人乳头瘤病毒疫苗的研究进展

人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)广泛感染人类,能够导致宫颈癌等恶性肿瘤的发生,严重危害人类的健康.HPV疫苗能够有效阻止HPV感染及其导致的疾病,世界卫生组织正在实施全球消除宫颈癌的计划.本文结合厦门大学在HPV疫苗研发中取得的研究成果,综述了HPV及其疫苗研究领域的进展,包括HPV的生...     

子宫颈癌致病因子人乳头瘤病毒的发现——2008年度诺贝尔生理学或医学奖成果简介

瑞典卡罗林斯卡(Karolinska)学院诺贝尔奖评审委员会宣布德国科学家哈拉尔德·楚尔豪森(Harald zur Hausen)因发现人乳头瘤病毒(HPV)导致子宫颈癌,与另外两位法国科学家弗朗索瓦丝·巴尔-西诺西(Franoise Barré-Sinoussi)和吕克·蒙塔尼(Luc Montagnier)共享2008年度的诺贝尔生理学或医学奖。楚尔豪森以科学创新的精神和严格的科学实验向当时盛行的"单纯疱疹二型病毒(HSV-2)是子宫颈癌的致病因子"假说发起挑战,经过10多年的研究,于1983、1984年先后在人子宫颈癌活检标本中检测到HPV16、HPV18的基因序列,并成功克隆了HPV16型、HPV18型基因组,揭示HPV16、HPV18是子宫颈癌发病的重要病因。相继又鉴定了多种型别的HPV,提出了HPV家族具有"异质性"。发现HPV16、18的早期基因E6和E7整合于子宫颈癌宿主细胞的基因组内,提出E6和E7基因是诱发子宫颈癌的关键基因。这些重大发现极大推进了HPV研究领域的发展,也为今日HPV预防性疫苗的问世以及新HPV检测技术的不断发展奠定了科学基础。     

上皮内瘤样病变高危型人乳头状瘤病毒DNA检测研究

目的分析子宫颈癌前病变高危型人乳头状瘤病毒（HPV）DNA检查结果.方法应用第二代杂交捕获试验（HC-2）检测高危型HPVDNA联合细胞学检查,同时进行阴道镜检查,以宫颈活检组织病理为确诊.结果高危型HPVDAN检测CINⅡ、Ⅲ的敏感度92.43%,阳性预测值5.18%,阴性预测值99.87%.宫颈细胞学检查不典型鳞状上皮细胞（ASCUS）敏感度、阳性预测值及阴性预测值,分别为90.02%、11.59%、99.68%;低度鳞状上皮内病变（LSIL）敏感度、阳性预测值、阴性预测值分别是70.21%、11.16%和99.59%;高度鳞状上皮内病变（HSIL）敏感度、阳性预测值、阴性预测值分别为49.01%、31.82%和99.29%.高危型HPVDNA检测联合细胞学检查CINⅡ、Ⅲ的敏感度、阳性预测值、阴性预测值分别是98.89%、5.27%和100%.结论高危型HPVDNA检测在宫颈癌前病变中有很高的敏感度,高危型HPVDNA检测联合细胞学检查,具有较强的敏感度及阴性预测值.     

成都地区人乳头瘤病毒型别分布研究

应用反向膜杂交技术对1668例标本进行型别鉴定和统计分析.在1668例标本中,共检出阳性标本673例,感染率为40.3%;其中单重感染512例,占阳性标本的76.1%,双重感染96例,占阳性标本的14.3%;单重感染中的高危型感染318例,占阳性标本的47.3%,低危型感染194例,占阳性标本的28.8%.结果表明成都地区HPV感染率较高,且以单一基因型感染为主,其中HPV-16感染率最高,其次是HPV-18,低危型HPV感染以HPV-6和HPV-11为主.     

