光学免疫分析仪传感芯片表面修饰及表征

光学免疫分析仪能够实现对环境污染物的现场快速检测,为了减小传感芯片对蛋白的非特异性吸附并实现对抗体的特异性反应,需要对其进行化学修饰。该文选取2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)为目标物质,研究了3种传感芯片修饰方案,并对修饰后芯片表面的物理形态、化学组成及其对蛋白的响应进行了表征。实验结果表明,3种方案均有效地抑制了蛋白的非特异性吸附,且成功地实现了对2,4-D小分子配基的固定,其中双氨基聚乙二醇修饰的芯片基本不会吸附杂蛋白,而氨基葡聚糖修饰的芯片对2,4-D抗体具有更强的响应。因此,这3种修饰方案都适用于光学免疫分析仪传感芯片的制备。     

光学免疫传感器中芯片的制备

为满足光学免疫传感器在环境监测和食品卫生检测领域中应用的要求,研究一种免疫芯片制备方法,并用平面波导型荧光免疫传感器对免疫芯片的性能进行了评价。该方法可以将小分子物质固定到玻璃基底上。试验结果表明:该芯片能够有效抑制蛋白质的非特异性吸附,并对目标物质抗体的响应符合Logistic方程;修饰基片的氨基葡聚糖的相对分子质量和氨基摩尔比都影响免疫芯片对抗体响应灵敏度;平行测定20次的信号标准偏差小于5%,测定后芯片性能没有明显下降。     

光学免疫传感器中芯片的制备

为满足光学免疫传感器在环境监测和食品卫生检测领域中应用的要求,研究了一种免疫芯片制备方法,并用平面波导型荧光免疫传感器对免疫芯片的性能进行了评价。该方法可以将小分子物质固定到玻璃基底上。试验结果表明:该芯片能够有效抑制蛋白质的非特异性吸附,并对目标物质抗体的响应符合Logistic方程;修饰基片的氨基葡聚糖的相对分子质量和氨基摩尔比都影响免疫芯片对抗体响应灵敏度;平行测定20次的信号标准偏差小于5%,测定后芯片性能没有明显下降。     

2,4-二氯苯氧乙酸在线免疫传感器监测技术的应用研究

针对水中存在的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D),采用在线免疫传感器进行监测,实验结果表明:2,4-D在线免疫传感器对2,4-D质量浓度的响应符合Logistic曲线方程,在10~200μg/L的范围内,在线免疫传感器的信号响应符合半对数线性方程.免疫芯片存在一定的记忆效应. 48组测定比对实验表明,在线免疫传感器的测定误差小于人工测定误差,2,4-D在线免疫传感器可用于西江水的监测,运行稳定,信号可靠,为实现水环境有毒有害有机物的在线监测预警提供了一种新的技术解决方案.     

基于蛋白A定向固定抗体的触珠蛋白压电免疫传感器的研究

用蛋白A-金电极法将触珠蛋白抗体固定在9MHz镀金石英晶体比表面,研制了一种简单、灵敏的压电免疫传感器,用于溶血性贫血与严重肝病标志物一触珠蛋白的高特异性检测．比较了传感器采用直接金电极吸附法、牛血清白蛋白吸附-戊二醛交联法和蛋白A法三种固定抗体的方法．研究了蛋白A的定向自组装、抗体的固定化浓度和免疫反应时间等主要因素对免疫传感检测灵敏度的影响,并考察了传感器响应与再生性能．测得该免疫传感器检测人血清中触珠蛋白的线性浓度范围为1．27-31．7mg／L．     

噬菌体展示蛋白质芯片的无标记检测

为获得丰富的特异识别分子和实现无标记、高灵敏度检测,利用噬菌体展示技术,选择在pⅢ蛋白上展示12肽的噬菌体M13作探针,采用羧基-氨基共价耦联法制备噬菌体展示蛋白质芯片.在此基础上,与表面等离子体共振传感技术结合,使用Biacore3000仪器,检测噬菌体展示蛋白质芯片与特异性抗体的反应,测定反应动力学常数.实验结果表明:当抗体浓度为0.4 μmol·L-1时,响应信号可达365±8个单位;不同浓度的抗体与芯片反应的数据较好地与S型曲线吻合.该方法可望用于噬菌体展示蛋白质芯片的检测.     

