猪凝血酶的分离纯化与鉴定

本文报导以猪血为材料，制备凝血酶，血浆在低离子强度下经等电沉淀得优球蛋白，从该沉淀中采用稀盐溶液提取，氢氧化镁吸附和二氧化碳解吸等步骤获得凝血酶原粗品。后者经脑提取液激活，再经乙醇分级、ＤＥＡＥ－纤维素与磷酸纤维素离子交换层析和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤，得凝血酶制品，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，制品呈单一条带，分子量约为３９ｋＤ，比活达１６１０ＮＩＨＵ／ｍｇ蛋白，以活化的粗品活性为１００％，活性回收率为４８％，纯化倍数约为１０。     

磁性琼酯糖亲和吸附剂的合成与应用

采用反相悬浮包埋技术合成了粒径在43-295μm之间的磁性琼脂糖微球。磁性琼脂糖微球经环氧氯丙烷活化后，分别键合6-氨基已酸、氨基乙酸和乙二胺为间隔臂，用水溶性碳二亚胺为缩合剂，分别偶联对氨基苯甲脒、l-精氨酸甲酯和胍基已酸，制备了3种磁性亲和吸附剂，并用于尿激酶粗品的分离纯化。测定了活性回收率和比活提高倍数，并与以磁性葡聚糖为基质的磁性亲和吸附剂对尿激酶的纯化效果进行了对比。     

壳聚糖金属螯合亲和吸附剂的制备

目的 研究利用壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂、亚氨基二乙酸(IDA)为螯合配基制备金属螯合亲和吸附剂的条件.方法 戊二醛对壳聚糖进行交联,环氧氯丙烷法进行载体活化和螯合配基的偶联.键合IDA后与Cu2+螯合.结果 采用0.22 mL/g(壳聚糖)戊二醛对壳聚糖进行交联.交联壳聚糖加入0.4 mol/L NaOH与体积分数为0.5的二甲亚砜的混合溶液中,充分搅匀,25℃下缓慢滴加1.2 mL(体积分数为0.3)的环氧氯丙烷,升温至40℃,170 r/min下振荡反应3h进行活化.之后,以4.26 g/g(壳聚糖)浓度的IDA进行连接反应,65℃下反应18 h.结论 采用优化条件制备的金属螯合亲和吸附剂对Cu2+有较大螯合量,可用作固定化金属亲和层析的固定相.     

新型固定金属离子亲和吸附剂的制备及对蛋白质的吸附研究

以β-环糊精(β-CD)键合硅胶为载体,亚氨基二乙酸(IDA)为螯合基,制备了新型固定金属离子亲和吸附剂.通过13C固体核磁、元素分析对其进行了表征.研究了吸附剂对牛血清蛋白(BSA)的吸附特性,25℃时吸附剂对BSA的最大吸附量达35 mg/g吸附剂.     

玉米芯纤维素基金属螯合亲和吸附剂对牛血清白蛋白的吸附研究

以玉米芯纤维素为基质,通过环氧氯丙烷(EPI)交联活化、亚氨基二乙酸(IDA)修饰、金属离子Cu,Fe,Zn,Ni螯合制得亲和吸附剂.通过红外光谱(FTIR)、X射线光电子能谱(XPS)、原子吸收分光光度法(AAS)对其表征.考察了pH、离子强度、初始浓度、洗脱液等因素对螯合了不同金属离子的吸附剂吸附牛血清白蛋白(BSA)的影响.结果表明:对强亲和性的Cu(Ⅱ)螯合亲和吸附剂对BSA的吸附主要受配位作用控制,而对弱亲和性的Fe(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)、Ni(Ⅱ)螯合亲和吸附剂则主要受静电作用影响,配位作用为辅.     

