriocholerae)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)、肺炎克雷伯氏菌(Klebsiellapneumoniae)的16S rRNA基因的核苷酸序列同源,同源性分别为96%,99%,99%,97%,98%,98%,99%,98%,98%.9株菌株的系统进化树明显分为3支,Ⅰ和Ⅳ聚为一支,Ⅶ独聚一支,Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅷ、Ⅸ聚为一支,其中Ⅱ和Ⅷ相聚,Ⅲ和Ⅴ相聚后再与Ⅵ相聚,最后与Ⅸ相聚.     

长鞭红景天(Rhodiola fastigiata)内生细菌的分离及其生理生化特性测定

从西藏自治区林芝地区色季拉山采集长鞭红景天(Rhodiola fastigiata)植株,从中共分离到内生细菌15株,并根据细菌菌落特征,将15株细菌归为9种.另外,对9种红景天内生细菌的革兰氏染色反应、接触酶活性、淀粉水解、纤维素水解、明胶液化、牛奶分解、甲基红反应、抗生素敏感性等生理生化特性进行了测定,为长鞭红景天(Rhodiola fastigiat)内生菌的开发利用奠定了基础.     

长鞭红景天(Rhodiola fastigiata)内生细菌的分离及其生理生化特性测定

从西藏自治区林芝地区色季拉山采集长鞭红景天(Rhodiola fastigiata)植株,从中共分离到内生细菌15株,并根据细菌菌落特征,将15株细菌归为9种.另外,对9种红景天内生细菌的革兰氏染色反应、接触酶活性、淀粉水解、纤维素水解、明胶液化、牛奶分解、甲基红反应、抗生素敏感性等生理生化特性进行了测定,为长鞭红景天(Rhodiola fastigiat)内生菌的开发利用奠定了基础.     

维生素B_(12)的毛细管电泳——化学发光检测研究(英文)

基于维生素B_(12)(VB_(12))对鲁米诺-双氧水体系良好的化学发光(CL)催化活性,研究确立了一种新型毛细管电泳—化学发光(CE-CL)检测方法,用于这一重要营养物质的准确CL分析.预处理阶段,连二亚硫酸钠(Na_2S_2O_4)被确定为将VB_(12)(Co(III))转化成VB_(12)(Co(II))的适当还原剂,以使VB_(12)在luminol-H_2O_2发光体系中获得良好的催化信号.这一过程产生的CL干扰组分,则通过毛细管电泳(CE)加以分离除去.实验中,VB_(12)可被温和还原并由催化所得CL信号精确测定.采用实验室自行组建的CE-CL检测装置,该测试过程可在20 min内完成;检测下限(LOD)2×10^(-7)mol/L(S/N=3),线性范围6×10(-7)mol/L(S/N=3),线性范围6×10^(-7)～6×10(-7)～6×10^(-4) mol/L(r(-4) mol/L(r²=0.968),相对标准偏差(RSD)2.4%(n=9).对药品中VB_(12)含量进行加标回收实验,回收率97%～106%.相较于已有关于VB_(12)的CL分析研究,本文首次考察了预还原处理中产生的干扰组分及其分离过程,以便捷操作获得更为可靠的检测数据.     

文蛤(Meretrix Meretrix)凝集素(MML)的初步研究——Ⅰ.MML在文蛤体内的分布及纯化

在文蛤(Meretrix Meretrix)体内具有血球凝集活性的凝集素(简称MML),经实验证实仅分布于文蛤外套腔液中。向外套腔液中加入固体硫酸铵达40％时,可使99％的MML沉淀。用不同饱和度的硫酸铵溶液依次对上述沉淀进行抽提,得到MML粗制品溶液,其比活比原始外套腔液提高了约9.95倍,总活力回收达48％。最后用自制的人血浆糖蛋白一Sepharose 4 B亲合层析柱可将上述MML粗制品的比活再提高400多倍。结果与原始外套腔液比较,MML终产品的比活总共提高了4313倍,总活力回收达44.8％,在电泳鉴定时显示出单一的区带。     

一株产生几丁质酶细菌的分离与鉴定

作者从草原毛虫的尸体中，分离到一株能产生较高活性几丁质酶的细菌，该菌所产生的几丁质酶可抑制几种植物病原真菌的生长，对防治蝗虫具增效作用。经鉴定确认，该菌属肠杆菌属，是产气肠杆菌的一个变种。     

磷细菌和钾细菌混合培养的研究

本对生产菌肥的磷细菌和钾细菌进行了混合培养，设计了三因素随机区组试验，探讨混合菌肥的最佳生产工艺，并对实验结果进行了方差分析。结果表明磷细菌和钾细菌可以混合培养，各处理结果经ＬＳＲ测验，主效Ａ因素中Ａ４水平、Ｂ因素中Ｂ２水平和Ｃ因素中Ｃ５水平显高于同组中的其它水平。     

