Candidarugosa脂肪酶交联酶晶体稳定性研究

交联酶晶体是一种新型的生物催化剂。本研究对Ｃａｎｄｉｄａｒｕｇｏｓａ脂肪酶交联酶晶体的制备以及其性进行了探索,制备得的交联酶晶体不仅保持酶原有的特性,而且提高了酶在极端环境条件,下的稳定性,并初步研究了交联酶晶体在有机溶液中的稳定性。     

嗜极菌的极端酶的若干研究进展

综述了近年来国内外关于嗜极菌的极端酶研究的若干新进展，初步分析了极端酶在极端环境中保持稳定性及活性的结构特性，并介绍了当前极端酶的生物技术进展及其广阔的应用前景。     

海洋极端微生物和极端酶分子生物学研究

分离自海洋极端微生物的极端酶具有超常的生物学稳定性，能够在极端温度、pH值、压力和离子强度下表现出生物学活性，因此海洋极端酶为生物催化和生物转化提供了良机。新的极端物种的发现、基因组序列的确定及基因工程技术的应用，加快了发现和制各新酶的进程。蛋白质工程和定向进化技术进一步改善酶的活性和特异性，促进了海洋极端酶的工业应用。对极端酶的分子生物学研究加深了人们对酶稳定性机制的理解，丰富了分子进化理论。     

基于盐碱条件下产腈水合酶菌株的筛选与高酶活表达工艺的研究

利用含有一定比例丙烯腈和丙烯酰胺的特制培养基从新疆盐碱环境下筛选和分离产睛水合酶微生物,获得了具有在较高盐浓度和pH偏碱性条件下生长良好、菌苔为光滑、橙红、湿润的菌株。研究其细胞培养特性。通过对菌株的极端定向培育和产酶过程的研究,采用葡萄糖．诱导剂耦合补加工艺进行催化剂的制备,同时加入各种诱导剂进行产酶诱导。结果表明,pH=7．2,葡萄糖浓度维持在3-5g／L,发酵培养基中加入0．3％NH4a,0．6％丙烯腈,并在培养48h后加入0．3％丙烯腈,产生的脯水合酶酶活最高,可达8208．3U／mL。     

极端条件下的重大科学问题与极端条件设施发展现状及展望

随着低温、高压、强场等各项极端实验条件的拓展及在极端实验条件下测量技术的发展,人们利用极端条件设施与技术取得了许多具有深远影响的基础研究和应用研究突破.利用极端实验条件取得创新突破已成为科学研究与技术发展的一种重要范式,建设世界一流的综合极端条件用户实验设施已成为我国科学技术发展的迫切需要.本文首先结合实例概要介绍了极端条件下已解决的和所面临的重大科学问题,介绍了国内外极端条件实验装置的发展概况和发展趋势.然后,从科技发展的角度阐述了建设综合极端条件实验装置的重要性,并对我国综合极端条件设施建设愿景做了展望.     

超越极限的嗜极微生物

生物生存的极限条件是什么?在强酸、强碱、高温、高盐、高压、高辐射等极端恶劣的环境条件下,是否还有生命的存在?这些都是科学家们关注的课题。如今,随着科学技术的飞速发展,研究人员已经相继在极端环境中发现了一些微生物,并将其通称为“嗜极微生物”。嗜极微生物不但具有重要的科研价值,而且还是不可忽视的生物资源。     

极端环境微生物的研究报道

极端环境是指含有极强限制因子的生活环境,通常包括有高温、高盐、高酸、高碱、高压、高干旱、低温、低营养、高浓度重金属离子等环境。生活在这些环境中的微生物称之为极端环境微生物。具有独特的细胞结构,稳定的遗传物质(基因)和特殊的生理功能及酶系。七十年代以来,极端环境微生物已成为微生物学发展的新领域和新的资源库,也将成为生物工程中重要的基因库。深入研究     

嗜热酶耐热机制的研究进展

从极端环境中筛选的嗜热菌、超嗜热菌(包括古菌)是嗜热酶的主要来源,但由于嗜热菌的培养条件严格、产酶量低等缺点,使基因工程及蛋白质工程成为生产嗜热酶的又一手段。目前,比较嗜热酶与同源常温酶的氨基酸序列的同源性是研究嗜热酶耐热性的主要方法。不同的酶其耐热机制不同,在一级结构中,嗜热酶具有与同源常温酶不同的氨基酸组成。α-螺旋的稳定性使嗜热酶在二级结构上更稳定。在高级结构中,“额外”的离子键、疏水作用、氢键、寡聚体的形成等对嗜热酶的耐热性起主要作用。一些环境因子也影响嗜热酶的耐热性。     

细菌(数量)生长规律的数学模型

为描述单一细菌群落的生长繁殖(数量、速度)曲线的关系,设计了3种极端条件环境.应用数理方法,分析在各种极端环境中细菌的繁殖情况,得到了新的细菌生长繁殖规律.     