可高亲和结合两种不同抗原的抗体

抗体和抗原的相互作用面常常被描述成锁和钥匙的关系,说明一个抗体只能适合一种抗原。美国加州基因技术公司Germaine Fuh和同事分离出一种治疗用单克隆抗体Herceptin的异构体,其结合位点可以同时结合人表皮生长因子受体2（HER2）和血管内皮生长因子（VEGF）     

吸附剂球形颗粒固相内扩散方程两种解的比较

讨论了两类不同的边界条件,并比较了由这些边界条件导出的球形固相扩散方程的分析解和数值解,还评估其他吸附速率的近似模型。本文指出了前人导出的并广泛应用的分析解其边值条件在物理意义上的不合理性,使用在颗粒球心处的浓度梯度为零作为有实际物理意义的边界条件,推出固相内扩散方程的数值解,并分别比较用两种模型计算颗粒内溶质浓度分布以及吸附剂颗粒体积平均吸附量的差别。结果表明：在吸附发生的初期,二者计算的吸附量     

两种质粒DNA纯化方法的比较

质粒是染色体外能够进行自主复制的遗传单位,在基因构建中常被用作基因的载体,实验中经常使用碱裂解法提取质粒.本实验对应用经典纯化方法和离心柱吸附纯化方法提取的质粒进行了对比,结果表明,离心柱吸附纯化方法提取质粒更快捷、更高效,是质粒提取的最理想方法.     

两种重组真菌植酸酶的纯化及其酶学性质比较

对相同表达系统中产生的黑曲霉植酸酶(r-Anp)与烟曲霉植酸酶(r-Afp)的酶学特性进行了比较.两者的Km值都较低,但r-Anp的Vmax值远高于r-Afp（102.5 vs. 29.5 μmol·mg-1·min-1,P＜0.05）.r-Anp在pH 2.5仍具有植酸酶活力,而r-Afp则丧失全部活性.差示扫描量热法(DSC)研究发现r-Afp的蛋白质解链温度（Tm）低于r-Anp（59.1 ℃ vs. 62.1 ℃),但经热处理（90 ℃,20 min）后,前者残余更多的相对酶活（81% vs. 3     

两种不同凝胶柱测定壳聚糖分子量结果的比较

凝胶渗透色谱法测定壳聚糖分子量，以葡聚糖为标准品，用2种不同的凝胶柱（PLapuagel-OH柱和TSKG4000PWXL柱）测定4种样品的分子量及其分布，并经过普适标定，比较结果发现：PLaquagel-OH柱效果稍好于TSKG4000PWXL柱，两柱所得重均分子量平均偏差为0.17%-3.38%，数均分子量的平均偏差为0.90%-3.57%的分子量分布宽度指数1.34-1.54。     

猪凝血酶的制备和部分性质的研究

以猪血为材料离心制取血浆.采用-20℃冻存血浆,离心,等电点沉淀,(NH4)2SO4盐析得凝血酶原.经Ca2+激活,DEAE-52阴离子交换柱层析纯化,可获得比活性958.9IU/mg的电泳纯凝血酶,收率为56.3%.研究发现,室温(25℃)下放置20小时以上,凝血酶酶活力下降82%;pH大于或小于7.2,酶活力下降明显.     

从猪血综合提取凝血酶等生化产品的研究

采用现代工业生物化学技术 ,对猪血进行了综合利用研究 ,从中提取了高价值的凝血酶、铜、锌 -超氧化物歧化酶和水解蛋白等三种生化产品以及副产品饲料血粉 ,从而使猪血整个变废为宝 ,并解决了因猪血废弃造成环境污染的问题。     

黏着斑蛋白Supervillin的抗体制备及纯化

黏着斑蛋白Supervillin（SVIL）是一个细胞膜结合蛋白分子,定位于细胞与细胞外基质接触面的黏着斑。为了进一步研究 SVIL蛋白分子在细胞内的功能,应用分子克隆技术构建原核细胞表达质粒 ｐＧＥＸＫＧ ＳＶＩＬＣ３０２和ｐＨＩＳ８ ＳＶＩＬＣ３０２,并在细菌 ＢＬ ２１（ＤＥ３）中用 ＩＰＴＧ分别诱导表达 ＧＳＴ ＳＶＩＬＣ３０２和 ＨＩＳ ＳＶＩＬＣ３０２融合蛋白。用谷胱甘肽琼脂糖凝胶柱亲和层析纯化 ＧＳＴ ＳＶＩＬＣ３０２蛋白,然后免疫新西兰大白兔制备 ＳＶＩＬ多克隆抗体,并用 Ｎｉ ＮＴＡ柱子结合 ＨＩＳ ＳＶＩＬＣ３０２蛋白,对其进行交联,纯化抗体。ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ（ＷＢ）和 Ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ（ＩＦ）实验证明该抗体可以识别外源的 ＧＦＰ ＳＶＩＬ和内源的 ＳＶＩＬ蛋白,并且可以用于蛋白免疫沉淀实验。表明此ＳＶＩＬ多克隆抗体具有较高的特异性和灵敏度,为进一步研究黏着斑蛋白 ＳＶＩＬ在细胞内的功能奠定了坚实的基础。     

