实验Beagle犬贾第鞭毛虫感染情况调查

为了掌握Beagle犬贾第鞭毛虫的感染情况，本实验室在2009年3月～2010年2月共抽样检测了910只实验Beagle犬，其中109只检测到了贾第鞭毛虫包囊，贾第鞭毛虫感染的总阳性率为11．98％。结果还表明，不同月份间差异极显著，不同性别间差异不显著，幼犬感染率大于成犬，不同年龄组间差异极显著。通过检测可掌握犬群中贾第鞭毛虫的感染情况，对及时诊断、发现并控制疾病的传播有积极的指导意义。     

试论"两虫"的可替代检测

从生物学和物理学两方面对新颁布的《城市供水水质标准》中非常重要的微生物指标隐孢子虫和贾第鞭毛虫的可替代检测指标进行了论述和比较,指出虽然还不能找到明确的定论,但研究表明,颗粒计数法仍是目前比较合适的可替代的“两虫”检测方法。     

ELISA检测姜片虫病患者抗体的研究

研究了姜片吸虫成虫冷浸抗原检测姜片吸虫病患者血清抗体的敏感性和特异性及其在流行病和临床上的应用价值．超声粉碎制备姜片吸虫成虫冷浸抗原．以评价ELISA法检测姜片虫病血清抗体的敏感性、特异性和交叉反应性．按常规ELISA方法操作,目视与酶标仪判断结果．普查2189人中姜片吸虫卵阳性者168例;168例中165例ELISA阳性,ELISA与改良加藤法的阳性符合率98．21％;健康居民血清147份,阳性6份,阳性率4．08％;与血吸虫病交叉阳性为9．38％,肺吸虫病交叉阳性为5．36％．姜片吸虫成虫冷浸抗原1：3500工作浓度包被酶标板,检测姜片虫病血清抗体具有敏感性高、特异强和交叉反应率低的特点．     

免疫酶染色试验检测广州管圆线虫病鼠血清抗体的实验研究

用广州管圆线虫雌虫冰冻切片作免疫酶染色试验（ＩＥＳＴ），检测感染广州管圆线虫大白鼠血清中抗体，结果在感染后３—９周的３９份大白鼠血清中，３７份呈阳性反应，阳性率为９５％，ＧＭＲＴ２８０．６７；３２份正常大白鼠血清，全部为阴性，检测１０份猪蛔虫抗原免疫大白鼠血清；３份曼氏这宫绦虫裂头拗抗原免疫大白鼠血清；７份日本血吸虫感染大白鼠血清，均呈阴性反应。     

河北省滦县牛梨形虫的分子检测

本研究旨在检测河北省滦县牛梨形虫的感染情况。采集滦县牛血液样本28份,并提取基因组DNA;根据已发表的梨形虫Tams1,P32表面蛋白以及18S rRNA基因序列,设计6对梨形虫特异性引物,以牛血液基因组DNA为模板,对不同梨形虫进行PCR或巢式PCR扩增。结果表明,在28份DNA样本中检测出双芽巴贝斯虫阳性样本7份,阳性率为25.00%;其他牛巴贝斯虫阳性样本3份,阳性率10.71%;而环形泰勒虫和瑟氏泰勒虫均未检测到阳性样本。     

成都动物园野生动物源贾第虫的多位点基因分型鉴定

为了解四川省成都市动物园野生动物贾第虫的流行及基因型,本研究采集了146份不同野生动物的新鲜粪便并提取基因组DNA.通过巢式PCR扩增β-giardin、tpi和gdh基因,扩增产物测序后进行种系发育分析.结果表明,CDZOO1黇鹿源和CDZOO3龟源贾第虫通过多位点基因分型(MLG)鉴定为AI-1亚型;CDZOO2鹿源贾第虫为E型(β-giardin基因位点);CDZOO4黇鹿源贾第虫为A型(β-giardin和tpi基因位点);CDZOO5浣熊源和CDZOO6细尾獴源贾第虫在β-giardin位点为D型而在tpi位点为A型.     

