子宫内膜胞饮突表达判断冻融胚胎移植时机的研究

目的研究利用扫描电镜观察到的子宫内膜成熟胞饮突表达判断冻融胚胎移植时机。方法对本科完成自然排卵冻融胚胎移植123个周期进行回顾性分析,按判断冻融胚胎的移植时机方法不同分为A组（利用扫描电镜观察到的成熟胞饮突判断）、B组（利用血LH峰来判断）。结果两组临床妊娠率分别为34.37%和17.58%,胚胎着床率分别为16.7%和8.6%。结论利用成熟胞饮突判断冻融胚胎移植时机可提高临床妊娠率及胚胎着床率。     

瘦素对小鼠体外胚胎发育率及胚胎移植后着床率的影响

观察瘦素对体外受精后胚胎发育和胚胎移植后着床率的影响。采用小鼠卵母细胞体外受精后胚胎培养及胚胎移植的方法研究仅受精时添加的瘦素对受精后体外胚胎发育的影响及胚胎移植后着床率的影响。结果表明：1）仅受精时添加不同浓度的瘦素对受精卵发育至四细胞胚、桑椹胚及囊胚的比率均无显著影响（P〉0.05）。2）添加的瘦素剂量为10ng/mL及50ng/mL时胚胎着床率较高,当添加的瘦素剂量为100ng/mL-500ng/mL胚胎着床率未提高,两组差别有统计学意义（P〈0.05）。一定水平的瘦素可以显著提高小鼠的体外胚胎移植后的着床率,高水平瘦素反而对着床不利。受精后至着床前各期胚胎的发育率与受精当时瘦素浓度无关。     

二至益真胶囊对改善高龄妇女胚胎质量的效果

目的:应用时差成像技术观察二至益真胶囊在改善高龄妇女胚胎质量中的作用.方法:回顾性分析2019年5月至12月于广州中医药大学第二附属医院生殖医学科行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)助孕的肾阴虚高龄妇女,根据治疗情况分为中药治疗组和对照组,对照组65例直接进行IVF-ET治疗,中药治疗组62例先行二至益真胶囊中药治疗,然后进行IVF-ET治疗.比较两组患者的胚胎动力学参数及异常卵裂事件发生情况;同时观察两组患者获卵数、正常受精率、可利用胚胎数、优质胚胎数、临床妊娠率、着床率等情况.结果:中药治疗组平均获卵数显著多于对照组(P0.05);两组患者的可利用胚胎数和优质胚胎数无统计学差异(P0.05),但中药治疗组有增多的趋势.两组患者的正常受精率、临床妊娠率和着床率无统计学差异(P0.05);在原核消失时间(t_(PNF))、2细胞出现时间(t_2)、3细胞出现时间(t_3)、4细胞出现时间(t_4)、5细胞出现时间(t_5)时段中,中药治疗组胚胎发育速度显著快于对照组(P0.05),中药治疗组的s_2(从3细胞分裂为4细胞的持续时间)显著短于对照组,有统计学差异(P0.05),两组患者胚胎的异常分裂发生率无统计学差异(P0.05),但中药治疗组胚胎异常分裂发生率有降低的趋势.结论:应用二至益真胶囊,可有效改善高龄IVF-ET患者的早期胚胎发育迟缓,同时对异常卵裂的发生有一定的改善作用,最终可能通过提高胚胎质量而改善高龄女性的生育力.     

