尿胰蛋白酶抑制剂纯化工艺研究

胰蛋白酶抑制剂是具有抑制胰蛋白酶作用的一类物质,可以调控生物体内多种生理反应,具有许多临床应用功能。采用大孔阴离子交换树脂吸附、硫铵沉淀、混合模式层析等纯化手段,成功从男性尿中分离纯化获得尿胰蛋白酶抑制剂,其生物活性达2 500 IU/mg,比活性达4 000 IU/mg·pr,活性回收率达75%。该纯化工艺具有步骤少、回收率高、产品纯度高等优点,适合于大规模生产。     

黄山栾果与栾果中维生素含量的研究

用高效液相色谱法测定了黄山栾果与栾果中的维生素A，D，E含量，结果表明：黄山栾果中维生素A的含量为22．29～70．28IU/g，维生素D2为0．223～2．117IU／g，维生素E为0．254-3．059mg／100g；栾果中维生素A的含量为43．95—91．71IU／g，维生素D2为0．035—2．707IU／g，维生素E为0．165-7．002mg/100g．综合其营养价值，黄山栾果和栾果在产品开发和利用上有较广阔的前景．     

苏云金杆菌中国品系Bt ken—Ag 10t罐发酵研究

苏云金杆菌Btken-Ag在10t发酵罐中,以豆饼粉和玉米淀粉为底物发酵30h,发酵液毒力效价平均达2096IU／μL。粉剂产品回收率为84．5％,其性能指标分别达到：毒力效价为17000IU／mg,活孢子数在3×1010个／g以上,细度为95％通过300目标准筛,悬浮率在85％以上,含水量在5％以内,润湿性在15s以下。     

不同品种胡萝卜中β-胡萝卜素的测定与分析

利用紫外分光光度法测定了27个不同品种，同一品种不同产地胡萝卜中所含的β-胡萝卜素含量。结果表明：品种中加一号胡萝卜所含β-胡萝卜素最高，达平均400．08mg／100g，其次是红芯六号，达平均272．86mg／100g，第三是含量较高的日本特选金笋六寸，平均含量达270．42mg／100g，石河子品种新胡萝卜一号所含β-胡萝卜素也较高。而同一品种不同产地的新黑田五寸胡萝卜所含隆胡萝卜素也有差别，但是都在150mg／100g左右。本实验的研究为胡萝卜育种，加工食品胡萝卜原材料的选材有重要的指导意义。     

鸢尾切花的保鲜研究

对鸢尾切花用4种保鲜剂进行保鲜研究，测其衰老过程中含水量、可溶性蛋白含量的变化，结果显示：保鲜剂的处理明显地延缓了鸢尾切花的衰老，尤以4号配方(30mg／L S 200mg/L 8-HQ 100mg/L CA 50mg／L BA)对鸢尾有较好的保鲜效果。     

激素、无机离子浓度及糖对苹博一号快繁生根的影响

研究探讨了激素、无机离子浓度及糖对苹博一号快繁生根的影响，结果表明：IAA0．5～2mg／L和IBA0．2—1mg／L时均能诱导出正常的根系；低浓度的无机离子和低浓度的糖有利于根原体的形成；试管苗生根时对糖的纯度要求很严。     

重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体的工业化制备与性质研究

将含有人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)重组表达质粒的工程菌经10L种子罐培养及100L发酵,IPTG诱导表达,其表达量为占菌体总蛋白的20％,表达产物经体外变复性、TI—Sepharose亲和层析、SP-Sepharose离子交换层析,每100L发酵液得重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(K2tPA)纯品4g,纯度达95％以上,比活大于500000IU／mg,内毒素及热源含量、宿主蛋白残留量、宿主DNA残留量等均达到临床使用标准．其分子量(质谱测定)、氨基酸组成、N、C-端氨基酸序列分析等均与理论值相符．同时进行了等电点测定及肽图分析等性质研究．     

啤酒糟固态发酵生产生物农药条件的优化

探讨了以啤酒糟为主要原料进行固态发酵生产生物农药的方法，研究了不同培养基成分及培养条件对苏云金杆菌毒力效价的影响．实验结果表明，最适发酵培养基为：啤酒糟1000g，玉米粉15g，豆粕180g，KH2PO42g；其最适发酵条件为：原料含水量为60％，发酵温度30℃、pH为7．5，培养时间56h．分析结果表明，苏云金杆菌的毒力效价达4960IU／mg．     