两种灵芝硒多糖分离纯化及性质鉴定

从灵芝（Ganoderma lucidum)加硒深层培养的菌丝（含Se 1600μg/g）中,经沸水、碱沸水提取,醇析,透析,Sevage法脱蛋白,DEAE－cellulose柱层析纯化后,得SeGLP-1和SeGLP-2两种灵芝硒多糖。经SephadexG-100、聚丙烯酰胺凝胶龟泳和紫外光谱分析鉴定,SeGLP-1和SeGLP-2为均一级分。GC与PC分析表明：SeGLP-1含5种单糖Gal、Man、Gle、Xyl、Rha,n(Gal):n(Xyl):n(Gle):n(Rha):n(Man)=0.23:0.72:1.00:0.25:0.09.SeGLP-2含有4种单糖Gal、Xyl、Glc、Rha,n(Gal):n(Xyl):n(Glc):n(Rha)=25.59:16.30:1.00:0.86。经红外光谱分析,确定SeGPL-1和SeGLP－2均是由α-糖苷键连接的吡喃多糖。     

两类半素代数的结构

给出域F上的两类半素ES－代数的结构定理：若A的所有幂零元（幂等元）张成的F－子空间是有限维的,则A同构于有限个可除代数或有限维可除代数上全矩阵代数的直和。     

两类正交矩阵的对角化

A是一个实正交矩阵,证明了一类特殊三阶正交矩阵的可能形式,并证明了这类矩阵可对角化.另外,证明了仅有实特征值的正交矩阵可对角化.     

五种赤潮藻单克隆抗体的制备

目的：建立分泌抗海洋褐胞藻(Chattonella marina)、卵圆褐胞藻(Chattonella ovata)、赤潮异弯藻(Heterosigma akashiwo)、具齿原甲藻(Prorocentrum dentatum)、尖刺拟菱形藻(Pseudonitzschia pungens)等5种藻的高特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株．方法：利用细胞融合技术制备杂交瘤细胞,并通过反相间接血凝、间接酶联免疫吸附测定(ELISA)等方法筛选克隆阳性杂交瘤细胞株．结果：获得15CA7、23BG2和23BG9等3株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体与5种藻具有一定的特异性,但抗体的亲和力较低,仅与海洋褐胞藻具有较高的亲和力;而获得的M18杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体可与以上除尖刺拟菱形藻外4种藻产生高效价的明显交叉反应。结论：获得了3株分泌对5种藻具有一定的特异性较低亲和力抗体;而M18细胞株分泌的单抗与除尖刺拟菱形藻外4种藻产生明显的高效价的交叉反应,显示此单抗可代替5种海洋藻的抗血清．     

两类非连通图优美性的研究

给出了两类非连通图(K2〖TX-〗∨Cn)∪[DD(]3[]i=1[DD)]St(mi)和(K2〖TX-〗∨C2n+k)∪St(m)∪G(k)n-1(k=1,2), 并证明了如下结论:对自然数n, m, m1, m2, m3, 设s=〖JB(［〗〖SX(〗n〖〗2〖SX)〗〖JB)］〗, n≥9, m1≥s+2, 则图(K2〖TX-〗∨Cn)∪[DD(]3[]i=1[DD)]St(mi)是一个优美图; 对 k=1,2,设n, m≥3, G(k)n-1是一个具有n-1条边的k-优美图,则图(K2〖TX-〗∨C2n+k)∪St(m)∪G(k)n-1是一个优美图。 其中,K2是一个具有2个顶点的完全图,K2〖TX-〗是图K2的补图,K2〖TX-〗∨Cn是图K2和n圈Cn的联图, St(m)是一个具有m+1个顶点的星形树。