谷氨酸酶电极的研制

将产生谷氨酸脱羧酶(GDC)的大肠杆菌菌株(E,Coli.,AS.505),在37℃培养,所得细胞经抽提得到GDC粗品,将它固定于海藻酸钠上,配合CO_2选择性电极,制得谷氨酸酶电极。它具有下列特性:(1)电极对谷氨酸的线性响应浓度范围是1.0×10~(-3)—0.5tmol/L(8.3—6300mg)谷氨酸/L;(2)电极动态响应时间1分钟,即可达约90%响应值,静态响应时间约10分钟;(3)电极连续测定六十次以上仍有响应;(4)除L-赖氨酸及L-谷氨酰胺外,其余氨基酸均不干扰电极对谷氨酸的测定;(5)电极具较高的重演性。     

酶电极法测定谷氨酸片中谷氨酸含量

以谷氨酸氧化酶(EC 1.4.3.11)与过氧化氢电极构成电流型酶电极,研究了谷氨酸酶电极分析法的各种分析条件及参数,并与旋光法对比测定谷氨酸片中谷氨酸含量。结果显示酶电极法测定结果与旋光法测定结果之间有较好的一致性,采用酶电极法测定谷氨酸片中谷氨酸含量具有专一性高、成本低、分析速度快等优点。     

用固定化酶管流动注射测定谷氨酸

用多孔玻璃珠固定自制的谷氨酸氧化酶（GO）制成GO固定化酶管，并结合流动注射系统测定谷氨酸（Glu)的含量，测定的线性范围在0．2－3．0mol/m3，精密度（c.v.)为0．75％，测定速率每小时60个样品，该酶管使用寿命为40d，在一定的条件下，保存稳定期达120天，当测定的Glu浓度低于3mol/m3时，pH在6．5－7．5，温度在20－30度，磷酸盐浓度在0．05－0．25mol/L范围内变化时，对Glu含量的测定几乎无影响，用醋酸纤维膜修饰的铂电极测定H2O2选择性好，该方法与试剂盒法同时测定不同发酵时间发酵液中Glu的含量，两者结果一致。     

谷氨酸氧化酶粗品的制备,性质及应用

谷氨酸氧化酶发酵液经（ＨＮ４）２ＳＯ４沉淀后用透析法获得酶粗品。利用ＧＯ测定谷氨酸发酵液中谷氨酸的含量与传统的瓦氏法结果一致，相关系数为０．９８６，相关方程为：ｙ－０．９２８ｘ＋０．１２７（其中ｙ，ｘ分别表示氧化酶法与瓦氏法测定的值）。且这种方法比瓦氏法方便、简单、分析成本低、耗时少。利用ＧＯ法测定血清中谷草转氨酶和谷丙转氨酶的含量，与传统的试剂盒法比较，相关系数分别为０．９７８、０．９８４，相关     

用静息细胞培养法研究L—谷氨酸氧化酶的生物合成

建立了静息细胞培养系统，并以此研究了Ｌ－谷氨酸氧化酶生物合成的影响因素。结果表明，发酵１６ｈ的菌体在有诱导物情况下有酶的合成，无诱导物则无酶的合成，发酵４０ｈ的菌体在有，无诱导物的条件下均有酶的合成。对发酵１６ｈ的菌体研究表明：β－丙氨酸（Ｉ），α－酮戊二酸（Ⅱ），丙酮酸钠（Ⅲ）是酶合成的诱导物，谷氨酸（Ⅳ）则不是。而对发酵４０ｈ菌体而言：ＭｇＣｌ２，ＣａＣｌ２能促进酶的合成；Ｉ不能作氮源利用；Ｉ     

用静息细胞培养法研究L－谷氨酸氧化酶的生物合成

建立了静息细胞培养系统，并以此研究了Ｌ－谷氨酸氧化酶生物合成的影响因素。结果表明，发酵１６ｈ的菌体在有诱导物情况下有酶的合成，无诱导物则无酶的合成，发酵４０ｈ的菌体在有、无诱导物的条件下均有酶的合成。对发酵１６ｈ的菌体研究表明：β－丙氨酸（Ⅰ）、α－酮戊二酸（Ⅱ）、丙酮酸钠（Ⅲ）是酶合成的诱导物，谷氨酸（Ⅳ）则不是。而对发酵４０ｈ菌体而言：ＭｇＣｌ＿２，ＣａＣｌ＿２能促进酶的合成；Ⅰ不能作氮源利用；Ⅰ～Ⅳ均具有高浓度抑制产酶、低浓度促进产酶的双重作用。     

L-谷氨酸氧化酶高产菌株的快速筛选及诱变育种

用谷氨酸氧化酶测试液浸湿白卷纸置于菌落上,根据白卷纸上显示红色快慢、深浅,就能大致测得该菌落菌株产酶能力高低。该法可靠性大、工作量小、操作简便,显示结果快。利用该法,配合亚硝酸诱变,在短暂三个月内,将L-谷氨酸氧化酶产生菌株产酶能力提高了约25倍。     

大肠杆菌L—谷氨酸脱羧酶酶促特性的研究

本文主要研究大肠杆菌505L-谷氨酸脱羧酶脱羧作用的最适浓度、pH、温度、耐热性、底物浓度以及它对天冬氨酸等十二种氨基酸是否具有脱羧性能,从而发现目前L-谷氨酸发酵生产中测定存在的问题。     