血清LIF、HB-EGF与冻融胚胎移植术后妊娠结局的相关性及对妊娠成功预测价值分析

目的:探讨血清白血病抑制因子(LIF)、肝素结合表皮生长因子样生长因子(HB-EGF)与冻融胚胎移植术后妊娠结局的相关性及对妊娠成功预测价值分析.方法:选取2019年3月至2019年12月拟进行冻融胚胎移植术患者的92个周期,随访根据妊娠结局分为妊娠组(32周期)和非妊娠组(60周期),比较两组年龄、不孕年限、子宫内膜形态、移植日子宫内膜厚度等可能影响妊娠结局的因素;比较2组移植日血清LIF、HB-EGF水平,并采用Logistic回归分析法明确可能导致妊娠失败的危险因素;通过绘制受试者工作特征曲线(ROC),分析血清LIF、HB-EGF水平对妊娠成功的预测价值.结果:妊娠组与未妊娠组子宫内膜形态、移植日子宫内膜厚度比较,差异有统计学意义(P0.05);妊娠组移植日血清LIF质量浓度[(24.45±2.91) pg/mL]高于未妊娠组[(19.32±2.04) pg/mL],HB-EGF质量浓度[(3 320.59±300.74) pg/mL]高于未妊娠组[(2 430.55±261.37) pg/mL],差异均有统计学意义(P0.05);经Logistic回归分析,子宫内膜形态、移植日子宫内膜厚度、血清LIF、HB-EGF水平均是导致冻融胚胎移植术后妊娠失败的危险因素(OR=3.074、2.563、4.437、3.881,P0.05);经ROC曲线分析,血清LIF预测冻融胚胎移植术后妊娠成功的灵敏度、特异度、准确度和AUC分别为84.38%、76.67%、79.35%、0.760;血清HB-EGF水平预测的灵敏度、特异度、准确度和AUC分别为78.13%、73.33%、75.00%、0.722.结论:血清LIF、HB-EGF水平与冻融胚胎移植术后妊娠结局关系密切,且两者对冻融胚胎移植术后妊娠成功有较高预测价值.     

多原核受精对IVF周期中获卵数低的患者助孕结局的影响

目的:探讨体外受精(IVF)周期中多原核发生与否，对获卵数较低的患者助孕结局的影响。方法:回顾性分析中山大学附属第三医院生殖医学中心在2015年9月至2020年1月期间实施辅助生殖治疗的情况。共纳入1 306个IVF周期，发生多原核受精的患者为A组(388例),无多原核受精的患者为B组(918例),比较两组间的基线资料、实验室指标及累计妊娠率、累计活产率、出生体质量等周期结局。结果:A组的抗缪勒管激素水平(AMH)显著高于B组，而可利用胚胎数显著少于B组，两组间的窦卵泡计数(AFC)、平均获卵数、卵子成熟率、受精率、正常受精率、可利用胚胎率和移植胚胎总数差异均有统计学意义，A组的累计妊娠率小于B组，差异有统计学意义，累计活产率也小于B组，但差异无统计学意义。当可利用胚胎数为1～3枚时，随着可利用胚胎数的增加，累计妊娠率和累计活产率相应上升，而当可利用胚胎数为4～5枚时，累计妊娠率和累计活产率达到平台期。结论:当获卵数低的患者出现多原核受精时，患者胚胎移植的成功率因可利用胚胎数减少而降低，会对周期结局产生影响，只有当可利用胚胎数≥4枚时，才可考虑胚胎移植，以达到较为满意的累计妊娠率和累计...     

针刺结合中药人工周期疗法治疗体外受精卵巢反应低下患者的临床疗效

目的探讨针刺结合中药人工周期疗法对体外受精卵巢反应低下患者的临床疗效。方法选取120例符合卵巢反应低下的患者随机分为观察组、空白组、中药组、针刺组,在进入体外受精治疗程序前3个月进行预处理,对观察组行针刺结合中药人工周期疗法治疗,对中药组行中药人工周期疗法治疗,对针刺组行针刺治疗,空白组不做任何治疗。检测两组治疗后的FSH水平、在IVF-ET中的Gn用量、取卵数、胚胎数、临床妊娠率。结果观察组Gn用量、获卵数及胚胎数高于空白对照组、中药组、针刺组,有统计学差异(p0.05)。中药组、针刺组Gn用量、获卵数及胚胎数高于空白对照组,有统计学差异(p0.05)。中药组、针刺组Gn用量、获卵数及胚胎数比较无统计学差异(p0.05)。观察组妊娠率35.7%(10/28),空白组妊娠率23.3%(7/30),中药组妊娠率26.7%(8/30),针刺组妊娠率27.5%(8/29),经t检验方法统计分析,观察组妊娠率高于其余3组,比较有统计学差异(p0.05),针刺组妊娠率高于空白组、中药组,比较有统计学差异(p0.05)中药组妊娠率高于空白组,较有统计学差异(p0.05)。结论针刺结合中药人工周期疗法对卵巢低反应患者的内分泌水平的调节具有良性作用,针刺结合中药人工周期疗法对卵巢反应低下患者进行促排卵前预处理,对增加后续IVF-ET术中可移植胚胎数及临床妊娠率,对提高卵巢反应低下患者的妊娠率提供了新的治疗方案。     

