悬浮培养及培养条件对灵菊七细胞中可溶性多糖合成的影响

以灵菊七叶片诱导的愈伤组织为材料进行悬浮培养,研究培养条件对愈伤细胞、细胞内可溶性多糖合成的影响。结果表明,在培养基MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L GA中悬浮细胞表现出对数生长期最长、可溶性多糖含量最高的特点;离子交换层析纯化结果显示,悬浮细胞中可溶性多糖分了与植株中含有相同的3种主要多糖。培养基MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L GA,促进可溶性多糖的生物合成,最适于灵菊七愈伤细胞的悬浮培养。本研究初步建立了灵菊七愈伤细胞悬浮培养快速获取可溶多糖的方法,为深入研究灵菊七多糖药理活性奠定了基础。     

培养基种类及激素配方对青钱柳悬浮细胞次生代谢物质积累的影响

以青钱柳无菌苗诱导出的愈伤组织为材料进行悬浮培养,通过控制基本培养基的种类和激素配方,初步筛选出适合于青钱柳次生代谢产物生产的植物悬浮细胞培养体系。结果表明:青钱柳悬浮细胞培养的最佳基本培养基为MS培养基,激素配方为1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L KT;有利于青钱柳悬浮细胞的干质量增加、次生代谢产物生产的基本培养基为MS培养基;有利于青钱柳悬浮细胞总黄酮积累的激素配方B1为1.0 mg/L NAA+0.5mg/L KT,有利于青钱柳悬浮细胞多糖积累的激素配方B3为1.0 mg/L IBA+0.5 mg/L TDZ,有利于青钱柳悬浮细胞总三萜积累的激素配方B2为0.5 mg/L 2,4-D+0.3 mg/L NAA。     

非洲凤仙花细胞悬浮培养条件的优化

探讨了非洲风仙花培养基的类型、培养基激素水平和愈伤组织初始接入量对非洲凤仙花细胞悬浮培养生长的影响.结果表明:MS培养基最适于非洲凤仙花悬浮培养细胞的生长,在初始接入量为10 g/L时细胞增殖最快,附加有1.0 mg/L NAA和2.0 mg/L 6-BA的MS培养基中细胞的增殖率最高.     

玉米单细胞培养的研究

将类型Ⅱ愈伤组织从固体培养基转入悬浮培养,发现在改良1/2MN培养基,1.0-2.0mg/L的2,4-D浓度及1000mg/L肌醇存在下,适合所有不同基因型玉米自交悬浮细胞的生长和细胞成活率的提高,悬浮培养5-6代继代1次是适宜的,大量元素减半和0.5-1.0mg/L的2,4-D浓度用于玉米单细胞培养,能获得良好的细胞分裂和生长,细胞悬浮培养获得了愈伤组织。     

三叶半夏细胞悬浮培养和植株再生的研究

三叶半夏幼嫩叶片在MS+2,4-D2.0mg/L+BA0.5mg/L培养基上一个月内可以诱导出愈伤组织.取颜色鲜黄的愈伤组织进行悬浮振荡培养,经3～4次继代培养得到分散性好的细胞悬浮系.悬浮培养过程中细胞生长曲线呈S型,培养12～16d达对数生长期,细胞鲜重在第18d达到最大值.悬浮液pH值的变化在对数生长期同生长曲线一致.将细胞悬浮液过滤得到的小细胞团接种于MS+NAA0.2mg/L+BA1.0mg/L分化培养基上,40d分化出小植株.     

胀果甘草细胞的悬浮培养

切取胀果甘草(Glycyrrhiza inflate)无菌苗的子叶、下胚轴和根段外植体进行愈伤组织的诱导和悬浮细胞培养,建立了胀果甘草细胞悬浮培养体系,测定了悬浮培养细胞的生长曲线,并且研究了接种量、条件培养和激素组合对胀果甘草悬浮细胞生长的影响.结果表明子叶来源的愈伤组织最适合作为胀果甘草细胞悬浮培养的起始培养物;悬浮培养的最佳接种量为 35 g/L;条件培养基的最佳用量为总培养体积的1/3;最适合胀果甘草悬浮细胞生长的培养基是附加了 NAA 1.0 mg/L + KT 0.5 mg/L 激素组合的 MS 培养基.     