唐古特大黄黄酮类化合物的纯化

实验以HZSl6树脂分离纯化R-M-B黄酮，工艺条件为：唐古特大黄（R-M-B）黄酮溶液上样浓度为1mg／mL左右时，树脂对R-M-B黄酮的吸附量较大，为2．33mg／mL，用体积分数为70％乙醇进行洗脱，解析率达95．1％，干操产物中黄酮纯度为85．3％，总黄酮回收率为75％，产物的收率为1．06％，     

猪凝血酶的制备和部分性质的研究

以猪血为材料离心制取血浆.采用-20℃冻存血浆,离心,等电点沉淀,(NH4)2SO4盐析得凝血酶原.经Ca2+激活,DEAE-52阴离子交换柱层析纯化,可获得比活性958.9IU/mg的电泳纯凝血酶,收率为56.3%.研究发现,室温(25℃)下放置20小时以上,凝血酶酶活力下降82%;pH大于或小于7.2,酶活力下降明显.     

凝血酶活力影响因素的初步研究

为探讨凝血酶的最佳作用条件，提高其止血效果，以标准凝血酶为原料，在不同温度、pH值、Ca^2 浓度、底物浓度和酶浓度下研究其酶活性的变化。结果显示：凝血酶的最佳作用温度为37℃，最适pH值为7到9，最适Ca^2 浓度为0．01mol／L，纤维蛋白原浓度为0．1％，凝血酶浓度为1u／mL。     

湿地松的组织培养及植株再生

在以湿地松实生无菌苗带子叶顶芽为外植体诱导丛生芽的过程中，激素的种类及浓度、处理时间等对丛生芽的诱导影响较大，表现为：单独使用6-BA即可诱导丛生芽分化，但NAA与6BA协同作用效果更佳；外植体在改良GD 5mg／L 6-BA 0．1mg／L NAA的培养基上培养4～5周，其丛生芽诱导率最高达95％。将丛生芽单个切下继代培养在改良GD 3．5mg／L 6-BA 0．05mg／L NAA的培养基上时增殖较快。改良GD培养基中添加0．05～0．1mg／L生长素(NAA)或0．5g／L活性炭(AC)能明显促进丛生芽伸长；培养基中的大量元素减半则不利于湿地松丛生芽的伸长生长。将伸长的丛生芽单个切下置于生根培养基中，4周后生根率达53．3％，移栽成活率达85％。     

厚荚相思组织培养与快速繁殖

以5年生厚荚相思(Acacia crassicarpa)的萌芽茎段为外植体进行了组织培养的初步研究，结果表明：改良的MS 6-BA2．0mg／L NAA0．2mg／L培养基能够较好地诱导芽的分化和增殖；适宜的继代增殖培养基为改良MS 6-BA1．5mg／L NAA0．2mg／L；较为想的生根培养基为1／2MS IBA0．5mg／L，生根率达95．0％；生根苗的移栽基质以黄心土的移栽效果最好，移栽成活率达90．0％。     

泗洪大枣组培繁殖技术

泗洪大枣(Zizyphus jujuba Mill．var．sihongensis)组培繁殖技术研究结果表明，促进泗洪大枣试管苗茎、叶营养生长效果最佳的培养基配方为改良WPM＋1．0mg／LBA＋0．005mg／LTDZ＋0．2mg／LIBA＋3．0％S，40d生长高度达3．8cm；促进增殖最佳培养基配方为改良WPM＋1．5mg／LBA＋0．005mg／LTDZ＋0．15mg／LIBA＋3．0%S，35d增殖4．5倍；促使试管苗产生优质根系的最佳培养基配方为1／2WPM＋0．5mg／I．IBA＋0．2mg／LNAA＋2．0％S，试管苗生根率达90％以上，且发根粗而短，生理活性旺盛；生根试管苗在V砻糠灰：V黄心土=3：2混合的基质中移栽，成活率最高达85．0％。     

Te(IV)对钝顶螺旋藻和极大螺旋藻的生物效应

研究了Te(Ⅳ)对西Spirulina platensis和Spirulina maxima两种螺旋藻的生物效应，结果表明，Te(Ⅳ)质量浓度在0．01～2mg／mL范围内对钝顶螺旋藻的生长有促进作用，且1mg／mL的Te(Ⅳ)促进作用最大，在此浓度范围内Te(Ⅳ)对极大螺旋藻生长影响则不明显；Te(Ⅳ)质量浓度大于32mg／mL时对两种螺旋藻均有抑制作用，其对钝顶和极大螺旋藻的半数有效质量浓度(96hEC50)分别为36．1mg／L和87．9mg／L，显微观察结果表明，当ρ[Te(Ⅳ)]≥100mg／L时，两种螺旋藻均出现严重的断裂和变形。     

