鸡肝碱性磷酸酶显示方法研究

以鸡肝为材料,利用钙钴法,研究并优化了细胞碱性磷酸酶的显示方法。剪碎鸡肝,低速（500 r/min）离心取得鸡肝细胞悬浮液,制成涂片,在碱性磷酸酶作用液中孵育、染色,在数码互动显微镜下观察鸡肝细胞中碱性磷酸酶的显示与分布。结果表明,在显微镜下能够清楚看到大量黑色沉淀分布,说明细胞中含有大量碱性磷酸酶。     

顺序注射荧光法测定生鲜牛奶中碱性磷酸酶

以4-甲基伞形酮磷酸酯(4-MUP)为碱性磷酸酶(ALP)的底物,通过顺序注射荧光法检测乳制品中ALP的活性,进而对巴氏杀菌水平进行评价.结果表明,在最佳条件下相对荧光强度与ALP活性在50～1 000 mU/L范围内呈线性关系,其回归方程为△F=143.4CALP+6.859(r2=0.998 8),相对标准偏差为2.3％(200 mU/L,n=11),检出限(n=11)为14.0 mU/L,分析频率为15 h-1.方法自动化程度高、试剂试样用量少,将其应用于鲜奶和巴氏灭菌奶中ALP活性测定,准确性较好,加标回收率在90.01％～99.95％.     

鸡碱性磷酸酶同工酶研究进展

本文根据近年来国内外关于鸡组织碱性磷酸酶同工酶的研究资料,对鸡碱性磷酸酶同工酶的组织分布、分离、分型、性质、遗传特性及与生产性能的关系进行了比较全面的综述,为更深入地进行碱性磷酸酶同工酶的的研究提供理论指导.     

新生儿骨碱性磷酸酶的测定及与其它相关因素的研究

目的通过定量测定新生儿总碱性磷酸酶(TALP)和骨碱性磷酸酶的活性及Ca.p前囟大小,探讨它们之间的相关关系,得出早期诊断先天性佝偻病的最好方法。方法对100例新生儿定量测定BALP(酶免法)和TALP(生化法)及血清Ca.p前囟大小。结果BALP只与Ca有相关关系,(r=0.582,p=0.000<0.005)且成负相关,与TALP.P.孕周,前囟大小无相关关系。结论先天性佝偻病发生率高,占75%,BALP是早期诊断先天性佝偻病最好的特异性指标。     

反复呼吸道感染小儿骨碱性磷酸酶的改变及分析

目的:探讨小儿反复呼吸道感染与佝偻病之间的临床关系。方法:采用"小儿佝偻病诊断用骨碱性磷酸酶(BALP)试剂盒",对43例反复呼吸道感染小儿(RRTI)进行BALP的测试,另外随机抽取56例非反复呼吸道感染小儿(非RRTI)进行BALP测试。结果:发现RRTI小儿佝偻病患病率及亚临床期病例均高于非RRTI儿童,经统计学处理,两者之间差异非常显著。结论:提示佝偻病与RRTI有密切的关系。     

家蚕碱性磷酸酶的功能基团研究

用PCMB、NBS、PMSF、TNBS、SUAN、DTT、BrAc、IAc等在一定条件下选择性修饰家蚕碱性磷酸酶的部分氨基酸残基,对酶活力的变化进行测定.结果表明:PMSF、SUAN、BrAc、IAc和TNBS的修饰能显著抑制酶的活性,且酶活力降低程度与修饰剂的浓度相关;PMSF、DTT和NBT的修饰对酶的影响较小.初步认为,巯基和组氨酸的咪唑基可能是家蚕碱性磷酸酶的必需功能基团,赖氨酸残基和二硫键对保护酶的催化能力是必需的.     

南方鲶碱性磷酸酶的分子量及氨基酸组成的研究

南方鲶碱性磷酸酶的分子量及氨基酸组成的研究陈定福（西南师范大学生物系）碱性磷酸酶（ＡｌｋａｌｉｎｅＰｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，ＥＣ．３．１．３．１，简称ＡＫＰ）在生物体内的作用和应用功能已有报道￣［１－３］，其他一些学科领域也有ＡＫＰ研究成果，而鱼类ＡＫ...     

