人参皂苷CK转化复合菌群的筛选及条件优化

目的引入协同关系的理念,利用TLC和HPLC法从人参栽培地土壤中筛选出高效转化人参皂苷CK的复合菌群R2A48.方法采用微生物转化法生产人参皂苷CK是目前的首选方法,而高效菌株的筛选是大量制备人参皂苷CK的首要条件.结果通过因子转化实验确定其最佳转化条件:初始p H为7.0,底物浓度为3%,转化温度为35℃,摇床转数为140 r/min,转化时间为14 d.结论本研究为目前只利用单一微生物转化人参皂苷CK的研究提供一个新的思路和途径,对微生物转化人参皂苷的生产具有重要意义.     

三七内生菌转化三七叶苷初探

从三七中筛选出21株内生菌,分别进行三七叶苷的转化实验.采用TCL法初步筛选出具有转化活性的两种菌株,采用大孔树脂对两株菌的发酵产物进行富聚,硅胶和凝胶柱层析分离纯化,质谱和核磁波谱技术对产物进行结构鉴定,得到两种稀有人参皂苷,分别是人参皂苷CK和人参皂苷Rh_(12).     

秦岭中草药槐角中人参皂苷类化合物的分离及结构鉴定

目的 分离鉴定秦岭中草药槐角的人参皂苷类成分.方法 槐角用乙醇提取,利用制备型高效液相色谱技术对乙醇提取物进行分离纯化,采用高分辨质谱及核磁共振波谱法确定化合物结构.结果 从槐角中分离鉴定了8个化合物,均为人参皂苷类化合物.这8个化合物分别为人参皂苷F3(1),人参皂苷F5(2),人参皂苷Re(3),人参皂苷Rg1(4),20(S)-人参皂苷Rg2(5),20(R)-人参皂苷Rg2(6),20(S)-人参皂苷Rh1(7)和20(R)-人参皂苷Rh1(8).结论 这8个化合物均为首次从槐角中分离得到,这为槐角在医药工业领域的开发应用提供了理论依据,也为秦岭槐角的进一步综合利用提供理论参考.     

高效液相色谱法测定人参提取物中Rh2的含量

研究了高效液相色谱法测定人参提取物中人参皂苷Rh2 含量的方法 ,结果表明 ,人参提取物中人参皂苷Rh2 的平均含量为 0 .3 2 00 (n =3 ) ,加样回收率为 98.5 0 0 (n =5 ) .方法准确 ,可靠 ,重复性好 .     

高效液相色谱法测定人参提取物中Rh2的含量

研究了高效液相色谱法测定人参提取物中人参皂苷Rh2含量的方法，结果表明，人参提取物中人参皂苷Rh2的平均含量为0．32％（n=3),加样回收率为98．5％（n=5)，方法准确，可靠，重复性好。     

原人参二醇、人参皂苷CK和原人参三醇对阿霉素诱导足细胞损伤的保护作用

为探讨原人参二醇(PPD)、人参皂苷CK和原人参三醇(PPT)对肾病综合征(NS)中足细胞损伤的保护作用，本研究采用阿霉素(ADR)诱导足细胞损伤。通过CCK8及细胞划痕、Transwell实验分析，结果表明三种人参皂苷可以改善ADR损伤后足细胞的增殖活力并抑制其迁移能力。Western blot及细胞免疫荧光实验结果表明PPD、人参皂苷CK和PPT均可以通过降低Desmin、NF-κB P65、p-NF-κB P65、p-IκBα及升高IκBα的表达水平缓解足细胞损伤，并且可以促进GR的表达及其核转位，其中PPD的作用效果较好。计算机分子对接结果显示PPD、人参皂苷CK和PPT与GR均具有一定的结合活性，但PPD与GR的结合活性最优。因此，PPD、人参皂苷CK和PPT均可以在一定程度上改善ADR诱导的足细胞损伤，其中PPD在保护足细胞损伤方面具有一定的优势。     

人参SQS基因的干扰载体构建及转化人参愈伤组织

以5年生人参为材料, 根据人参SQS基因设计正义及反义片段引物, 构建了SQS基因干扰表达载体; 利用农杆菌转化法转化人参愈伤组织, 对获得的抗性愈伤组织进行PCR检测及实时定量PCR检测, 并对抗性愈伤组织的皂苷进行HPLC分析. 实验结果表明, 与非转化人参愈伤组织相比, 转化后的愈伤组织SQS基因表达量降低, 皂苷含量有所变化. SQS是人参皂苷生物合成途径的关键酶, 抑制SQS基因的表达, 可调控人参皂苷含量变化.     

尖孢镰刀菌对人参皂苷的动态响应机制

研究尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）与人参根部中皂苷质量比的关系, 为确定人参根部接种尖孢镰刀菌对人参皂苷质量比的影响, 利用高效液相色谱（HPLC）法监测3种人参皂苷Rb1,Re,Rg1的质量比在接种尖孢镰刀菌120 h内的变化. 结果表明： 尖孢镰刀菌侵染后, 人参皂苷Rb1的质量比升高, Re,Rg1的质量比未发生显著改变;人参皂苷Rb1对尖孢镰刀菌分生孢子有明显抑制作用, Rb1的质量浓度越大, 萌发率越低, 抑制率越高, Rg1和Re对尖孢镰刀菌孢子萌发几乎无抑制作用. 因此, Rb1可能是人参根部对抗尖孢镰刀菌产生的抗病化合物.     

超临界CO2绿色萃取人参皂苷Rh1、人参皂苷Rh2的研究

运用超临界CO2萃取技术从人参总次苷中萃取人参皂苷Rh1、人参皂苷Rh2。以不同溶剂为夹带剂,采用超临界CO2对人参皂苷Rh1、人参皂苷Rh2的萃取进行研究。通过高效液相色谱测定产物得率。在萃取压力为30MPa、温度45℃、时间3h、乙酸乙酯为夹带剂(10mL乙酸乙酯作为固态夹带剂,290mL乙酸乙酯作为动态夹带剂)条件下,超临界CO2萃取出人参皂苷Rh1、人参皂苷Rh2。人参皂苷的得率随加入的乙酸乙酯量的增大先增大后基本不变,随萃取压力、萃取温度的升高先增大后减小。在此最佳条件下,人参皂苷Rh1和人参皂苷Rh2的得率分别为7.33%和14.69%。     

稀有人参皂苷对实验性白癜风模型的影响

探究稀有人参皂苷对实验性白癜风动物模型的治疗作用。MTT法检测人参皂苷Rh2和人参皂苷Rg3组合物对鼠黑素瘤细胞增殖活性的影响。采用两种化学脱色法(分别使用氢醌和过氧化氢)制备实验性白癜风动物模型,经不同剂量(1. 0 g/kg·d,2. 0 g/kg·d)的人参皂苷干预后,肉眼观察药物治疗实验性白癜风动物模型的疗效,并拍照记录。考察人参皂苷Rh2和人参皂苷Rg3组合物对白癜风动物模型血浆中单胺氧化酶(MAO)、胆碱酯酶(CHE)和血清酪氨酸酶(TYR)含量的影响。MTT实验结果表明该组合物对黑素瘤细胞的增殖具有显著的抑制作用。经稀有人参皂苷干预后的白癜风动物模型血浆中MAO值降低,CHE活力降低,TYR含量增加。通过肉眼观察能明显地看到动物模型白癜风症状减轻甚至消失。稀有人参皂苷对实验性白癜风动物模型具有良好的治疗作用,为临床应用提供了实验依据。