抗番茄青枯病内生拮抗细菌的筛选及室内防效测定

从健康番茄体内分离到了93株内生细菌。采用含菌平板抑菌圈测定法,筛选出了3株对番茄青枯菌具有较强拮抗力的细菌菌株ZB—1、ZB-2和ZB-6。温室盆栽防病试验结果表明,内生细菌菌株ZB-6对植株进行预处理后,番茄青枯病防病效果可达63—65％,说明该菌株对番茄青枯病发生具有较好预防效果。     

一株新型乳酸菌素产生菌的分离及其鉴定

从新鲜牛乳中分离得到乳酸菌Ｘ４。该菌株在发酵过程中产生的乳酸菌素有较广的抑菌谱,不仅对芽孢杆菌、葡萄球菌、链球菌等革兰氏阳性细菌的生长具有较强的抑制作用,而且对大肠杆菌、沙门氏菌等革兰氏阴性细菌的生长也具有较强的抑制作用。经鉴定,Ｘ４ 菌株为乳脂链球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃｒｅｍ ｏｒｉｓ ｓｐ．Ｘ４）。     

产共轭亚油酸乳酸菌的选育和鉴定

采用紫外分光光度法测定共轭亚油酸的含量,从13株实验室保存的乳酸菌中筛选出8株具有转化亚油酸生成共轭亚油酸能力的菌株.其中As1.2686产量最高,发酵液中共轭亚油酸含量达到13.63 mg/L;其次是菌株B11693,共轭亚油酸产量为11.55 mg/L.选择B11693做进一步的菌种鉴定,将传统的形态学、生理生化鉴定方法和细菌16SrDNA分子生物学鉴定方法相结合,鉴定菌株B11693为短乳杆菌.     

酸乳中乳酸菌的分离及其发酵性能测试

酸乳中的乳酸菌有乳酸杆菌和乳酸球菌两种，本文选用较为简单的培养基，通过调节ｐＨ值对其进行分离。从平皿中挑选溶钙圈较大的杆菌和球菌菌落各２个作为供试菌株，进行发酵性能测试，结果表明：这些菌株均能产酸，活性较高，按比例再组合成酸乳发酵剂，使产酸时间缩短，酸度高。在实际生产中应用此法，可以不断优选高产乳酸菌株。     

烟台海域发光细菌的分离鉴定

在烟台黄海海域所捕获的鱼的内脏和体表分离得到27株海洋发光细菌,经生理、营养和形态学的特性鉴定为三个种:Photobacterium Phosphoreum, Vibrio orientalis和V.splendidus biotype Ⅰ.其主要表型特征和已报道的相一致.根据文献,V.splendidus biotype Ⅰ属世界罕见,至今它是我国分离成功的第二株,V.prientalis,和V.splendidus biotype Ⅰ,此外,实验证明分布于整个黄海.     

硅酸盐菌剂的生产工艺及其性能研究

本实验通过对不同培养条件下钾细菌生长数量的测定,确定了硅酸盐菌剂生产工艺。此外,以化学分析和生物测定的方法,对菌种性能测定的结果表明,硅酸盐菌剂确具利用和分解硅酸盐和磷矿粉的能力,水溶性磷含量比对照增加84×230％,水溶性钾含量比对照增加38×52％     

环孢菌素产生菌的诱变选育

中国弯颈霉Tolypocladium sinense Li与雪白弯颈霉Tolypocladium nivcum(Rostrup)Bissct的孢子悬浮液经γ-射线Co~(60)辐射诱变后,产环孢菌素的得率及抑菌活性均明显提高.用黑曲霉Aspergillus niger和弯孢霉Curvularia lunata作为致敏菌。检测提取物中环孢菌素的抗菌活性,提取物抑制了致敏菌的菌丝生长和孢子形成.环孢菌素产生菌深层发酵培养基是蛋白胨—葡萄糖培养基,发酵周期12天.尔后发酵液用等体积的乙酸乙酯萃取,减压浓缩,每升发酵液获环孢菌素粗制品35—87mg.     

北京市城区北环水系细菌总数和大肠菌群的调查研究

2003年6-11月曾4次对北京市城区北环水系8个地点进行了每mL水样中细菌总数和每L水样中大肠菌群数量检测.结果显示,细菌总数在7月份出现最高峰,西海、后海和前海的细菌总数较多;大肠菌群7和9月份呈现高峰,动物园北水体中大肠菌群明显高于其他地点.根据中华人民共和国地表水环境的质量标准,城区北环水系中大部分水系属于Ⅱ类,少数水域属于Ⅲ类和Ⅳ类水质.因此应加强对污染源的控制,防止污染源向水体排放,同时加强水环境监测.