昆明小鼠胚胎输卵管移植技术研究

目的通过研究不同输卵管胚胎移植方法、不同细胞类型及适宜胚胎的数量对移植后妊娠率和产仔率的影响,旨在提高小鼠胚胎移植效率。方法分别将1-细胞、2-细胞和8-细胞胚胎、移入发情的假孕KM雌鼠的输卵管,选择最适宜的胚胎类型用以研究最合理的胚胎移植数量,以及比较输卵管伞移植和膨大部移植两种方法的优劣。结果2-细胞胚胎移植后的妊娠率显著高于1-细胞和8-细胞处理组（66.67%vs25%,33.33%,P〈0.05）;每只小鼠输卵管移植25个2-细胞胚胎后的产仔率显著高于15个和35个两处理组（36%vs16.67%,10.71%,P〈0.05）;采用输卵管壁切口移植的妊娠率和产仔率显著高于输卵管伞移植（50%vs75%,38.9%vs49.3%,P〈0.05）。结论采用25枚左右的2-细胞期胚胎通过输卵管壁切口移植的方法可以取得较高的输卵管移植成功率。     

小鼠胚胎移植研究

目的研究不同时期胚胎对胚胎移植成功率的影响以提高胚胎移植率。方法采用经超量排卵的KM雌鼠与正常615雄鼠交配,取受精卵,分别将单胚卵、双胚卵、桑椹胚和囊胚、移入发情的假孕KM雌鼠的输卵管和子宫中妊娠产仔。结果移入单胚卵、双胚卵、桑椹胚和囊胚的假孕母鼠妊娠率分别为36.36%、42.86%、10%、27.27%,产仔率分别为46.58%、38.46%、58.33%、60%。结论移植双胚卵可提高小鼠的胚胎移植成功率。     

几种辅食喂养对昆明小鼠胚胎的影响

为了提高昆明小鼠不同发育阶段的胚胎质量,在对成年昆明小鼠繁育研究中,对照组用全价颗粒饲料喂养,实验组分别添加麦芽、瓜籽和速补-18喂养,分别在D4、D8和出生后观察每组小鼠的妊娠阳性率,D4孕小鼠产生的平均囊胚数目、小鼠囊胚形态、贴壁率、扩展率及其子宫形态;D8和出生后观察胚胎着床数。结果表明,添加速补组的妊娠阳性率、囊胚孵化率、贴壁率、扩展率和胚胎着床数明显高于其它实验组。     

昆明小鼠胚胎移植技术的研究

目的研究不同时期胚胎对胚胎移植成功率的影响,以提高胚胎移植率。方法采用经超数排卵的KM雌鼠与正常615雄鼠交配,取受精卵,分别将1-细胞胚、2-细胞胚和桑椹胚、囊胚分别移入发情的假孕KM雌鼠的输卵管和子宫中,妊娠产仔。结果移入1-细胞胚、2-细胞胚、桑椹胚和囊胚的假孕母鼠妊娠率分别为36.36%、42.86%、10%、27.27%,产仔率分别为46.58%、38.46%、58.33%、60%。结论2-细胞胚的移植可提高小鼠的胚胎移植成功率,子宫移植可提高小鼠的产仔率。     

卵巢高反应患者行卵泡期长方案治疗的 预后影响因素分析

目的:分析在使用卵泡期长方案进行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)控制性促排卵(COH)过程中,新鲜胚胎移植后妊娠与因预防卵巢过度刺激综合征(OHSS)取消新鲜胚胎移植人群的临床助孕情况及影响因素.方法:分析223个IVF-ET取卵周期,均采用卵泡期长方案,比较因预防OHSS风险而取消新鲜胚胎移植的38例患者(A组)与进行新鲜胚胎移植后妊娠未出现OHSS风险的79例患者(B组)之间基本临床资料、降调节后激素水平、临床用药、卵泡及胚胎资料的不同.结果:A组患者的基础窦卵泡数(AFC)、启动日卵泡数、hCG扳机日E_2浓度、获卵数、MⅡ卵数、受精数及可利用胚胎数均显著高于B组(P0.05).结论:对于基础AFC多、基础FSH值低的卵巢高反应患者,使用卵泡期长方案时应综合考虑启动日的卵泡数,若基础AFC及启动日卵泡数均较多,而基础FSH值较低,则不推荐使用卵泡期长方案.     