红豆杉细胞聚集体悬浮培养生产紫杉醇

建立了中国红豆杉(Taxuschinensis)细胞聚集体两步法悬浮培养生产紫杉醇的培养体系.红豆杉细胞于含LH1g/L,NAA0.1mg/L,2,4-D0.5mg/L及6-BA0.8mg/L的细胞聚集体形成的培养基中生长并形成聚集体,10d后转入生产培养,较大细胞聚集体的生物量比和紫杉醇产量分别较对照组提高了53.7%和82.1%;提高细胞聚集体的生物量比能显著增加紫杉醇产量.四种基本培养基中B5最适合诱导细胞聚集体的形成.生长培养12d后细胞悬浮培养物按1∶1(体积比)直接转入生产培养对细胞生长、细胞聚集体和紫杉醇形成最有利.在100μmol/L茉莉酸甲酯作为诱导子下本体系紫杉醇产量较对照组提高了一倍.     

玉米单细胞培养的研究

将类型Ⅱ愈伤组织从固体培养基转入悬浮培养，发现在改良1/2MN培养基，1.0-2.0mg/L的2,4-D浓度及1000mg/L肌醇存在下，适合所有不同基因型玉米自交系悬浮细胞的生长和细胞成活率的提高.悬浮培养5-6天继代1次是适宜的.大量元素减半和0.5-1.0mg/L的2,4-D浓度用于玉米单细胞培养，能获得良好的细胞分裂和生长.细胞悬浮培养获得了愈伤组织.     

乌拉尔甘草悬浮单细胞的筛选及培养

乌拉尔甘草种子在消毒后培养无菌苗,截取无菌苗子叶、上胚轴和下胚轴等作为外植体,诱导和继代培养成松散型愈伤组织,然后在振荡培养后过筛获得悬浮单细胞;再对悬浮液进行多级稀释、培养制备小细胞团.结果表明,在舍1.0mg/L2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、1.0mg/Lα-萘乙酸(NAA)、1.0mg/L 6-苄基氨基嘌呤(6-BA)、0.3mg/L激动素(KT)的MS培养基中,上胚轴能在3～5次继代培养后获得松散型愈伤组织,过80目筛可以获得悬浮单细胞和小细胞团;同样的培养基,悬浮单细胞在琼脂表面、珍珠岩表面和看护培养中培养,看护培养的细胞生长最快、小细胞团形态最佳.     

蔗糖浓度和外源2,4-D与KT浓度对三七幼叶细胞悬浮培养影响的研究

将云南文山三七幼叶诱导出愈伤组织,并采用悬浮震荡培养三七细胞.细胞培养基质中的碳源浓度和激素浓度对培养细胞生长的影响进行研究,实验结果显示:MS+1.5 mg/L2,4-D+1.0 mg/L KT+28 g/L蔗糖,pH为5.8的培养基最适合文山三七幼叶诱导得到的愈伤组织细胞悬浮的培养.     

小冠花高效体细胞胚胎发生与植株再生的研究

目的建立小冠花稳定高效体细胞胚胎植株再生体系。方法采用植物离体组织培养技术,通过优化外植体,基本培养基及其激素组合,提高体细胞胚发生和植株再生频率。结果子叶外植体在附加1.0mg/L 2,4-D,1.0mg/L NAA,0.5mg/L KT和100mg/L脯氨酸的MSB培养基上35d100%形成体细胞胚,产生体细胞胚数量达625个/g,在MS KT 1.0mg/L IBA 0.1mg/L 脯氨酸300 mg/L培养基上转换成完整植株的平均数为21棵/g。再生植株移栽成活率为80%,其形态特征和生长习性未见变异。外源激素是体细胞胚胎诱导所必需的,2,4-D是其中最关键的一种。结论建立了小冠花高频稳定高效体细胞胚胎发生和植株再生体系。     

普通油茶体胚再生体系研究

为构建农杆菌介导的油茶遗传转化受体系统,选择普通油茶‘长林'4号、53号和166号的幼胚为外植体材料,进行多因素多水平的组织培养试验。结果表明:培养基的pH对愈伤组织诱导率影响不显著,愈伤组织的诱导率受油茶品种影响极显著; ‘长林'53号的幼胚极易实现胚性愈伤组织诱导和完整植株再生,MS培养基是最佳培养基,2,4-D和TDZ为幼胚较敏感的植物激素,对愈伤组织诱导影响最大; 当MS+2 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L TDZ处理时,‘长林'53号体胚诱导率为98%; MS+1 mg/L 2,4-D+2 mg/L KT+500 mg/L CH处理时,‘长林'53号体胚诱导率为89.6%。在不同2,4-D、KT、TDZ和添加物水平的L₉(3⁴)正交试验中,除3个处理外,其他处理组合的‘长林'53号体胚诱导率都达到100%。已分化的胚性愈伤组织在不含任何激素的MS培养基上,可以实现胚状体的萌发、生长及完整植株再生。     

甜叶菊叶片离体培养及试管无性系的建立

研究了离体条件下甜叶菊（Stiuia rebaudiana Bertoni)叶片愈伤组织诱导和植株再生技术,离体培养以MS为基本培养基并附加300mg/L水解酪蛋白,离体叶片在BA 0．5mg/L和NAA 0．5mg/L的培养基上诱导形成愈伤组织,在BA 0．5mg/L和NAA0．05mg/L的培养基上可诱导愈伤组织分化不定芽,分化频率为100％,不定芽在White基本培养基并附 加NAA0．01mg/L的培养基上诱导生根,生根率可达100％,炼苗后移栽,成活率达95％以上。     

Effects of pigment glands and gossypol on somatic cell culture of upland cotton (Gossypium hirsutum L.)