L-谷氨酸氧化酶产生菌理性化筛选及液体发酵的研究

采用HNO_2诱变、平皿显色与理性化筛选方法,获得一株L-谷氨酸氧化酶高产稳定菌株Streptomyces sp.N_514。建立了液体发酵产酶的条件,考察了辅加成分对酶合成的影响。     

吲哚乙酸氧化酶和过氧化物酶关系的同工酶研究

用细胞质雄性不育系小麦和普通小麦中国麦与鄂恩１号为材料，用Ｄａｖｉｓ和Ｒｅｉｓｆｅｌｄ不连续聚丙烯酰胺垂直析以凝胶电泳技术进行吲哚乙酸氧化酶和阴、阳离子过氧化物酶同工酶分析，并用ＳＣ９１０型双波段薄层扫描仪进行扫描，记录其谱带数及强弱，结果表明阳离子过氧化物酶同工酶谱与ＩＡＡ－氧化酶同工酶谱十分相似，而阴离子过氧化物酶酶谱相差甚远，由此表明具有吲哚乙酸氧化酶活性位点的过氧化物酶，应主要是阳离子过氧     

荧光动力学法测定抗坏血酸的研究

在稀硫酸介质中,抗坏血酸能活化钒(V)催化溴酸钾氧化酚藏花红的反应,使其荧光猝灭,建立了荧光动力学法测定抗坏血酸的新方法.测定抗坏血酸的线性范围为2.0～40.0μg.L-1,检出限为1.2μg.L-1.此方法用于药物样品中抗坏血酸含量的测定,加标回收率在97.3%～102.8%之间.     

交联聚丙烯酸对牛血清白蛋白的固定化

选用反应性单体丙烯酸、二乙烯苯作为交联剂,在石油醚存在下,在70℃,搅拌速率为800r/min,通过悬浮聚合反应24h制备了具有一定机械强度的固定化酶的多孔载体.探讨了丙烯酸与二乙烯苯以不同物质的量的比进行聚合所得载体的性能.根据不同物质的量的比的载体与牛血清白蛋白的结合量,确定了共聚物的最佳物质的量的比.同时比较了在不同致孔剂存在下合成的载体对牛血清白蛋白吸附量的大小.     

低聚苯乙烯基亚膦酸氧化反应研究

用稀硝酸和过氧化氢将低聚苯乙烯基亚膦酸(PSPUA)氧化为相应的膦酸(PSPNA),并用红外和质谱表征.结果表明过氧化氢仅能部分氧化PSPUA,稀硝酸可将PSPUA完全氧化为PSPNA.氧化反应的最佳条件为:10%的稀硝酸,85℃,氧化反应2h.     

顺丁烯二酸水溶液的热反应动力学

研究了不同温度、浓度条件下，顺丁烯二酸（顺酸）非催化反应网络，即顺酸可生成反丁烯二酸（反酸）和苹果酸，反酸与苹果酸存在可逆反应。建立了该反应网络的动力学模型。测定了不同反应条件下顺酸、反酸和苹果酸浓度随时间变化的规律，据此，动力学参数进行了估值。     

Dy~（3＋）-氟哌酸-十二烷基苯磺酸钠体系荧光增敏反应的研究及其分析应用

研究发现镝与氟哌酸发生荧光反应,形成荧光络合物,发射配体微扰的中心离子的M*-M型特征荧光.加入表面活性剂十二烷基苯磺酸钠生成三元离子缔合物,使体系的荧光与二元体系相比增强14倍.结果表明在最佳试验条件下,Dy3+的浓度在1.0×10-6～1.0×10-5mol/L范围内与体系的荧光强度呈线性关系,当信噪比等于3时,检测限为2.0×10-7mol/L.采用标准加入法测定了合成稀土样品中镝的含量,结果满意.     

氧气液相催化氧化对硝基甲苯邻磺酸的研究──碱种类及其浓度和原料初始浓度对反应的影响

研究了碱种类及其浓度Ma、对硝基甲苯邻磺酸浓度MNTS对氧气液相氧化对硝基甲苯邻磺酸（NT）制取4,4,二硝基二苯乙烯-2,2’-二碳酸（DNS）的影响。发现在水介质中以模拟酶催化剂、M3=1.0mol／L、MNTS=0.38mol／L于控温湿度60℃下反应18h,可以获得81.2％的粗品收率,其纯度用高效液相色谱（外标法）测定可达96.7％。DNS的结构通过核磁共振谱得以确认。     

硝基安定经H2O2和光作用后的荧光特性及应用

研究了弱碱性介质中，硝基安定经Ｈ２Ｏ２和紫外光共同作用后，反应产物的荧光特性（λｅｘ＝３５５ｎｍ，λｅｍ＝４６５ｎｍ），提出了一种测定硝基安定的新方法．标准曲线的浓度范围为０．２５～３．００ｍｇＬ－１．方法的相对标准偏差和检测限分别为２．３％和０．１３ｍｇＬ－１．可直接用于片剂中硝基安定含量的测定．     

凹土基硫酸氢钠催化剂制备及对环乙醇脱水性能的研究

硫酸氢钠是一种重要的无机盐化工原料及无机盐固体酸催化剂,但在实际使用中存在诸多缺陷.以廉价凹凸棒黏土(凹土)为载体开发高附加值的固体酸催化剂,研究了提高凹土比表面积与成型的方法;分别运用浸渍法和热分散法制备了复合固体酸催化剂,并考察了这两类催化剂对环己醇脱水反应的催化性能.结果表明,凹土比表面积可达233.7 m2/g,环己醇脱水时间由54 min缩短到30 min.