河北省新乐市羊梨形虫分子检测

为检测河北省新乐市羊梨形虫的感染情况,采集河北省新乐市羊血液样本31份,并提取基因组DNA;根据梨形虫18S rRNA基因序列设计5对特异性引物,以羊血液基因组DNA为模板,对梨形虫进行巢式PCR扩增。结果表明,在31份DNA样本中检测出4份吕氏泰勒虫(12.9%),而尤氏泰勒虫、中华泰勒虫和羊巴贝斯虫均未检测到阳性样本。     

淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒在实验大鼠中的感染状况

目的对实验室留存的大鼠血清样本进行淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)抗体检测,调查LCMV在我国实验大鼠中的感染情况。方法依据现行国家标准中规定的免疫荧光试验(IFA)方法对我实验室保存的172份大鼠血清样本(包括48份无级别、100份清洁级和24份SPF级大鼠血清样本)进行LCMV抗体检测。结果无级别大鼠血清样本(n=48)15份阳性,阳性率为33.25%,强阳性样本滴度可达1∶1280;SPF级及清洁级大鼠血清样本全部阴性。结论大鼠可以感染LCMV,实验动物等级标准应增加对大鼠LCMV的检测。     

PCR扩增检测献血者中TT病毒DNA及部分TTV基因序列分析

目的：了解江苏地区献血者中新型肝炎相关病毒－－TT病毒的感染状况,探讨TTV感染与ALT异常的相关性,方法：设计通用引物,采用半套式聚合酶链反应（hemi-nested PCR)方法检测195份献血者血清标本,结果,在血清丙氨酸转氨酶（ALT）异常,HBsAg及抗HCV阴性的99份献血者血清标本中,检出TTV DNA阳性标本36份,TTV DNA的阳性检出率为36．3％,而在96份正常献血者血清标本中,检出TTV DNA阳性标本16份,TTV DNA阳性检出率为16．6％,明显低于ALT常献血者人群,对2株阳性株序列分析结果显示,一株与TX011（G1b日本代表株）的同源性为98．6％,属于G1b亚型,另一株虽可归属于G1,但与G1a ,Blb差异较大,可能为G1的新亚型,结论：江苏地区献血者人群中存在TTV感染,国内首次报告检出TTV G1b亚型及新的亚型,献血者ALT异常与TTV感染密切相关,输血可能成为传播TTV感染的途径之一。     

恒河猴B病毒血清抗体流行病学调查

目的摸清B病毒(BV)感染现状,从而有效降低BV在恒河猴群中的感染率。方法采用ELISA方法对恒河猴血清进行抗体检测。结果检测样品629份,其中350份呈BV抗体阳性,10份血清呈BV抗体可疑,其余血清为抗体阴性。结论种猴(≥11周岁)BV感染率89%;青年猴(3~10周岁)BV感染率39.2%;幼龄猴(≤2周岁)BV感染率7.6%。随着年龄的增长,恒河猴群中BV感染率越高。     

抗心磷脂抗体与不明原因复发性自然流产的相关性研究

目的 探讨抗心磷脂抗体在不同孕育状态下妇女人群中的表达情况,研究抗心磷脂抗体与复发性自然流产的相关性.方法 应用前瞻对照的研究方法,收集正常生育组、早初孕组、复发性自然流产组、继发不孕组、偶发流产组5组病例.采用ELISA法检测各组病例中的抗心磷脂抗体IgG、IgM、IgA.运用统计软件,以x2检验分析各组抗心磷脂抗体IgG、IgM、IgA阳性率的差别.结果 得到抗心磷脂抗体IgG、IgM、IgA的阳性率,正常生育组：0.00％、3.70％、3.70％;早初孕组：0.94％、4.72％、0.94％;复发性自然流产组：9.76％、7.32％、2.44％;继发不孕组：3.57％、1.79％、3.57％;偶发流产组：0.00％、3.70％、7.41％.RSA组与早孕组均有统计学意义,p＜0.05;余组间比较无统计学意义.结论 抗心磷脂抗体阳性率在RSA最高19.52％、早初孕组6.60％、继发不孕组8.93％、偶发流产组11.11％、正常生育组7.40％.不明原因复发性自然流产的发生和抗心磷脂抗体的产生密切相关.     

