用LBA4404／pcAMBIA系列转化水稻的最佳条件

用带有ｇｕｓ报告基因的农杆菌ＬＢＡ４４０４／ｐＣＡＭＢＩＡ１３０１转化水稻品种鄂宜１０５成熟胚诱导的愈伤组织,以ｇｕｓ基因瞬间表达活性为指标测定转化率频率,对于利用ｐＣＡＭＢＩＡ表达载体系列进行水稻遗传转化的最佳条件进行了初步的研究。结果表明：最适菌液浓度值为Ｄ（６００）＝１．０,最适共培养温度为２２－２８℃;共培养培养基的ｐＨ值为５．２－６．２这一较宽的范围内均可。     

油菜染色体工程研究─—蓝花子特性导入油菜

利用染色体工程，合成油菜－蓝花子杂种双二倍体、倍半二倍体及油菜染色体异附加材料．油菜与蓝花子杂种双二倍体（ＡＡＣＣＲＲ）体细胞染色体数２ｎ＝５６，其植株开白花，ＰＭＣ＿ｓ减数分裂中期Ⅰ具有２８Ⅱ，雌雄育性都较差，倍半二倍体（ＡＡＣＣＲ）的２ｎ＝４７，开白花，ＰＭＣ＿ｓ不能完成减数分裂，雌雄性均不育．双二倍体育性受温度影响较大，１５～２５℃是它开花的最适温度，通过测交，发现异附加材料Ａｄ－６具有恢复油菜ＯｇｕＣＭＳ雄性育性的特性．提出并初步证实了“利用雄性不育的萝卜胞质作为选择压力，保存和纯化油菜ＯｇｕＣＭＳ恢复基因”育种思想的可行性．并证实了异附加材料Ａｄ－５具有雄性不育的遗传特性．     

低分子量单链尿激酶基因在酵母中的表达

Ｍ１３ｓｃｕＰＡ３２ｋ克隆载体经ＨｉｎｄⅢ酶切得到ｓｃｕＰＡ３２ｋ的基因，与分泌型酵母表达载体ｐＧＬ重组得到正向插入的ｓｃｕＰＡ３２ｋ酵母表达载体．用改进的酵母完整细胞快速高效转化法转化ＡＢ１０３酵母菌株，转化效率达到１．８×１０５个转化子／μｇ载体ＤＮＡ，并在直接测活培养板上筛选出阳性转化子．用纤维蛋白平板溶圈测活法检测结果表明阳性转化子能分泌纤溶酶原激活剂．     

水稻原生质体高频分裂及基因转化

从粳稻品系８９８和籼稻不育系珍籼Ａ的悬浮细胞系中制备的原生质体，分裂频率分别达１８．９％和３５％。低压脉冲电泳仪介导外源基因转移的水稻原生质体，分裂频率也在１０％以上，转化的小细胞团中检测到外原基因Ｇｕｓ的表达，对原生质体的制备、培养及转化作了下述改进：（１）添加２μｇ／Ｌ２，４－Ｄ的Ｎ６培养基培养悬浮细胞及原生质体可获高频分裂，添加０．３μｇ／Ｌ６－ＢＡ或０．１μｇ／Ｌ ＮＡＡ不利于分裂；（２）     

青菜花粉管通道法导入外源DNA的研究初报

采用花粉管通道法，将青菜株系７５Ｆ５、１４号大白菜、紫阳等三个品种的总ＤＮＡ及质粒ｐＡｃｔ１－Ｄ ＤＮＡ导入青菜６０５品系，收获青菜种子。种子发芽后分别提取约两周苗龄的小苗总ＤＮＡ，并经ＥｃｏＲⅠ酶切，以ｇｕｓ基因片段为探针做子杂交，证实了外源ｇｕｓ基因已整合到青菜６０５品系中；田间观察还获得了一株与供体大白菜花形相似的变异株。     

大肠杆菌二硫键异构酶DsbA和脯氨酸异构酶PPIaseA双顺反子表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

用ＰＣＲ方法获得大肠杆菌二硫键异构酶ＤｓｂＡ的编码基因ｄｓｂＡ和大肠杆菌脯氨酸异构酶ＰＰＩａｓｅＡ的编码基因ｒｏｔ,并将ＤｓｂＡ和ｒｏｔ以双顺反子形式克隆至含有Ｐｔａｃ启动子的表达载体ｐＫＫ２３３－２中。在ＩＰＴＧ的诱导下,ＤｓｂＡ和ＰＰＩａｓｅＡ获得了表达。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和薄层扫描分析表明：ＤｓｂＡ、ＰＰＩａｓｅＡ的表达水平分别为占菌体裂解上清液总蛋白质的４．３２％和４．０６％。     

小麦叶绿体psbA基因的克隆及表达

用ＰＣＲ直接从小麦叶绿体基因组扩增到完整的ｐｓｂＡ基因，并构建了ｐｓｂＡ基因的克隆ｐＴＤ１Ⅱ。为研究ｐｓｂＡ基因在Ｅ·ｃｏｌｉ中的表达，将完整的ｐｓｂＡ基因正向插入高表达载体ｐＫＫ２２３－３中构建表达克隆ｐＫＴＤ１。含有重组表达质粒的转化细胞经ＩＰＴＧ诱导后提取总蛋白，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，小麦叶绿体ｐｓｂＡ基因能在Ｅ·ｃｏｌｉ中表达３２ｋＤ的Ｄ１蛋白，表达的Ｄ１蛋白占细菌总蛋白的３％以上。     

外源基因导入部分脱壁的大麦细胞及其转基因植株的再生

采用ＰＥＧ法、电击法以及ＰＥＧ＋电击法将带有ｇｕｓ和ｎｐｔⅡ基因的ｐＢＩ１２１质粒导入部分脱壁的大麦细胞，通过Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交、ＧＵＳ和ＮＰＴⅡ蛋白活性检测，证实了外源报告基因已在大麦基因组中整合并在转化细胞中获得表达。     

逆转录病毒载体介导的Anti-ras核酶对T24ras转化3T3细胞的抑制作用

突变ｒａｓ基因存在于多种人类肿瘤细胞中,本文将可特异性切割１２位点突变ｒａｓ（Ｔ２４ｒａｓ）之核酶Ｒ８通过逆转录病毒载体导入Ｔ２４ｒａｓ转化的ＮＩＨ３Ｔ３细胞,以期检测核酶在细胞内对其靶基因的作用．结果表明Ｒ８可特异性地切割突变ｒａｓｍＲＮＡ,导致转化细胞生物学特性如细胞形态、生长速度等在一定程度上发生逆转     

聚砜-Al_2O_3复合膜的制备及表征

本文报导了用相转化法（ｓｏｌ－ ｇｅｌ） 制备的聚砜－ Ａｌ２Ｏ３ 复合膜． 该复合膜是将Ａｌ２Ｏ３ 微粒填充到聚砜中制成的． 对该复合膜的机械性能、超滤性能、扫描电镜（ＳＥＭ） 、亲水性和孔隙率进行了测试． 对分散剂和制膜工艺对复合膜性能的影响作了分析