木犀草素与木犀草苷的抗炎活性对比研究

研究并比较木犀草素及其糖苷木犀草苷的抗炎活性.角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀,醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加等体内实验表明木犀草素及木犀草苷具有一定的抗炎活性.木犀草素5 mg/kg组在1 h时对角叉菜胶所致大鼠足跖肿胀具有一定的抑制作用,而木犀草苷无明显的抑制作用;木犀草素20 mg/kg组对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加有显著抑制作用,且作用强度优于木犀草苷20 mg/kg组.进一步以脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW 264.7细胞株为炎症反应模型,采用MTT法、Griess法、Western blot法考察木犀草素和木犀草苷的抗炎活性并对比二者之间的活性差异.结果显示,木犀草素对LPS诱导RAW 264.7产生炎症介质NO和炎性蛋白iNOS、COX-2蛋白高表达表现出明显的抑制作用;木犀草苷对LPS诱导RAW 264.7细胞iNOS蛋白高表达具有抑制作用,以上实验结果表明木犀草素和木犀草苷具有显著抗炎活性,且木犀草素的抗炎活性在一定程度上优于木犀草苷.     

基于Hsp90 ATPase活性的抑制剂筛选模型研究

热休克蛋白90(Heat shock protein,Hsp90)作为分子伴侣,参与调控肿瘤细胞多条信号通路,对肿瘤细胞生长有重要作用.以pGEX-4T-1为载体,构建了Hsp90表达载体于宿主大肠杆菌中表达.通过孔雀绿磷钼酸铵-无机磷检测法,测定异源表达的Hsp90 ATPase活性.实验得出Hsp90对ATP的米氏常数(Km)为369.1 μmol/L,在Hsp90和ATP浓度分别为0.18,1 mmol/L时转换效率常数(kcat)为1.6 min-1,最大反应速率(Vmax)为1.0 μmol/(L·min).基于该方法,建立Hsp90 ATPase活性抑制剂筛选模型,以Geldanamycin和Radicicol为阳性对照,发现Rifamycin、Rugulosin及MycoE也有较强的Hsp90 ATPase抑制活性.该方法可用于筛选抗肿瘤候选化合物的研究,同时也可为具有ATPase活性蛋白的抑制剂筛选提供参考.     

木犀草素和木犀草苷对K562细胞增殖的影响

选择合适浓度的DMSO溶剂,观察和比较糖苷和苷元对K562细胞增殖的影响．采用MTT法测定DMSO、木犀草素和木犀草苷对K562细胞增殖的影响,对结果进行了统计分析．处理结果显示：DMSO作为溶剂对K562细胞增殖产生影响的最小的浓度为0．1％．梯度实验显示：木犀草素和木犀草苷同它们的抑制作用都有量效关系．结果表明：最好选用0．1％DMSO作为观察药物影响K562细胞增殖实验的助溶剂,浓度偏大或偏小都会表现出它对K562细胞增殖的影响;在0．1％DMSO中,木犀草素和木犀草苷对K562细胞增殖均可表现出抑制作用,且呈浓度依赖性;木犀草苷的作用比木犀草素强;1．15umol／L的木犀草苷在水溶液中的作用比在0．1％DMSO中的强,且差异极其显著．     

非小细胞肺癌细胞A549对紫杉醇耐药机理研究

目的利用非小细胞肺癌细胞对紫杉醇的耐药株A549/taxol,研究其对紫杉醇耐药性的分子机理.方法通过长时间低浓度的紫杉醇处理A549细胞的方法获得其耐药细胞株A549/taxol,提取细胞总RNA并逆转录为cDNA,实时荧光定量PCR观察其凋亡基因的表达情况,并通过不同siRNA处理细胞进行基因沉默,研究其在不同遗传背景下对紫杉醇的耐受情况.结果发现非小细胞肺癌细胞对紫杉醇的耐药株A549/taxol的基因表达紊乱,表现为ING5的高表达抑制了凋亡基因Bcl-2的表达水平,而Bcl-2是紫杉醇诱导细胞凋亡所必需的.结论以上结果初探了A549对紫杉醇耐药性的机制,为探寻紫杉醇化疗新策略提供了新的思路.     

Hsp90抑制剂17-AAG通过EGFR,IGFR途径抑制乳腺癌细胞的增殖

 17-AAG通过抑制Hsp90的功能而抑制多种肿瘤细胞的生长增殖,用不同浓度17-AAG作用于乳腺癌细胞株MDA-MB-231和BT474,用SRB法检测细胞相对存活数,计算半数抑制药物浓度IC₅₀;并用Westernblotting检测Hsp90的"顾客"蛋白EGFR,IGFR-1以及G2/M细胞周期蛋白cdc2的表达,研究17-AAG抑制乳腺癌细胞的增殖,促进细胞凋亡的途径.结果显示,1μmol/L的17-AAG已能完全抑制MDA-MB-231和BT474细胞增殖,2种细胞的IC₅₀分别为0.0587,0.0576μmol/L;17-AAG作用的乳腺癌细胞EGFR,IGFR-1表达明显下调,此作用呈剂量依赖性.这些研究结果表明17-AGG可显著抑制乳腺癌细胞MDA-MB-231和BT474的生长增殖,此作用与17-AGG抑制细胞生长因子受体途径有关.     