人乳头瘤病毒假病毒制备方法的优化

人乳头瘤病毒假病毒可广泛应用于中和抗体鉴定和疫苗免疫性评估等研究.本研究对多质粒共转染293FT细胞生产HPV假病毒的方法进行了深入优化,结果显示不同的HPV结构蛋白表达质粒转染比例对于假病毒生产效率有显著的影响,HPV主要结构蛋白L1的表达水平是影响生产效率的主要因素,L2表达质粒的用量过高或过低均不利于假病毒的生产,而报告质粒的用量对假病毒生产效率的影响相对较小.综合比较显示,在该体系中L1和L2表达质粒和报告质粒以合适比例(如1:1/10:1/2)进行共转染可获得更为理想的生产效率.本研究同时也在293FT细胞中对磷酸钙转染方法进行了优化,通过磷酸钙与质粒用量的交叉配比试验获得了较优的转染条件.通过优化,建立了更为高效的HPV假病毒大量制备方法,在HPV16、HPV18、HPV6、HPV11假病毒生产中的应用结果显示较原方法可显著提高生产效率.本研究为HPV假病毒中和实验的规模化应用提供了有利条件.     

人乳头瘤病毒疫苗的研究策略及最新进展

人乳头瘤病毒（HPV）的持续感染与多种皮肤粘膜肿瘤密切相关，研制有效的病毒疫苗成为研究者的共同目标。本文系统综述了人乳头瘤病毒疫苗在预防和治疗两方面的研究策略以及动物和临床试验的新进展，主要包括旨在预防高危型病毒感染的二价疫苗，临床试验，交叉中和表位的研究，增强治疗性疫苗免疫原性的新尝试以及树突状细胞在病毒感染局部免疫作用中的新发现。     

人乳头瘤病毒16和52型双荧光等温多自配引发扩增的

应用等温多自配引发扩增（IMSA）技术, 分别针对人乳头瘤病毒(HPV)16型的E7和52型的E6基因序列设计6条特异性引物, 并在检测体系中加入羟基萘酚蓝（HNB）和SYBR GreenⅠ的混合双荧光指示剂, 建立快速检测人乳头瘤病毒的双荧光IMSA方法. 结果表明： 340 μmol/L HNB与1∶10 000 SYBR GreenⅠ混合构建的双荧光指示剂在IMSA反应体系中具有明确的指示效果, 455 nm蓝光激发下阳性反应管双荧光显色为黄绿色, 阴性反应管双荧光显色为橘红色; 该方法对HPV16和HPV52型检测限分别达60,600拷贝/μL, 可特异性检出样品中HPV16和HPV52, 与临床检测结果比对无差异.     

人16型乳头瘤病毒"假病毒"的制备

利用杆状病毒表达体系,在sf9细胞中表达人16型乳头瘤病毒(Human Papillomavirus type 16, HPV16)的晚期表达蛋白L1,通过超速离心的方法得到HPV16病毒样颗粒(virus like particles, VLPs).VLPs经过DTT和EDTA处理解聚成L1蛋白,将构建好的真核表达载体E6E7-pcDNA3.1 与解聚的L1蛋白混合,透析除去DTT和EDTA并逐渐升高Ca2 的浓度,解聚的L1能够重新聚集成VLPs,其中一部分VLPs包裹了真核表达载体,和天然的人乳头瘤病毒的构成很相似,作者称之为"假病毒".     

人乳头瘤病毒16L1抗血清的制备和鉴定

人乳头瘤病毒16型是导致宫颈癌发生的主要因素,其晚期蛋白L1在体内或体外可自组装形成VLP颗粒.作者构建了DNA疫苗载体pDRVI1.0-16L1,大提质粒后免疫BalB/C小鼠制备抗体,并对抗体进行了特异性鉴定,为HPV16L1预防性疫苗的进一步研究和应用奠定了基础.     