三角帆蚌碱性磷酸酶的初步研究

从三角帆蚌外套膜中,部分提纯了一种碱性磷酸酶(AKP),并对AKP的某些性质进行了初步研究。该酶作用于底物磷酸苯二钠,测定其最适pH值为10.1,最适温度为40℃,Km值为1.82×10~(-3)mol/L。分别测定了某些化学试剂对该酶的作用:Mg~(2 ),Ca~(2 )离子对AKP有不同程度的激活,尤以Mg~(2 )的作用明显;KH_2PO_4,L-Phe,L-Cys,ME(巯基乙醇),DFP(二异丙基氟磷酸)和EDTA-Na均对AKP有不同程度的抑制作用,其中L-Cys和ME抑制作用最为强烈。KH_2PO_4对AKP的作用属于竞争性抑制,而DFP属于非竞争性抑制。     

谈碱性磷酸酶及其应用

本文介绍了ALP的同功酶的检测方法及其在临床上的应用技术     

不同发育期牦牛血清钙、无机磷和碱性磷酸酶的测定及分析

对同一海拔地区不同发育期牦牛血清钙、无机磷含量和碱性磷酸酶活性进行测定。结果:1日龄和1月龄血清钙含量较高,6月龄和成年组牦牛血清钙含量降低,且明显低于普通牛(P<0.05),导致血清钙与无机磷之比较低;6月龄血清无机磷含量显著低于其余年龄组(P<0.05);游离钙由1日龄的1.48±0.16 mmol/L降低到成年组的0.43±0.02 mmol/L(P<0.05);幼龄犊牦牛碱性磷酸酶显著高于成年组,由1日龄的708.1±202.6 U/L降低到成年组的267.2±123.5 U/L(P<0.05)。结果表明:犊牦牛在生长发育期普遍存在缺钙和血清钙与无机磷比例失调的问题。     

重金属 Cu 对土壤碱性磷酸酶活性的影响?

采用室内恒温恒湿培养方法,研究不同深度(表层、50、100cm)土壤样品中重金属Cu对碱性磷酸酶(ALP)活性及其动力学特征的影响.结果表明:ALP活性随着培养时间的延长而增加;相同培养时间条件下,随着Cu质量分数w的增加,表层、50cm样品的土壤ALP活性呈现先升高后降低的变化趋势,100cm样品的土壤ALP活性减小;不同土壤ALP活性变化存在差异,这与各土壤样品的理化性质,尤其是有机质含量不同有关;w(Cu)与ALP的Vmax、Vmax/Km显著相关,可以考虑将ALP催化动力学参数Vmax、Vmax/Km值作为辅助参考指标用作考察土壤重金属Cu污染水平;金属Cu对ALP的作用先是非竞争性抑制,后是竞争性抑制,表现出一种混合抑制类型.     

中国大鲵(Andrias davidianus)二十四种组织器官的碱性磷酸酶(AKP)初步分析

用酶的原位复性电泳方法分析了中国大鲵二十四种组织器官的碱性磷酸酶。结果表明,二十四种组织器官中都有碱性磷酸酶存在,其中230和200 KD的碱性磷酸酶占优势;不同组织器官的碱性磷酸酶活性有差异,心脏中活性最强,眼球中活性最弱;在同一组织中,230和200 KD的碱性磷酸酶活性也有差异。另外,在肾脏和心脏中还含有一种250 KD的碱性磷酸酶,推测与器官的功能有关。     

基于金纳米线构建电化学传感器间接检测碱性磷酸酶活性

在临床实践中,碱性磷酸酶（ALP）是最常检测的酶之一,已被广泛用作肝病、骨病、乳腺癌、前列腺癌以及糖尿病等多种疾病的重要检测指标.通过自组装方法在氧化铟锡（ITO）导电玻璃上制备金纳米线（AuNWs）,利用4-巯基苯甲酸（4-MBA）修饰AuNWs,对其进行改性,与铜离子（Cu²⁺）螯合形成Cu²⁺-AuNWs/ITO电极.在ALP活性检测中,电解液中的焦磷酸根阴离子（PPi）与电极表面Cu²⁺结合,湮灭了Cu²⁺的电化学信号.ALP的加入使底物PPi水解并释放出Cu²⁺,电化学信号增加.构建的Cu²⁺-AuNWs/ITO电极对ALP活性检测范围为60~180 U·L^-1,且抗干扰性能良好.     