微小隐孢子虫表面抗原CP23DNA疫苗免疫山羊诱导免疫应答及保护性研究

观察微小隐孢子虫（Cryptosporidium parvum)子孢子表面抗原CP 23 DNA疫苗免疫山羊诱导其产生免疫应答和保护性作用。将重组质粒pCR3.1-23经鼻粘免疫怀孕山羊，用ELISA测定IgG和IgA抗体滴度，用C.parvum卵囊经口对其后代攻虫感染。抗CP23抗体存在于免疫山羊的血浆和初乳中，且抗体滴度随免疫时间延长而增高。C.parvum卵囊经口感染后代，试验组山羊后代与对照组相比，卵囊排出数量减少，排出时间缩短，微小隐孢子虫表面蛋白CP 23 DNA疫苗能诱导山羊产生特异性免疫应答并对其后代有一定免疫保护作用。     

抗巨片形吸虫同型抗体在动物巨片形吸虫感染所致的抗体依赖性细胞介导的细胞毒反应( ADCC )免疫应答作用的研究

以印尼短尾羊（ITT）和美利奴细毛羊（Merino）两种品系的绵羊为实验动物，研究动物感染巨片形吸虫后所产生的抗体依赖性细胞介导的细胞毒反应的免疫应答。结果显示：对巨片形吸虫感染具有抗性的印尼短尾羊不产生特异性的IgG2，而易感品系的美利奴细毛羊感染巨片形吸虫后体内产生高滴度特异性IgG2抗体、特异性IgG2抗体在免疫应答中起着封闭抗体的作用，抑制巨噬细胞抗体依赖性细胞介导的细胞毒反应。由于印尼短尾羊不产生特异性IgG2抗体，对巨噬细胞抗体依赖性细胞介导的细胞毒反应不产生抑制作用，因此印尼短尾羊对巨片形吸虫的感染具有一定的抵抗力。使用纯化的IgG1和IgG2进行体外杀虫试验，结果IgG1有很强的促进体外杀虫效果，而自感染巨片形吸虫的美利奴细毛羊血清标本纯化的IgG2没有体外杀虫作用。体外实验还显示嗜酸性粒细胞在免疫血清、补体和IL-5的共同参与下具有较强的杀虫作用。     

两性糖体液免疫应答机制的研究

分别从抗体水平和细胞水平上探寻两性糖与中性糖、糖蛋白诱发的免疫反应的差异.在抗体水平上采用间接ELISA法测定抗体效价及相对亲和常数,在细胞水平上采用MTT法测定细胞增殖情况.与中性糖相比,两性糖能明显刺激机体表达IgG类抗体,促进脾细胞增殖.两性糖表现出与糖蛋白相似的免疫应答特性,初步判断两性糖能诱使淋巴细胞的基因发生重排,出现抗体同型转换.     

心肌肌钙蛋白I-C复合物酶联免疫检测方法的建立

为了制备抗人心肌肌钙蛋白I(cTnI)单克隆抗体、建立检测人cTnI链酶亲和素-生物素双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,用基因工程表达的人cTnI免疫雌性BALB/c小鼠,以杂交瘤技术制备得到三株特异性抗人cTnI的单克隆抗体记为6G3,6A6,3G9.三株杂交瘤细胞中6G3和6A6为IgG1,3G9为IgG2b,腹水效价分别为4×10-5,4×10-5和10-5.亲和常数为5.0×109,6.4×109和3.8×109mol-1.Westernblotting结果表明6G3和6A6能够识别cTnI-C复合物.把6G3抗体生物素化并制备抗cTnI、cTnC和cTnI-C的大鼠多克隆抗体.以多抗作为固相捕捉抗体,生物素化6G3抗体作为检测抗体,建立检测cTnI的双抗体夹心ELISA方法并初步应用于临床病人标本检测.以cTnI-C复合物多抗捕捉检测方法具有良好的灵敏度、特异性和准确性,灵敏度为0.9ng/mL,较包被其他抗体捕捉方法提高1~2倍.批内变异系数为5.03%,回收率为94.56%.测定17例AMI病人和18例血清样本临床诊断结果符合率为100%.     