人乳头瘤病毒11型E7 DNA疫苗质粒的构建和鉴定

目的 构建人乳头瘤病毒11型(HPV11)E7 DNA疫苗质粒．方法 从尖锐湿疣病变组织中提取DNA制备模板，采用聚合酶链反应(PCR)技术扩增HPV11-E7基因，将E7基因经双酶切后定向克隆到pcDNA3．1( )中，测序鉴定．结果从病变组织中扩增出了全长HPV11-E7基因，并正向插入载体pcDNA3．1( )中，经酶切和测序鉴定无误．结论 HPV11-E7 DNA疫苗质粒构建成功，为今后进行防治尖锐湿疣的动物实验和临床实验奠定了基础．     

58型人乳头瘤病毒E7蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

 为获得抗58型人乳头瘤病毒(HPV58)E7蛋白的单克隆抗体,乳糖诱导重组工程菌表达HPV58 E7融合蛋白,以纯化后的该重组蛋白为免疫原,经细胞融合和有限稀释后,得到6株分泌抗HPV58 E7单克隆抗体(McAb)的工程细胞株,并采用体内接种方法及亲和柱层析纯化技术制备6株抗体.酶联免疫吸附测定(ELISA)、Western-blot实验和细胞免疫荧光检测结果表明,所得抗体均为IgG2a类,κ型,抗体效价均可达10^-5,并且能够与原核及真核系统表达的HPV58 E7蛋白发生特异性抗原-抗体反应.该抗体的成功制备为后续HPV58 E7致癌生物学研究及相关肿瘤诊断试剂的开发奠定基础.     

尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒感染基因型的检测

目的探讨吉林地区尖锐湿疣患者感染人乳头瘤病毒的基因类型和分布.方法收集临床病理学诊断为尖锐湿疣的疣体142例,采用DNA扩增技术检测疣体HPV基因类型.结果在142例标本中,127例(89.3%)基因型为HPV6/11和12例(8.5%)为HPV16/18.结论本地区尖锐湿疣患者感染低危型HPV6和HPV11型为主,少数为高危型HPV16和HPV18型.     

海口地区人乳头瘤病毒感染的分子流行病学研究

利用PCR扩增和Southen杂交技术,对海口地区人乳头瘤病毒（HPV）型别进行了调查,结果显示,在所抽取的1045份样本中,有436份检出HPV-DNA,总阳性率为41．72％（436／1045）,其中有337份只检出1种型别感染（单侵染）,65份检出2种型别感染（二重侵染）,34份检出3种或3种以上型别感染（三重或三重以上侵染）,分别占感染样本的77．29％,14．91％和7．80％;在单侵染中,高危型所占比例为74．78％（252／337）,不同型别的检出率从高到低分别是HPV16（22．25％）,HPV58（17．89％）,HPV43（16．74％）,HPV52（16．06）和HPV6（8．94％）．其中HPV16,HPV58和HPV43为高危型,其检出率较高,具有一定的区域性．     

人乳头瘤病毒16及18型E6与p53表达的关系

采用ＳＰ免疫组织化学方法,比较了６８例宫颈癌组织中ＨＰＶ－１６、１８Ｅ６和ｐ５３蛋白的表达及其相互关系。结果表明,６８例宫癌中有６０例ＨＰＶ－１６、１８Ｅ６蛋白和１７例ｐ５３蛋白呈阳性表达,阳性率分别为８８．２％和２５．０％;在５９例ＨＰＯＶ－１６、１８Ｅ６蛋白过度表达的宫颈癌中有５４例ｐ５３蛋白为阴性或弱阳性表达,二呈负相关（Ｐ〈０．０１）．ｐ５３蛋白阳性表达与组织学类型有关,其阳性率在宫颈腺     

通辽地区179例妇科门诊患者人乳头瘤病毒感染检测分析

目的：以通辽地区妇科门诊患者为对象,检测其生殖道人乳头瘤病毒（HPV）感染情况.方法：采用HPV21型凯普导流杂交法,对179例妇科就诊患者宫颈标本进行HPV基因分型检测.结果：HPV基因检测总阳性率为17.31%,其中以单一感染率为主,比例为74.19%,多重感染率为25.81%;共检出16种HPV亚型,包括高危型12型,低危型4型,其中以HPV16、31、18三种亚型最多见.结论：通辽地区HPV感染以单一感染为主,又包含一定比例的多重感染,常见感染亚型分布总体符合亚洲人群规律,但又具有独特的地域分布特点.     