The effects of pigment glands and gossypol on the somatic cell culture of upland cotton were studied, using the materials as follows: three pairs of glanded and glandless upland cotton near isogenic lines, TM-1, and Coker 312. The results showed that the pigment glands and gossypol contents in the explants had great inhibiting effect on the induction and growth of callus in somatic cell culture of upland cotton, and the induction rate of callus and the single callus weight of glandless cotton were much higher than those of their glanded near isogenic lines. It was easier to obtain regeneration plants from glandless cotton than from their glanded near isogenic lines. There was a significant inverse correlation between the gossypol contents in the explants and callus induction rate, with the correlation coefficient of -0.84. The vitro gossypol in the medium had some inhibiting effect on the induction and growth of callus, especially for the glandless cotton. However, a certain concentration of vitro gossypol in the medium (0.1 mg/L) was an aid to the steadiness growth of callus in glandless cotton somatic cell culture, with a high rate of embryogenic cells which was in favor of plant regeneration, and it was also relatively easy to obtain regeneration plants when they were transferred into differentiation medium with 0.1 mg/L of vitro gossypol, even for some cultivars which are difficult in somatic cell culture. In addition, the gossypol content and its variation in the seedlings and callus during culture of Coker 312 were discussed, as well as the relationship between gossypol variation in the explants and its somatic cell culture. The probability of vitro gossypol used in cotton somatic cell culture for the improvement of somatic cell culture was suggested.     

紫叶酢浆草体细胞胚诱导和发育条件研究

本文通过组织培养方法,探讨生长素和细胞分裂素在紫叶酢浆草体细胞胚诱导和发育过程中的作用。结果表明0.5mg/LNAA是诱导胚性愈伤组织最适宜的生长素浓度,添加一定比例的6-BA可有效促进体细胞胚的发生;在附加激素浓度分别低于0.1mg/LNAA和0.5mg/L6-BA的MS培养基上,体细胞胚能发育成完整的植株。因此,一定浓度的生长素是诱导紫叶酢浆草胚性愈伤组织的关键因素,细胞分裂素在体细胞胚的发生和发育过程中起增效作用。     

组培条件对何首乌愈伤组织诱导及生长的影响

为了寻找适合何首乌愈伤组织诱导与生长的培养条件，本文考察了愈伤组织形成的比率，分析了取样时间、光照条件、培养基中2，4-D、6BA和IBA的浓度对愈伤组织诱导和生长的影响。实验表明，在黑暗中，在添加有1．5mg/L2，4-D，1mg/L 6BA和0．5mg/L BA的MS培养基上，夏季取样的茎段，愈伤组织诱导率可达100％。     

叶用莴苣组织培养研究

以叶用莴苣(LactucasativaL)栽培品种的幼嫩叶片为实验材料,对叶用莴苣的组织培养进行了研究,探讨愈伤组织的形成、愈伤组织分化成芽和生根的条件.结果如下6BA和NAA的浓度影响叶用莴苣愈伤组织的形成、分化和生根培养,诱导愈伤组织的最适培养基为MS+6BA(0.5mg/L)+NAA(0.1mg/L),最适分化培养基为MS+6BA(0.5mg/L)+NAA(1.0mg/L),最适生根培养基为1/2MS+NAA(0.1mg/L).     

藏红花球茎组织培养条件的研究

以藏红花球茎侧芽为外植体,通过植物组织培养的方式建立藏红花快速繁殖体系。研究表明:以MS为基本培养基,附加0.5 mg·L^-16-BA+4.0 mg·L^-12,4-D,在黑暗条件下最适于藏红花愈伤组织的诱导,并且20 d诱导率可以达到96.7 %;附加2.0 mg·L^-16-BA+0.5 mg·L^-1NAA,在黑暗条件下最适合藏红花丛生芽的诱导与增值,丛生芽诱导率可达96 %;附加5.0 mg·L^-16-BA +1.5 mg·L^-1NAA+0.3 g·L^-1AC,在1 500～2 000 lx的光照条件下,30 d左右新生小球茎诱导率高达90 %。