Effects of simulated microgravity on the alkaline phosphatase activity and intracellular calcium concentration of cultured chondrocytes

The effects of simulated microgravity on matrix mineralization of chondrocytes were examined using cultured chicken embryonic chondrocytes as the model. In four days, there was a time course decrease in alkaline phosphatase activity of chondrocytes, a marker of matrix mineralization. Meanwhile, in two days, there was a significant drop in intracellular calcium concentration in contrast to the control. These results indicate that simulated microgravity can suppress matrix calcification of cultured chondrocytes, and intracellular calcium may be involved in the regulation of matrix calcification as the second messenger. Yang Shuzhang made the same contribution to this work as the first author     

酶法水解鸡肝的工艺研究

采用5种蛋白酶分别对鸡肝进行水解,以水解度为指标,通过单因素试验,对原料预处理方法、酶解温度、pH、酶用量(E/S)、底物浓度及酶解时间等酶解条件进行优化,确定了Alcalase、Neutrase、Protamex、Fla-vourzyme以及木瓜蛋白酶水解鸡肝的工艺条件.综合比较酶解产物的水解度、氮回收率、感官质量和胆固醇含量发现,Alcalase水解能力最强,且产物苦味较弱;而Flavourzyme所得水解产物感官质量最好,无苦味,且具有较好的鲜味;酶解产物中均不含胆固醇.优选Alcalase用于单酶水解鸡肝,通过正交实验优化确定其最佳水解条件为:温度60℃,pH值8.0,加酶量1.25%,水解时间2.5h,底物浓度7.5%.在此条件下所得酶解液水解度为52.62%,氮回收率为85.32%.     

小鼠生长过程中肝AKP的活性变化及细胞定位

用比色法、酶的原位复性电泳、组织化学和细胞化学方法等分析观察了小鼠生长过程中肝碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,AKP)同工酶变化和细胞定位.比色法和细胞化学法研究表明,在小鼠生长过程中,出生第 7天小鼠(D7)肝的AKP活性最强,成体肝(Da)活性最弱; AKP活性在肝小叶内带、中带、外带中的活性呈依次减弱的趋势;细胞化学显示,AKP活性主要出现在肝实质细胞的细胞膜上,尤以胆小管周围的细胞膜上最多.用酶的原位复性电泳测得小鼠生长过程中共出现四条AKP同工酶带,各同工酶活性随着小鼠的生长发育时间不同而发生变化.     

Cd诱导土壤ALP的Hormesis效应:土地利用变化的驱动机制

【目的】土地利用变化引起土壤对环境胁迫的潜力发生改变,以土壤碱性磷酸酶(ALP)为例,研究土壤酶的Hormesis效应,揭示其与土地利用变化的关系。【方法】采集洪泽湖河湖交汇区湿地光滩、芦苇、柳树和杨树人工林,以及农田5种土地利用类型下的土壤,研究自然演替和人为土地利用改变下Cd诱导ALP的Hormesis效应及其差异,解析土地利用改变的影响。【结果】光滩和芦苇两种自然覆被下,Cd诱导ALP 的Hormesis效应最大刺激率(y_max)分别为8.81%和5.84%,诱导ALP表达Hormesis效应的Cd剂量范围(D₁-D₂)分别是0.39~3.02和0.22~3.77 mg/kg,剂量区间(Q_i)为7.74和17.14,ALP应对Cd胁迫的潜能(R)为11.34和7.85。相比较而言,农田人为土地利用改变下 y_max为5.22%,D₁-D₂为0.09~1.03 mg/kg,Q_i为11.44,R为3.02。【结论】芦苇围垦为农田使得y_max、Q_i和R均明显下降,这可能导致土壤对Cd胁迫伤害的补偿潜力下降。进一步分析表明,洪泽湖河湖交汇区不同土地利用下土壤质地、全氮以及溶解性有机碳含量对ALP的Hormesis效应表达产生了重要影响。     

超声提取与碱性浸泡法对小檗碱成分提出率的影响

把超声技术用于从中药黄连中提取小檗碱常规的碱性浸泡工艺中．与碱性浸泡法相比较，超声提取３０ｍｉｎ所得小檗碱提出率比碱性浸泡２４ｈ高５０％以上，且工艺简单，提取过程快速