采用抗体包被纳米金多层自组装膜的HCG安培免疫传感器

研制了一种采用人绒毛膜促性腺激素抗体(anti-HCG)包被巯基丁二酰胺(HL)/纳米金(AuNPs)多层膜修饰金电极的免疫传感器(AU |{HL/AuNPs}n-anti-HCG),用于检测人唾液中的HCG.通过层层自组装技术在Au电极表面交替修饰多层{HL/AuNPs}n膜,再通过膜内的AuNPs吸附anti-HCG,构筑了HCG安培免疫传感器.以K3Fe(CN)6为探针,在pH 7.0的PBS缓冲液中加入HCG,随着HCG与电极表面anti-HCG发生特异性免疫反应,形成的抗原/抗体免疫复合物使得K3Fe(CN)6在电极表面的响应电流减小,减小量(Ip)与膜表面的免疫反应程度相关,以此作为HCG定量的依据.对各修饰电极表面进行了表征和定量分析.实验表明:该免疫传感电极中{HL/AuNPs}n膜内存在的大量AuNPs显著增加了anti-HCG吸附量,从而使得其HCG检测范围变宽(0.1～100 mg/L),检出下限为0.056 mg/L(3σ).     

2,4-二氯苯氧乙酸分子印迹聚合物的制备及识别特性

以2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)为模板分子,α-甲基丙烯酸(MAA)为功能单体,偶氮二异丁腈(AIBN)为引发剂,乙二醇二甲基丙烯酸酯(EDMA)为交联剂,制备了有特异性识别2,4-D功能的分子印迹聚合物.用紫外分光光度法对印迹聚合物的吸附性能进行了研究,并用高效液相色谱法对印迹聚合物的选择性进行了考察.用Scatchard法分析表明,该分子印迹聚合物通过氢键作用力结合,对2,4-D的最大表观吸附量Qmax为69.7μmol.g-1,平衡离解常数Kd为9.96×10-3mol.L-1.HPLC实验表明,与2,4-D结构类似的分子相比,印迹聚合物对2,4-D显示了很好的选择性.     

珍珠岩的表面改性及吸附性能研究

以珍珠岩尾砂为原料,3-氨基丙基三乙氧基硅烷(KH550)为改性剂对其表面进行修饰改性.研究其改性及吸附条件对2,4-二硝基苯肼去除率的影响.结果表明:改性后珍珠岩对2,4-二硝基苯肼的吸附能力是原来的2倍,去除率可达84%以上.     

不同功能化量子点与细胞的非特异性作用研究

选择COS-7细胞为研究对象,考察了不同功能化基团修饰的量子点(QDs)与细胞的非特异性相互作用.结果表明,氨基聚乙二醇衍生磷脂修饰的量子点(NH2-PEG-QDs)在COS-7细胞上有强烈的非特异性吸附,其次是羧基聚乙二醇衍生磷脂修饰的量子点(COOH-PEG-QDs),而甲基聚乙二醇衍生磷脂修饰的量子点(CH3-PEG-QD)在细胞上的非特异性吸附非常小,并且量子点与细胞的作用是一个依赖于量子点的浓度、表面电荷、培育时间与温度,并受培养基中血清影响的耗能过程.     

生物芯片研究现状及应用前景

生物芯片(Biochip)是以预先设计的方式将大量的生物讯息密码(寡核苷酸、cDNA、基因组DNA、蛋白质等)固定在玻片、硅片等固相载体上组成的密集分子阵列,可分为基因芯片、蛋白质芯片、芯片实验室三类。生物芯片技术的本质是生物信号的平行分析,它利用核酸分子杂交、蛋白分子亲和原理,通过荧光标记技术检测杂交或亲和与否,再经过计算机分析处理可迅速获得所需信息。在医学、分子生物学等领域,生物芯片技术以其高效、高信息量的优势,显现出巨大的应用价值和商业市场,其发展前景非常乐观。     

微生物基因芯片鉴定及再生利用

生物芯片提供一种重要的生物分子检测方法,在科研和医学应用领域被广泛关注。该文以大肠杆菌和黄单胞菌检测为例研究微生物的基因芯片鉴定方法和生物芯片的再生使用价值,采用一种自主研制的新型微阵列芯片扫描仪对微生物鉴定和生物芯片的重复利用开展理论与实验研究。结果表明,用基因芯片鉴定微生物是非常可靠的,所设计的生物分子探针与芯片表面修饰分子的结合很牢固,5次重复杂交清洗后依然可以产生良好的荧光信号,从而验证了再生芯片使用的可行性。为了提高生物芯片的重复使用次数,论文还对生物芯片的设计与荧光标记方法进行了分析讨论。     