强力霉素对人非小细胞肺癌A549细胞的增殖抑制及促凋亡作用

为研究强力霉素体外对人非小细胞肺癌A549细胞的增殖及凋亡的影响。应用MTT比色法研究不同浓度强力霉素(2.5,5,10,20,50mg/L)对A549细胞增殖的影响。荧光显微镜、琼脂糖凝胶电泳、AnnexinV-PI双标法等多项方法,研究强力霉素对A549细胞的促凋亡作用;采用免疫组化的方法,观察药物作用后bcl-2和bax的表达。强力霉素作用后,A549细胞的吸光度值降低,并出现凋亡特有的细胞核改变DNA梯状条带,早期凋亡的细胞数增加,伴有bcl-2的下调,bax上调。这表明强力霉素可抑制人非小细胞肺癌A549细胞的生长,并诱导细胞发生凋亡,其诱导凋亡的作用可能与其调节bcl-2/bax的表达有关。     

我国科学家发现新型PGAM1别构调节抑制剂抑制非小细胞肺癌的生长和转移

<正>2019年10月10日,上海交通大学医学院药理学与化学生物学系沈瑛副研究员课题组联合复旦大学药学院周璐副教授和上海中医药大学陈红专教授在Cell Metabolism杂志发表长文"A novel allosteric inhibitor of phosphoglycerate mutase 1 suppresses growth and metastasis of non-small cell lung cancer",率先报道磷酸甘油酸变位酶1(phosphoglycerate mutase 1,PGAM1)新型别构抑制剂对非小细胞肺癌的增殖、耐药和转移等生物学活性的多重抑制作用,揭示通过别构调节PGAM1同时干预     

非小细胞肺癌病因及治疗新进展

目的:探讨非小细胞肺癌的病因,临床分期系统的改动及治疗方案进展.方法:通过翻译、收集、国内外对肺癌研究的病因、临床分期系统的改动及治疗方案的新进展文献资料,进行总结.结果:吸烟为肺癌的主要危险因素,氡气是226镭的衰变产物,有放射性,为肺癌的第二病因,遗传和基因的改变与肺癌关系密切.肺癌新分期系统的改动,提出了肺癌的综合治疗.结论:非小细胞肺癌遗传和基因是一种外因通过内因发病的因素,新的临床分期系统的改动,顺铂治疗方案为治疗晚期非小细胞肺癌的较好方案.     

依托泊苷植入剂抑制非小细胞肺癌小鼠肿瘤局部复发的研究

文章通过在C57BL/6j小鼠皮下注射非小细胞肺癌细胞(Lewis lung cancer,LLC),建立非小细胞肺癌局部复发模型,研究依托泊苷(VP-16)植入剂对肺癌局部复发的抑制作用。实验制备了VP-16植入剂,并检测其在体内、外的释放度;考察VP-16植入剂对模型小鼠局部肿瘤复发时间和生存期的影响,并从体重、骨髓抑制和肝脏组织形态学等方面评价其安全性。结果显示,VP-16植入剂不仅能有效抑制肿瘤的局部复发,延长小鼠生存期,还可降低VP-16的骨髓抑制和肝脏损伤等毒副作用。     

Nrf2-ARE信号通路抑制剂OAD-85对肺癌A549细胞毒性作用机理研究

齐墩果酸(oleanolic acid,OA),是广泛存在于植物中的五环三萜类化合物,具有保肝、抗癌、抗突变、抗氧化、抗衰老等作用.临床上OA主要用于急慢性肝炎的辅助治疗,但由于其水溶性差、生物利用度低,限制了临床应用. OAD-85是齐墩果酸衍生物,通过研究发现其对多种肿瘤细胞具有较好细胞毒性,IC50值在7～16μmol/L之间.对肺癌A549细胞毒活性研究发现,OAD-85的细胞毒性与其抑制内源性抗氧化应激通路Nrf2 (转录因子)-ARE(抗氧化反应原件)密切相关.它能上调Nrf2胞浆锚定蛋白Keap1的表达,阻断Nrf2转位入核、增加核内转录阻抑蛋白Bach1的表达、阻断下游抗氧化信号的传递.在OAD-85作用下,细胞氧化应激产生大量活性氧(ROS),由于OAD-85对Nrf2-ARE通路的抑制作用,ROS不能及时被清除,大量累积于细胞中,最终导致A549细胞死亡.     

非小细胞肺癌微转移诊断进展

非小细胞肺癌(NSCLC)是最常见的恶性肿瘤.很多分期早,经过手术治疗的患者,术后仍出现转移及复发.这表明患者在术前已存在着通过常规手段无法检测的微转移病灶.国内外学者就非小细胞肺癌微转移的诊断做了大量研究,以期寻找到检测微转移的理想标志物及方法,更准确的分析,合理治疗,提高患者的生存率,但目前尚无统一标准.     