控制性超促排卵大鼠模型的建立

目的 选择理想的符合临床实际的控制性超促排卵(COH)大鼠模型，为后续的实验提供良好的实验基础。方法 将75只大鼠随机平均分为正常组(N),模型10组(M10),模型20组(M20),模型40组(M40)和模型100组(M100),每组各15只。各模型组分别于动情期后一日的下午5:00给予腹腔注射孕马血清促性腺激素(PMSG)10单位、20单位、40单位和100单位，并于48 h后，再分别给予腹腔注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)10单位、20单位、40单位和100单位，注射完后立即合笼，以次日行阴道涂片见大量精子记为怀孕1 d。在第8天，行剖宫探查，记录大鼠的妊娠情况和着床的胚泡数。另取25只大鼠，按上述方法随机分对照组和不同剂量干预组，每组5只，各组大鼠在妊娠第5天取材，处理后观察子宫内膜胞饮突和LIF蛋白的表达。结果 各组大鼠交配率无统计学差异(P>0.05)。与N组相比，M10组大鼠怀孕率无明显降低(P>0.05),M20、M40和M100组大鼠怀孕率明显降低(P<0.01);和N组相比，M10组大鼠胚泡着床位数无明显增加(P>0.05),M20、M40和...     

HCG日孕酮水平与体外受精-胚胎移植治疗结局的关系探讨

目的:探讨在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)控制性促排卵(COH)过程中,人绒毛膜促性腺激素(HCG)日孕酮(P)浓度与IVF-ET治疗结局的关系.方法:分析350个IVF-ET取卵周期,均采用黄体中期垂体降调节方案,按HCG日血清孕酮浓度分为3组,分别为A组67例(1.0≤P2.0 nmol/L)、B组133例(2.0≤P3.0 nmol/L)、C组150例(3.0≤P4.77 nmol/L).比较3组患者的基本临床资料、卵子及胚胎资料、周期取消及妊娠结局情况.结果:HCG日血清孕酮浓度在3.0~4.77 nmol/L组时,获卵数、MII卵数及受精数均高于其他组;同时种植率及妊娠率亦最高.结论:HCG日血清孕酮浓度水平在3.0~4.77 nmol/L之间能获得更成熟的卵子,同时不增加因多卵泡发育引起卵巢过度刺激综合征(OHSS)导致的周期取消率.     

体外受精——胚胎移植在不孕症治疗中的应用

对 6 0例不孕症患者采用GnRH -a FSH HCG超促排卵方案治疗 ,应用HTF培养基培养胚胎。采样 6 0个取卵周期 ,5 8个周期进行胚胎移植。移植周期妊娠率达34.5 %。从临床效果可见 ,体外受精—胚胎移植是解决输卵管因素不孕最直接的方法     

瘦素对猪卵母细胞体外成熟及克隆猪妊娠率的影响

体细胞克隆猪在人类医学、基础科学研究和畜牧业生产方面均具有很大的应用潜力.为了提高体细胞克隆猪的效率,首先比较了两种基础成熟液NCSU-23和TCM199的体外成熟效果,然后在TCM199培养液的基础上,较系统地研究了添加不同浓度的瘦素对猪卵母细胞成熟、孤雌激活胚胎和克隆胚胎的体外发育以及克隆胚胎体内发育的影响.结果表明:成熟液中添加100ng/mL或200ng/mL瘦素对猪卵母细胞的核成熟没有显著影响(P>0.05);对孤雌激活卵裂率和克隆胚胎卵裂率也没有显著影响(P>0.05);但却显著提高了孤雌激活胚胎的囊胚率和囊胚细胞数,并且显著提高了克隆胚胎的囊胚率;当添加量为100ng/mL时,克隆囊胚的细胞数显著升高.另外,研究表明,瘦素很可能具有提高克隆胚胎移植妊娠率和妊娠到期率的作用.     

小鼠胚胎移植实验方法

目的在小鼠胚胎移植实验中除了胚胎的质量外,希望从受体状况及胚胎移植的技术和方法上摸索出最佳胚胎移植的条件,提高胚胎移植率,为临床胚胎移植提供实验和理论数据。方法从超数排卵或自然发情怀孕3.5 d的母鼠子宫内收集胚胎,在显微镜下观察,以最快的速度将发育与胚龄一致并且形态完好的胚胎捡出,并移植到自然发情2.5 d的小鼠子宫内。结果超数排卵的胚胎质量比自然发情的胚胎质量差,在12个自然发情的受体中有3个怀孕并产下12只仔鼠。结论小鼠胚胎移植与供受体的准备、小鼠的超数排卵、胚胎品质有着密切的关系,胚胎移植的技术和方法对胚胎移植有着至关重要的关系。     