微生物基因芯片鉴定及再生利用

生物芯片是一种重要的生物分子检测方法,在科研和医学应用领域被广泛关注。该文以大肠杆菌和黄单胞菌检测为例研究微生物的基因芯片鉴定方法和生物芯片的再生使用价值,采用一种自主研制的新型微阵列芯片扫描仪对微生物鉴定和生物芯片的重复利用开展理论与实验研究。结果表明基因芯片鉴定微生物是非常可靠的,所设计的生物分子探针与芯片表面修饰分子的结合很牢固,5次重复杂交清洗后依然可以产生良好的荧光信号,从而验证了再生芯片使用的可行性。为了提高生物芯片的重复使用次数,论文还对生物芯片的设计与荧光标记方法进行了分析讨论。     

基于磁性荧光双探针基础上的2,4-二氯苯氧乙酸残留的快速免疫检测体系的建立(英文)

建立了一个基于磁性荧光双探针基础上的免疫快速检测体系,以实现液相中快速检测食品中2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)残留.该体系将2,4-D抗体结合Fe3O4@SiO2-NH2得到的复合物作为磁性探针和固相载体,2,4-D-OVA被标记CdTe@SiO2-NH2作为荧光探针以产生荧光信号,通过荧光探针与磁性探针复合物与2,4-D抗体竞争结合实现免疫快速检测.探讨了荧光探针最佳优化条件,在p H值8.2,2,4-D-OVA加入量为500μL,偶联时间为70 min时,偶联得到的荧光信号最强,双探针检测后得到该检测体系最低检测限为3.55×10-8.得到金磁、量子点荧光双探针免疫系统,绘出标准曲线,得到最低检测限达3.55×10-8.该检测体系与传统ELISA方法相比,可以大大缩短检测时间,放大检测信号.     

用Verilog HDL开发生物芯片的探讨

为了降低生物芯片的制作成本，使其能批量生产，可采用一种优秀的硬件描述语言Verilong HDL进行开发．用Verilog HDL开发生物芯片，根据自身的设计思路形式化抽象表示电路的结构和行为能提高电路设计效率、缩短芯片制作周期、降低芯片的制作成本，并为大规模批量生产提供有利的条件，因此用Verilog HDL开发生物芯片具有良好的发展前景．     

皮燕麦胚性愈伤组织的形成及植株再生

本实验以皮燕麦２０７９ 成熟种子胚为外植体,其愈伤组织的诱导率最高,叶鞘愈伤组织诱导率为５ ％ ,叶片几乎不发生脱分化。在基本培养基比较中以改良Ｎ６ 培养基诱导效果为佳,愈伤组织出愈率在１－３ｍｇ／Ｌ,２ ,４—Ｄ浓度范围逐渐提高,继续增大时则出愈率降低。胚性愈伤组织形成率受脱分化培养基中２,４ —Ｄ浓度的影响。扫描电镜观察结果显示非胚性与胚性愈伤组织表面结构差异明显;组织切片表明形成的再生植株有胚胎发生与器官发生两种途径,形态上有区别。     

水杨醛改性壳聚糖对氯酚的吸附性能

 为了更有效解决有机污染物2,4-二氯酚对水资源污染的严重问题,对水杨醛改性壳聚糖的合成和改性壳聚糖吸附2,4-二氯酚的性能进行了研究,并对比了改性壳聚糖与未改性壳聚糖的吸附能力。介绍了改性壳聚糖的合成方法,对改性壳聚糖（CTS）产物的结构用红外光谱法进行表征,并利用紫外光谱法研究其对2,4-二氯苯酚的吸附性能。考察了pH值、时间、酚浓度等因素对吸附性能的影响。结果表明,经水杨醛改性后的壳聚糖对2,4-二氯苯酚具有更良好的吸附性能;改性壳聚糖在吸附时间2h以上,溶液pH值为5时的吸附效果最好;吸附符合Langmuir吸附等温方程;吸附动力学符合Lagergren二级吸附速率方程。