甘肃省部分地区女性人乳头瘤病毒感染情况分析

探讨甘肃省部分地区人乳头瘤病毒（HPV）感染情况、基因型分布特征和年龄的分布特点,指导女性宫颈HPV感染者的早期筛查和诊疗,为女性宫颈癌的预防提供科学依据。分析2018年5月—2020年8月在兰州大学第二医院妇科门诊及体检中心行HPV检测患者21 402例,采用人乳头瘤病毒（HPV）分型检测试剂盒PCR-反向点杂交法进行检测,统计23种HPV亚型的感染率,分析HPV感染的基因型特征和年龄分布特点。21 402例女性的HPV感染率为21.07%(4 509/21 402),其中,以单一型感染为主（感染率14.33%）,该地区感染率排名前五的HPV基因亚型为HPV52(3.64%)、HPV16(3.28%)、HPV51(2.86%)、HPV58(2.77%)、HPV18(2.44%),不同年龄段的HPV感染率有统计学差异（χ2=38.82,P<0.01）,其中≤20岁和≥61岁年龄段感染率显著高于其他年龄段。甘肃省部分地区女性HPV感染率较高（21.07%）,以单一型感染为主,不同年龄段感染率有所差别,应重点加强HPV知识宣传和科普教育,大力开展HPV筛查及疫苗接种工作,切实降低女性...     

德宏州人乳头瘤病毒感染与TCT检测相关性分析

目的:探讨人乳头瘤病毒感染(HPV)与液基薄层细胞学(TCT)检测的相关性。方法:对就诊的1 608例有宫颈疾患的妇女,采用HPV分型检测技术进行人乳头瘤病毒分型检测和TCT检测,以病理学2004年TBS分级系统为判断标准。结果:1 608例做了人乳头瘤病毒检测样本中,阳性645例,阳性率为40.11%;在645例人乳头瘤病毒阳性中有483例同时做了TCT检测,其中ASCUS者118例,高度病变36例,低度病变24例,炎症154例,正常125例,其它病变26例。结论:HPV检测对宫颈病变可进行早期追踪治疗,提高宫颈液基薄层细胞检测的敏感性,早期预防宫颈癌或发现癌前病变。     

喉鳞状细胞癌中人类乳头瘤病毒（HPV）与癌基因C—myc的相关性 …

本文从分子水平对喉鳞癌的病毒病因学进行研究。旨在探索肿瘤病毒病因学机制，试图揭示喉鳞癌的发生发展过程，为该病的预防、早期发现及治疗提供必要的参数。     

人乳头瘤病毒16和52型双荧光等温多自配引发扩增的检测方法

应用等温多自配引发扩增(IMSA)技术,分别针对人乳头瘤病毒(HPV)16型的E7和52型的E6基因序列设计6条特异性引物,并在检测体系中加入羟基萘酚蓝(HNB)和SYBR GreenⅠ的混合双荧光指示剂,建立快速检测人乳头瘤病毒的双荧光IMSA方法.结果表明:340μmol/L HNB与1∶10 000SYBR GreenⅠ混合构建的双荧光指示剂在IMSA反应体系中具有明确的指示效果,455nm蓝光激发下阳性反应管双荧光显色为黄绿色,阴性反应管双荧光显色为橘红色;该方法对HPV16和HPV52型检测限分别达60,600拷贝/μL,可特异性检出样品中HPV16和HPV52,与临床检测结果比对无差异.