PCR法检测小鼠自身携带的细小病毒

小鼠是 2种细小病毒ＭＰＶ和ＭＶＭ的终宿生。它们均可感染淋巴细胞 ,抑制体内肿瘤形成 ,污染细胞培养。由于细小病毒感染会干扰研究结果 ,因此确定小鼠感染ＭＰＶ还是ＭＶＭ是很重要的。本研究的目的是建立检测排泄物中病毒的ＰＣＲ方法 ,在血清抗体产生之前能够活体检测出ＭＶＭ和ＭＰＶ。排泄物中ＤＮＡ的提取最好用商品化的过柱方法 ,通过增加洗涤步骤帮助去除排泄物中的抑制物。为了提高敏感性 ,比较了4 5个循环扩增排泄物ＰＣＲ和只有 35个循环的组织ＰＣＲ。通过检测 37只来自同一群自然感染ＭＶＭ和ＭＰＶ成年Ｓｅｎｃａｒ小鼠的粪…     

实验小鼠细小病毒(MMV)抗体的实验室检测能力验证结果评价

目的通过实验小鼠细小病毒(Murine minute virus,MMV)抗体检测能力验证实施计划,了解我国实验动物检测机构的检验能力,促进实验动物质量检测水平的提高。方法按照CNAS批准的能力验证方案,血清经过标定后,经过稳定性和均匀性等检验合格,作为能力验证样本。对血清样本采用随机编号形式发放给能力验证参加单位,并附作业指导书。本次能力验证为定性检测,检测方法采用ELISA方法。要求参加单位在规定时限提交检验报告和原始记录复印件,满意结果为样品的检测结果与预检结果一致,不满意结果为样品检测结果与预检结果不一致或参加单位未反馈结果。结果样本血清均匀性试验和稳定性试验结果显示,样本均符合能力验证样本均匀性和稳定性要求。本次能力验证共有19个省市的33个实验动物检测机构报名参加。33个检测机构均提交了满意结果,满意度为100%。结论实施此次能力验证计划能够反映我国实验动物检测实验室的检测能力和水平,我国实验动物质量检测机构对实验小鼠细小病毒(MMV)抗体检测的能力较高。     

大小鼠主要病毒血清抗体检测结果与分析

目的评估清洁级大鼠、小鼠的微生物学质量。方法参照国家标准GB／T 14926-2001,依据单纯随机抽样 原则从相关单位生产繁殖群采集样品,检测主要病毒血清抗体水平。结果检测31只大鼠,其中仙台病毒(SV)和 汉坦病毒(HV)抗体阳性率均为0;检测280只小鼠,其中25只小鼠肝炎病毒(MHV)抗体阳性,10只小鼠仙台病 毒(SV)抗体阳性,1只小鼠鼠痘病毒(Ect)抗体阳性。结论清洁级小鼠的病毒监测工作及质量控制需加强。     

应用聚合酶链式反应检测犬细小病毒

将具有犬细小病毒病典型症状的病犬肠溶物经ＳＤＳ－酚裂解法提取总ＤＮＡ,并以此ＤＮＡ为模板,通过人工合成的两条２０ｍｅｒ引物进行ＰＣＲ扩增,该对引物扩增的片段为犬细小病毒结构蛋白ＶＰ２基因中间１／３区段,ＰＣＲ产物经琼脂糖凝胶电泳,试验结果表明：用ＰＣＲ扩增检测犬细小病毒具有良好的特异性,应用该方法检测的２７份病犬肠溶物样品块获得了预计长度的ＤＮＡ片段（５３１ｂｐ）,而健康犬的肠溶物样品ＰＣＲ结果为     

猪细小病毒血清学检测方法的建立

目的建立猪细小病毒血清学检测方法。方法用抗猪细小病毒的猪源性血清,通过IFA和IEA两种方法,首先将阳性血清吸附PK-15细胞抗原,以排除非特异反应,通过对阳性血清及3种二抗(其中IFA以FITC标记的抗猪IgG抗体,IEA分别以HRP标记的抗猪IgG抗体和SPA-HRP作为二抗)进行浓度梯度滴定,确定最佳工作浓度,并比较三种反应体系的敏感性。结果IFA最高能检测出PPV-猪组织混合感染PK-15细胞模型中1个TCID50,而其它两种反应体系均只能检测100个TCID50。结论间接免疫荧光检测方法比其它两种方法敏感性更高。     