山蛭素（haemadin）在毕赤甲醇酵母中的表达及其性质鉴定

人工合成山蛭素基因后,利用基因重组的方法将山蛭素的基因克隆到pPicZαA载体,经过线性化,电转至毕赤酵母GS115中表达。使用浓度高达1500 μg/mL的zeocin筛选得到高拷贝插入的GS115-H菌株,经过优化摇瓶表达条件表达量达到100 mg/L。摇瓶培养物经离心取上清,分别使用3 kD和10 kD的超滤膜超滤,阳离子交换层析和凝胶过滤层析等纯化步骤之后,得到纯度高于95%的目的蛋白,产出量为40 mg/L,回收率为40%。通过以chromozym TH为底物的凝血酶酰胺水解实验证实了其体外生物学活性：其抑制凝血酶常数为(2.46±0.13)×10^-13 mol/L。     

生长素对乔纳金苹果试管苗生根的影响

以三倍体苹果品种乔纳金试管苗顶部茎段为试材，将其接种于添加不同生长素及其组合的MS(基本培养基)中，研究IAA、IBA、NAA 3种生长素对苹果试管苗生根的不同效应。结果表明：3种生长素均可诱导乔纳金试管苗生根，且组合处理的效应普遍优于单种激素，其中以MS IBA 0．8mg／L IAA 0．7mg／L为最好，其生根率达92％。     

奶牛生物（活菌）饲料的研究

以酒精糟、白酒糟、碎玉米、啤酒糟等为原料，添加尿素、（NH4）2SO4及营养液F，采用“液体种子培养，多菌种混合固态发酵技术”生产奶牛生物（活菌）饲料。饲料粗蛋白平均含量36．55％、提高率1635％；酵母菌、有效细菌总数及活菌率分别为：7．85×10^8个g、7．11×10^9个，g和82．2％；β-淀粉酶1356mg／（g．h）、纤维素酶168um／（g．h）、中性蛋白酶1088ug／（g．min）、碱性蛋白酶372ug/（g·min）、糖化酶110u／（g．h）；VA80IU／（100g）、VB：2．35mg／（100g）、VD2945IU／（100g）、VC1．1mg／（100g）、烟酸10．7mg／（100g）。     

rPA(K)原核表达产物的复性与纯化

为探索新型rPA(K)在原核系统中表达产物的纯化和复性,采用不同的洗涤剂(脲、Triton X - 100、乙醇)依次洗涤包涵体,又经硫酸铵沉淀,得到了经初纯后纯度较高的包涵体.结果表明,经2mol/L脲、1mL/L Triton X - 100、200mL/L乙醇洗涤,15%饱和度的硫酸铵沉淀后,包涵体的纯度由16.0% 提高到56.6%.在此基础上,利用稀释复性和透析复性2种方法对包涵体进行复性,以恢复产物的天然构象,获得具有生物学活性的目的蛋白.结果如下:采用透析复性法,rPA(K)的比活可达1.33×105IU/mg;采用稀释复性法,rPA(K)的比活可达1.06×105IU/mg.利用S·TagTM rEK纯化试剂盒对目的产物进行进一步纯化,并对rEK和MgCl22种洗脱剂的洗脱效果进行了比较.SDS - PAGE结果显示,MgCl2洗脱后的产物,分子量未发生变化,仍为43ku,其纯度为72%;而rEK洗脱后的产物,其纯度达到了72%,且分子量减小至约40ku,表明去除了融合蛋白中的非目的片段.     

异烟肼中毒抢救成功1例

1病例简介患者女。30岁，自服异烟肼80余片（0．ig／片），l小时后被家人急送来院。查体：T36．7℃、Pgl次／分，R22次／分、Bpls．5／7．skPa、SpO。94％，意识不清，口吐白沫，频繁的癫痛样大发作，双目凝视，双瞳孔等大等回约3mm，对光反射迟钝，心、肺、腹均阴性，四肢肌张力增强，巴氏征（＋），无大、小便失禁。血、尿常规正常。24小时后全血生化检查：天门冬氨酸转氨酶105IU／L（我院正常参考值l一49IU／L），有肝损害。2治疗吸氧，VitB。250mg静推，安定10mg静注，经上述治疗抽搐停止后，清水洗胃5000Inlx3，VitB。sg加人10…