酶工程的研究进展简述

简述了酶工程的最新研究进展，其中包括人工合成酶和模拟酶，核酸酶与抗体酶，非水系统，以及极端环境微生物和不可培养微生物的新酶种等。     

新疆蜗牛酶的研制

以野生蜗牛嗉囊为原料提取蜗牛酶产品,检测所含纤维素酶、淀粉酶的活性,对其蜗牛酶产品进一步测试,结果表明新疆蜗牛酶中的纤维素酶活力为450U/g淀粉酶为405U/g。验证了新疆蜗牛酶中纤维素酶的活力很高。     

酶工程研究进展与发展前景

结合笔者等人二十多年来在酶的生物合成及其调节控制，酶的分离纯化，酶，细胞和原生质体固定化，酶分子修饰，酶的非水相催化，植物细胞培养生产药用酶等酶工程领域中所取得的研究成果，简单介绍了二十多年来酶工程研究的进展，对酶工程的发展前景进行了探讨。     

蜡状芽孢杆菌Bc-05菌株纤溶酶的酶学性质

对蜡状芽孢杆菌Bc-05茵株的发酵上清液经硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析所获得的纤溶酶进行性质研究.结果表明:经纤维蛋白平板法检测该酶有直接水解纤维蛋白和激活纤溶酶原的双重作用,最适作用温度37℃,最适pH=8.0,在pH=8.0条件下25℃和37℃放置24 h酶活力仍保持77.52%和78.96%,该酶体外对兔血凝块有明显的溶解作用;Ca2+,Mn2+离子对该酶具有激活作用,而Cu2+,Fe3+完全抑制其纤溶活性,PMSF,EDTA和DTT对该酶有抑制作用,说明活性中心含有二硫键、金属离子和丝氨酸;测其N端10个氨基酸序列为NH2-Val-Thr-Pro-Thr-Asn-Ala-Val-Asn-Thr-Gly,与其他生物来源的纤溶酶相比较没有同源性.     

微生物产酶的不确定性因素确定化的一种方法

微生物产酶是一个具有不确定性的复杂过程．将数学上的关联分析思想应用于白腐菌的产酶过程,计算影响该菌产酶的四种因素的关联度．结果表明,其中含水率与白腐菌分泌木素过氧化物酶、锰过氧化物酶的关联度最大,分别达0．8310和0．7479,说明含水率是影响该菌产酶的最主要因素．此外,提出可建立GM（1,1）模型用于日产酶量的预测,为今后探索微生物产酶条件提供了方法参考．     

生物荧光素酶的活性与固相化

目的：探讨荧光酶的活性和稳定性，方法：酶亚单位重聚酶固相化，结果：获得稳定，高活性的荧光酶，结论：亚单位重聚和酶固相化是酶稳定性和活性的保证。     

乙醇对鲍鱼碱性磷酸酶活力与构象的影响

以乙醇为效应物研究对鲍鱼碱性磷酸酶(ALP)活力影响的结果表明．酶的剩余活力随着乙醇浓度增大而迅速下降，乙醇浓度40％可使酶活力完全丧失．说明乙醇对鲍鱼ALP有明显的失活作用，JG50为13％．含较低浓度乙醇(30％)的失活过程是可逆的反应．测定乙醇对酶的失活作用机理．结果表明乙醇对鲍鱼ALP的失活作用是非竞争性机制，说明底物存在不影响乙醇对酶的失活作用．应用荧光光谱、紫外吸收光谱研究鲍鱼ALP经乙醇微扰后的分子构象变化，发现乙醇对酶分子构象有显的影响，酶的内源荧光强度随乙醇浓度增大而增强．荧光发射峰逐渐发生红移．紫外吸收光谱在276nm吸收峰随乙醇浓度增大而增强．这些结果表明．酶蛋白分子中的生色基团残基的微环境发生变化．     

赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)内切型纤维素酶组分鉴定及纯化

从赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)匀浆液中提取出粗酶液,利用DNS法分析粗酶液中内切型纤维素酶(也称Cx酶)的活力.用刚果红染色法确定了赤子爱胜蚓含有3种内切型纤维素酶,将其分别称作Cx酶Ⅰ、Cx酶Ⅱ和Cx酶Ⅲ.经DEAE-Cellulose-52离子交换层析分离内切型纤维素酶,得到0.15～0.20 mo...     

发光杆菌荧光素酶的提取

建立荧光素酶的提取方法。方法 饱和硫酸铵分步提取;亲和层析和离子交换层析纯化;聚丙烯酰胺凝胶电泳测分子量。结果 得到分子量为79ku的荧光素酶。结论 建立了稳定、可靠的荧光素酶提取方法。     

刺嫩芽中多酚氧化酶活性的影响因素研究

研究了pH、温度以及抑制剂与激活剂对从新鲜刺嫩芽中提取出的多酚氧化酶（PPO）活性的影响,及温度对其热稳定性的影响.结果表明：以邻苯二酚为底物,该酶的最适pH为4.4,在pH 4.0-4.8内有较高的稳定性;最适温度为12.5℃,在30℃以上失活;70℃热处理90 s可以钝化PPO的活性;抗坏血酸（Vc）,L-Cys对PPO有抑制作用,SDS对PPO有激活作用.     

壳聚糖修饰L-天门冬酰胺酶对酶活及抗原的影响

采用水溶性壳聚糖对L－天门冬酶胺酶进行化学修饰，修饰后的酶活回收率高达705，修饰酶的比活为每毫克蛋白质121.79U，pH值为7.4，更接近于人体血浆pH值(7.2-7.4），对底物的亲和力有所提高，稳定性增加，抗原性仅为自然酶的1／3，增加了临床使用的安全性。