甲亢患者双特异性免疫复合物的研究

采用捕捉法ELISA,检测108例亢患者的抗体／补体类双特异性免疫合（Ig-C3-TCIC）和抗体／抗体类双特异性免疫复合物（Ig/Ig-TCIC),结果发现,甲亢患者除了C3／IgA-tcic含量显著高于健康人,C3／IgM-TCIC与健康人无显著性差异外,IgM/C3-TCIC、IgG/C3-TCIC、IgA/C3-TCIC和C3／IgG－TCIC的含量均显著低于健康人;各类Ig/Ig－含量,除IgA/IgM-TCIC与健康人无显著差异外,其余均显著高于健康人,结果表明,甲亢患者排除“异己”原的能力低下,而免疫调节水平紊乱,从而出现过高的免疫应答,也证明甲亢患者存在整体的和细胞免疫紊乱。     

大理地区精神病患者弓形虫感染情况调查

目的：了解大理地区精神病患者弓形虫感染情况,探讨弓形虫感染与精神疾病之间的关系。方法：采用酶联免疫吸附试验对219例精神病患者及91例健康体检者进行血清弓形虫IgG抗体检测。结果：精神病患者弓形虫抗体阳性率为31．96％,健康体检者为20．88％,两者之间差异显著（P〈0．05）。结论：本地区精神病患者弓形虫抗体阳性率高于健康人群。临床医务工作者应加强对弓形虫病的认识,重视精神病患者的弓形虫感染情况．对门诊和住院病人进行常规弓形虫检测。     

广州地区1995—1997年HIV抗体检测情况分析

为了解献血员人群ＨＩＶ感染情况，我们对１９９５～１９９７年献血员ＨＩＶ抗体检测情况进行了分析。方法：献血员ＨＩＶ抗体的初筛试验采用抗－ＨＩＶ抗体ＥＬＩＳＡ法，ＨＩＶ抗体初筛试验阳性者用蛋白印迹法（ＷＢ）进行确认。结果：３年内共检测１４００２８人次，初筛ＨＩＶ抗体阳性１８例献血员，并全部经ＷＢ法确认为ＨＩＶ抗体阳性。其中１５例为男性，３例女性，均为来自外省的流动人口。１８例ＨＩＶ抗体阳性献血员中，ＨＣＶ抗体阳性检出率为８３３％（１５／１８），ＨＢｓＡｇ阳性检出率为６１１％（１１／１８），ＨＢｓＡｇ和ＨＣＶ抗体阳性检出率为３３３％（６／８）。结论：在献血员人群中ＨＩＶ抗体阳性检出率呈上升趋势，为此献血员ＨＩＶ抗体筛查对预防和控制输血传播ＨＩＶ具有重要意义。ＨＩＶ与ＨＢＶ和ＨＣＶ具有较高的重叠感染率     

ELISA定量测定单克隆抗体方法改进

本文介绍了以亲和层析纯化的免抗鼠IgG类抗体及其酶标物作为捕获及检测抗体进行鼠杂交瘤培养上清及腹水中IgG类单克隆抗体的ELISA定量测定方法。结果表明:小牛血清(BS)、免血清(RS)、马血滑(HS)、人血清(HuS)及非抗体产生细胞的培养上清对本项εLISA实验无干扰,使测定的结果较可靠,测定的鼠IgG各亚类的标准曲线的线性范围均在5～100ng/ml之间,因此这个快速、可靠的方法可为鼠IgG类单克隆抗体的定量测定提供一种实用的手段。