IGF-I、OPN、PTEN蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其意义

探讨胰岛素样生长因子1(IGF-I)、骨桥蛋白(OPN)和PTEN在人非小细胞肺癌中的表达及其相关性,并分析其与非小细胞肺癌的关系。应用免疫组织化学SP法检测61例肺癌组织和30例癌旁组织中IGF-I、OPN、PTEN的表达情况。结果显示,①肿瘤组织中IGF-I、OPN蛋白表达显著高于癌旁组织(P<0.05),IGF-I的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05),OPN的表达与患者肿瘤分化程度、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05),肿瘤组织中PTEN蛋白表达明显低于癌旁组织(P<0.05),PTEN的表达与肿瘤大小、肿瘤组织的分化程度、有无淋巴结转移有关(P<0.05)。②IGF-I的表达与OPN的表达呈正相关(P<0.05),IGF-I、OPN与PTEN的表达呈负相关(P<0.05)。研究表明,IGF-I、OPN、PTEN蛋白与非小细胞肺癌的发生发展密切相关,三者的表达对判断肺癌恶性程度和预后具有参考意义。     

扁塑藤素对非小细胞肺癌增殖及线粒体膜电位的调节作用

目的 分析扁塑藤素对体内外非小细胞肺癌增殖及线粒体膜电位的调节作用,初步探讨扁塑藤素的抑瘤增殖效果及可能机制.方法 将适量的扁塑藤素提取物分别作用于非小细胞肺癌细胞系(A549及H226)及动物模型(BALB/c裸鼠),应用MTT方法测定其细胞存活率,应用细胞集落实验检测其长期毒性作用.制备A549非小细胞肺癌裸鼠模型...     

“聊红椿”提取物对非小细胞肺癌的抑制作用

目的探讨"聊红椿"提取物对非小细胞肺癌的抑制效果,研究其作用机制。方法通过有机溶剂萃取法,提取"聊红椿"中有效成分;将其作用于人肺癌细胞系A549,MTT法检测A549细胞增殖情况;流式细胞仪考察A549细胞凋亡情况;进一步通过荧光定量PCR和Western blot考察细胞凋亡因子Caspase-3,Bax,Bcl-2,cleaved PARP的mRNA和蛋白水平表达情况;构建肺癌裸小鼠皮下移植瘤模型,将低、中、高剂量"聊红椿"提取物分别腹腔注射干预治疗,作用一定时间后,测量小鼠肿瘤生长情况。结果 HPLC分析发现,与正常臭椿相比,"聊红椿"提取物中有高含量有效成分臭椿酮;MTT实验结果发现,"聊红椿"提取物能够明显抑制A549细胞增殖;流式细胞仪检测结果发现,"聊红椿"提取物能够诱导A549细胞发生凋亡;荧光定量PCR和Western blot实验结果发现,"聊红椿"提取物能够使得细胞凋亡因子Caspase-3,Bax和cleaved PARP含量显著下降,抗凋亡因子Bcl-2含量显著增加;"聊红椿"提取物作用于肺癌裸小鼠皮下移植瘤模型后,肿瘤质量和直径明显下降,且与处理浓度呈反比。结论"聊红椿"提取物能够通过影响相关细胞凋亡因子的表达,显著抑制非小细胞肺癌细胞增殖,促进细胞凋亡。     

灯盏乙素对胃癌细胞株的体外抑制作用

目的:初步研究灯盏乙素体外对胃癌细胞的抑制。方法:采用二甲基噻唑二苯基四唑嗅盐(MTT)法测定不同浓度的灯盏乙素对胃癌细胞SGC-7901、BGC-823的抑制作用。结果:灯盏乙素在1 mg/mL时,对胃癌细胞SGC-7901有抑制作用,抑制率为47.07%,且抑制作用与药物浓度呈正相关;灯盏乙素在1 mg/mL时,对胃癌细胞BGC-823无抑制作用。结论:灯盏乙素对胃癌细胞SGC-7901有抑制作用,对BGC-823无抑制作用。     

105例肺癌患者外周血中miRNA-10b的表达

目的 探讨miRNA-10b在非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)患者外周血的表达情况.方法 选取156例非小细胞肺癌患者,其中,105例列入实验组,51例排除入组,另选50例健康志愿人员为正常组.采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测两组外周血中miRNA-10b的表...     

美洲大蠊提取物对3株人肺癌细胞的体外抑制作用

目的:观察美洲大蠊提取物(CⅡ-3)对3株人肺癌细胞的细胞毒作用,探讨CⅡ-3对人肺癌细胞的体外抗肿瘤活性.方法:采用MTT法观察CⅡ-3对3株人肺癌细胞的影响.结果:CⅡ-3对3株人肺癌细胞的生长均有一定的抑制作用,在最高浓度(300μg/ml)时抑制率几乎为100%,且存在一定的剂量依赖性和时间依赖性.结论:CⅡ-3对3株人肺癌细胞生长有抑制作用,值得进一步研究.