同时检测小鼠微小病毒(MVM)和小鼠细小病毒(MPV)的荧光定量PCR的建立及应用

目的 建立同时检测小鼠微小病毒(MVM)和小鼠细小病毒(MPV)的荧光定量PCR方法,并进行初步应用。方法 比对NCBI上发表的MVM和MPV基因组序列,设计1对引物和探针,可同时检测MVM和MPV。考察MVM-MPV引物探针的特异性和灵敏度,并对178份清洁级小鼠粪便DNA样本进行检测。结果 MVM-MPV荧光定量PCR方法最佳线性范围为109～104拷贝/μL,标准曲线的线性关系良好,R2值可达0.99,灵敏度为101拷贝/μL,特异性强。应用MVM-MPV探针对178份小鼠粪便DNA检测,结果为2份阳性样本,经MVM、MPV特异性探针鉴定,2份阳性样本均为MPV感染。阳性样本经全基因组测序后与NCBI网站上MPV(NC_001630.1)序列比对,一致率为96%。结论 建立的MVM-MPV荧光定量PCR方法,能够有效快速地同时检出小鼠细小病毒和小鼠微小病毒。     

鹅细小病毒研究进展

对小鹅瘟的病原体鹅细小病毒的遗传物质核酸及其表达产物蛋白质的研究进展进行了综述.     

猪伪狂犬病病毒抗体检测的研究进展

伪狂犬病(PR)又名Aujeszky病,是OIE规定的通报疫病,由疱疹病毒引起的严重传染病,具有传播速度快、传播途径多和流行范围广等特点,成为仅次于口蹄疫和猪瘟的主要疫病之一。一些猪场伪狂犬病发病和流行比较严重,而且还有逐渐扩大的趋势,给养猪行业带来了巨大的挑战和经济损失。因此掌握伪狂犬病病毒的临床诊断和防控措施很有必要。本文则对猪伪狂犬病病毒的抗体检测进行了阐述,希望对猪伪狂犬病的诊断有所帮助。     

猫细小病毒 PCR 检测方法的建立及初步应用

摘要: 目的 建立猫细小病毒 PCR 检测方法,应用于猫临床样本中 FPV 的快速检测。方法 根据已发表的 FPV VP2 基因序列设计合成引物,并以此建立 FPV 的 PCR 检测方法,并对方法的特异性、敏感性、稳定性等进行验证。 用建立的方法对 33 份猫临床样品进行检测。结果 建立的 FPV PCR 检测方法与猫疱疹病毒Ⅰ型(FHV-1)、猫冠 状病毒(FeCV)、猫合胞体病毒(FeSFV)、猫免疫缺陷病毒(FIV)均无交叉反应;可检测病毒最小滴度为 5lgTCID50 / mL,相应的 DNA 模板浓度为 4. 9 × 102 拷贝/μL;FPV DNA 在 － 30℃冰箱放置 12 个月仍可检测出目的条带。应用 该方法从 33 份猫临床样本中检测出 21 份 FPV 核酸阳性。结论 建立的 FPV PCR 检测方法具有特异、敏感及稳定 的特点,适合于临床 FPV 的感染检测。     

158例EB病毒血清学抗体检测分析

目的探究EB病毒侵入机体后所能波及到的相关疾病。方法对158例就诊人群采集静脉血,分离血清,用免疫酶染色法进行EB病毒VCA—Ig M、IgG、IgA测定。结果在158例受检人中EB病毒抗体阳性者110例,占受检人数的69.62%,其中在已确诊疾病的81例中,以血液系统疾病为多,占35.80%。其次是心血管、呼吸、消化系统等疾病。结论本文结果显示,EB病毒感染可导致机体多系统损害,如果能及时地对临床相关疾病作相应的实验室检查,将有助于及早发现、明确诊断、及时治疗、避免误诊、贻误病情。     