体外受精—胚胎移植在不孕症治疗中的应用

对60例不孕症患者采用GnRH-a/FSH/hCG超促排卵方案治疗,应用HTF培养基培养胚胎。采样60个取卵周期,58个周期进行胚胎移植。移植周期妊娠率达34.5%。从临床效果可见,体外受精-胚胎移植是解决输卵管因素不孕最直接的方法。     

季节对猪体外成熟卵母细胞的发育能力的影响

猪的卵母细胞对外界环境非常敏感,这造成猪的胚胎学相关研究是家畜繁殖学研究领域中最困难的方面之一.文章的研究目的是描述季节的变化对体外成熟卵母细胞发育能力的影响.研究中比较了不同季节每对卵巢获得A/B级卵的数量以及卵母细胞核成熟的比例(实验1),另外统计分析了不同季节孤雌(实验2)和核移植(实验3)胚胎发育能力的差异,最后在冬春两季分别进行了克隆胚胎的移植以观测其体内发育情况(实验4).结果显示实验1,春季(3月到5月)COCs/卵巢的比例最高(7.6±3.5),夏,秋,冬季的比例依次是(6.4±3.3),(6.7±2.9),(6.7±3.4),p<0.05.然而,没有发现卵母细胞的MⅡ比例有显著性差异((75.3±3.3)%,(73.5±2.3)%,(73.0±4.2)%,(76.5±6.7)%,依次是春,夏,秋,冬季的MⅡ比例,p<0.05).实验2,观察到夏季孤雌胚胎的囊胚率显著性降低(10.1±2.6)%,春,秋,冬季的孤雌胚胎囊胚率依次是(27.2±3.4)%,(22.4±3.5)%,(22.4±3.4)%,p<0.05.实验3,猪体细胞克隆胚胎在春季囊胚率获得提高((12.2±1.3)%,秋,冬季的克隆胚胎囊胚率依次是(10.2±1.2)%,(8.1±1.4)%,p<0.05).实验4,发现冬季胚胎移植无论是妊娠率还是出生率都明显低于春季.以上结果表明季节变化影响体外成熟卵母细胞的发育能力.     

钙离子敏感受体在大鼠子宫中的表达

本实验为了探讨钙离子敏感受体(Calcium-sensing receptor,CaR)与胚胎着床及蜕膜化的关系,建立了大鼠早期妊娠、假孕、延迟着床和人工诱导蜕膜化模型,收集各种模型的子宫材料,利用免疫组化方法检测了CaR在大鼠子宫中的表达。结果表明,CaR在妊娠第6~9天的子宫蜕膜上强表达;假孕第6~9天和延迟着床的大鼠子宫腔上皮下基质中无明显的免疫信号,而延迟着床激活胚胎周围的腔上皮下基质中有强的免疫信号。蜕膜化子宫中整个蜕膜区呈强的免疫染色信号。从而推断,CaR蛋白的表达与胚胎着床及蜕膜化过程密切相关。     

小鼠胚胎移植技术优化及对巨细胞病毒净化研究

目的 建立小鼠巨细胞病毒净化方法,以获得无MCMV感染的小鼠。方法 利用胚胎移植技术,通过使用不同激素、不同发情周期注射激素、受体鼠品系、不同的移植方法、不同时期胚胎移植,以及移植胚胎数量等对比试验,优化了净化条件。利用优化的胚胎移植净化方法,对供体鼠进行了净化。结果 SIGMA生产的激素,在10 IU剂量下超排得到的可用胚胎数量约为17枚/只;在小鼠发情间期超排得到的可用胚胎最多,超排的可用胚胎数约为23枚/只;选取C57雄性小鼠与ICR雌性小鼠交配的子一代作为受体鼠,产仔率达44.5%;输卵管移植较子宫移植效果好,产仔率为40.64%;移植2细胞胚胎的妊娠率为80%,明显优于单细胞和8细胞;受体鼠移植24枚胚胎时,产仔率达到了43.75%。利用优化的小鼠巨细胞病毒胚胎移植净化方法,净化得到了无MCMV感染的小鼠。结论 建立了小鼠巨细胞病毒净化方法,为获得无MCMV感染的小鼠种群提供了可靠的保障。