犬细小病毒的防治报告

本文是犬细小病毒急性传染病的防治报告。简要地介绍了工作概况。     

细小病毒与致癌蛋白质序列同源性比较佐证细小病毒无致癌潜力

在Micro Vax II及IBM/PC机上用Framis,Genepro软件,蛋白质、核酸序列数据库Swissprot,PIR,EMBL和Genbank,比较了H-1或MVM的四种蛋白质与现已报道的致癌蛋白质序列的同源性。结果表明,它们之间的配对百分数很低且是随机的,这可能是细小病毒没有致癌潜力的佐证。本实验室还初步证明PV MVM可以杀死经人Ha-ras与v-myc共转染大鼠胚胎成纤维细胞形成的转化细胞,这将为临床治疗抗放射线的人癌提供新途径。     

应用荧光抗体法检测人工感染小鼠体内的鼠棒状杆菌抗体

<正> 鼠棒状杆菌又叫科屈氏棒状杆菌(Corynebacterium kutscheri),可引起鼠棒状杆菌病(伪结核),它是严重危害小鼠、大鼠的细菌性传染病之一。该病多呈隐性感染,自然病例病变多在肺、肝、肾中形成脓肿。当小鼠由于营养不良、经辐射或用可的松处理,机体的免疫功能降低时,以及感染鼠痘、沙门氏菌和大量氨气刺激等,可导致本病爆发,造成大批死亡。同时给研究工作带来严重干扰和影响。世界许多国家均有发病报道。近年来对本病的监测研究较多。我国于1985年从小鼠肝     

对淋巴球脉络丛脑膜炎病毒抗体检测方法的研究

本文就检测淋巴球脉络丛脑膜炎病毒抗体(简称LCM)的方法作了比较,共采用ELISA、IFA、EIA以及IAHA等方法,表明ELISA法为最敏感,检测率最高。我们对1982～1987年来自国内21个省市共2824只小鼠检测了LCM抗体,发现有十三个省市的实验鼠群有该抗体,(61.9％)。其中以山东的阳性率为最高(90％)。     

犬细小病毒的诊治与预防

报告了犬细小病毒感染的临床症状，治疗技术，提出了预防措施。     

犬细小病毒免疫球蛋白的有效性评价

摘要:目的 探究犬细小病毒免疫球蛋白注射液的有效性。 方法 将实验犬分为模型对照组、对症治疗组与球蛋白治疗组,所有犬同时进行人工感染犬细小病毒,在实验犬发病后根据每日的状态,对症治疗组与球蛋白治疗组进行相应的治疗,球蛋白治疗组除进行与对症治疗组相同的治疗外,加入犬细小病毒免疫球蛋白的注射治疗。每日观察临床症状并进行评分,采集肛拭子用胶体金抗原检测试纸判断粪便排毒情况;每日采血,进行血常规及血液生化检测,对检测结果及实验犬死亡后解剖结果进行分析,根据模型对照组对另外 2 个治疗组的治疗效果进行对比。结果 所有实验犬发病率 100% ,模型对照组的好转率为 20% ,对症治疗组的好转率为 40% ,球蛋白治疗组的好转率为 80% 。 结论 通过人工感染模型与治疗组间的治疗效果对比,证实了犬细小免疫球蛋白注射液具有治疗犬细小病毒病的效果。     

猪细小病毒引起的繁殖障碍

猪细小病毒病,是由猪细小病毒(Porcine parvo virus)引起的一种传染病,主要特征为繁殖母猪发生死胎、流产、畸形胎、木乃伊化胎儿,甚至不育(SMEDI)。引起猪繁殖障碍的病原有多种,PPV是主要病原体之一,在世界商业性猪群中广泛传播,对养猪业具有重要的经济影响。国内外对本病的研究不断深入,取得了很大进展。本文试从发生与流行、病原及特性、临床与病理、免疫学、诊断与预防等几个方面对本病作一综述。     

双抗体夹心ELISA检测禽流感病毒方法的初步建立

用饱和硫酸铵初步纯化的兔抗AIV-H9高免血清中的IgG作为包被抗体,利用抗AIV-NP-7B4单抗作为ELISA的第二抗体,建立了检测禽流感病毒(AIV)抗原的双抗体夹心ELISA方法. 经方阵滴定试验测定反应的最佳工作条件为:兔抗AIV-H9高免血清IgG包被稀释度为1: 8 000(浓度为3.531 ug/mL),抗AIV-NP-7B4单抗腹水最佳使用稀释度为1: 800,酶标二抗的工作浓度为1: 4 000. 与其他禽易感病毒(NDV、IBV、EDS-76V)等均没有交叉反应. 结果表明,本方法具有很高的特异性.