截短侧耳素产生菌的鉴定及发酵培养基初筛

对产截短侧耳素（pleuromutilin）的真菌P4-04进行形态学观察和ITS保守序列鉴定,初步鉴定P4-04可能属于担子菌纲斜盖菇属新种. 采用单因子实验对发酵培养基条件筛选. 优化结果显示,最佳碳源为果糖,浓度为5%,最佳氮源为2％的黄豆饼粉, FeSO4添加浓度为0.04%. 在此条件下获得的产量比原始条件提高73.1%.     

绣球菌原生质体制备及再生条件的初步研究

为进一步改善绣球菌栽培特性、提高栽培产量,对绣球菌原生质体制备与再生条件进行了初步探索.以绣球菌原生质体再生量为指标,对等渗剂、酶反应温度、pH和反应时间等影响因素进行了优化.结果表明,采用2%的溶壁酶溶解绣球菌菌丝细胞壁,制备原生质体的最佳条件是,以0.6 mol/L蔗糖为等渗剂,在30℃、pH值6.0环境下反应3 h.在此条件下,原生质体的再生量为11 850个/mL.     

谷氨酸产生菌原生质体的制备和再生

6株谷氨酸产生菌以甘氨酸、青霉素和溶菌酶不同组合处理,对其原生质体形成进行了比较,在最佳条件下,原生质体形成率可达95～100％。B9-15 菌株细胞形态特殊,表面呈凹陷状,仅在含1.5～2.0％甘氨酸的高渗培养液中就能形成原生质体,在加有壁制剂的丁二酸钠高渗培养基上,所试菌株的原生质体再生率从10.5％～61.8％,差异性较大。     

应用正交实验研究铜绿假单胞菌原生质体制备与再生

通过对铜绿假单胞菌原生质体制备与再生进行正交实验,探讨各因子对铜绿假单胞菌原生质体制备与再生影响水平,得到铜绿假单胞菌原生质体制备与再生的最优条件:酶解时间 0. 5h,酶浓度 2mg/L,菌龄为 15h 此时原生质体形成率为 80. 5%,再生率为 20. 6%     

维生素B＿2产生菌的原生质体制备及再生

用１．０％纤维素酶＋０．５％蜗牛酶的混合酶液酶解培养２６～３２小时的维生素Ｂ＿２产生菌阿氏假囊酵母（Ｅｒｅｍｏｔｈｅｃｉｕｍａｏｈｂｙｉｉ）菌丝体，可以得到大量原生质体，最佳酶解时间为１．５小时。原生质体再生率为０．３５％～０．６７％。阿氏假囊酵母在原生质体再生过程中具有较高的突变率，以维生素Ｂ＿２产量为指标的正突变率为１２．１４％。     

聚β羟基丁酸酯产生菌原生质体制备与再生条件研究

本论述对聚β羟基丁酸酯产生菌S-05的生理特性以及影响原生质体形成与再生的条件进行分析。结果表明：聚β羟基丁酸酯产生菌S-05在32℃,180r/min振荡培养9h后进入对数生长期;该菌株原生质体形成的合适条件为：培养12h的菌体用4mg/mL的溶菌酶在磷酸缓冲液（pH6.0）中37℃静止酶解2h,原生质体形成率与再生率达到最大值,分别为83.5%和20.3%。     

大球盖菇原生质体制备及紫外诱变

对大球盖菇（Stropharia rugoso-annulata）原生质体制备的条件进行了研究,并确定了最佳条件组合:选用15 g/L的纤维素酶+15 g/L的蜗牛酶的混合酶来酶解菌丝,0.6 mol/L的甘露醇作为渗透压稳定剂,菌龄为3d,酶解温度30℃,酶解时间2.5h,在此条件下制得的原生质体产量最高达1.70×...     

褐球固氮菌和荧光假单胞菌原生质体制备条件的研究

为了利用原生质体融合技术获得同时具备固氮、解磷、抑病等活性的多功能菌株,本文对褐球固氮菌A41和荧光假单胞菌P32原生质体的制备条件进行了研究。通过对菌龄、酶解温度、酶浓度、酶解时间等影响因素的正交实验确定了褐球固氮菌A41和假单胞菌P32原生质体制备的最佳条件。实验结果表明,固氮菌A41最佳制备条件为菌龄20h、酶解温度37℃、酶浓度3mg/mL、酶解时间45min;假单胞菌P32最佳制备条件为菌龄20h、酶解温度37℃、酶浓度2mg/mL、酶解时间30min。     

双孢蘑菇原生质体制备条件的优化

采用L16(45)正交分析方法,对双孢蘑菇原生质体制备工艺进行了优化.试验结果表明,最佳制备条件是取菌龄7 d的液体菌丝体,以2.5%溶壁酶 7%蜗牛酶为组合,0.6 mol/L NaCl作为渗透压稳定剂,在30℃条件下,酶解3 h,原生质体产率为2.34×108个/mL.本研究可为双孢蘑菇原生质体的融合及转基因研究提供理论依据.     

L-甲硫氨酸产生菌M0658原生质体形成及其再生条件的研究

以产L-甲硫氨酸芽孢杆菌M0658为出发菌株,考察了各种因素对原生质体形成和再生的影响．在原生质体形成和再生的最佳条件下,M0658原生质体形成率和再生率分别达到96．4％和75．3％,并在光学显微镜下观察了原生质体和原菌的形态差别．     

柱状田头菇原生质体制备条件的实验研究

对影响柱状田头菇菌株原生质体制备的条件进行了研究,这些条件包括不同的培养基、不同的温度、不同的pH、不同的酶解时间、不同的菌龄以及不同的渗透压稳定剂.结果表明:液体摇瓶振荡培养5 d的菌丝,以0.6 mol/L的甘露醇或MgSO4作为渗透压稳定剂,采用2%的真菌溶壁酶,在pH为6、温度为31℃的条件下酶解2 h,柱状田头菇菌株的原生质体制备率最高,可达到2.31×106个/mL.     

原生质体制备过程中各因素对酵母活力影响的研究

本实验以两株酵母菌为研究对象,通过正交设计,验证了原生质体制备过程中各因素对酵母细胞活力的影响.研究发现,在原生质体制备过程中渗透压稳定剂的种类、浓度对于原生质体的形成率和活力有着重要的影响.离子型的渗透压稳定剂如KCl可以提高细胞的形成率,而醇类稳定剂如山梨醇对于酶解后原生质体活力的保持有着较好的效果.     

衣康酸产生菌-土曲霉T-730原生质体的制备和再生

以衣康酸产生菌土曲霉T-730为供试菌株,研究了菌丝体培养方式、酶配比、菌丝的菌龄、酶解温度和时间、再生培养方法等因素对土曲霉原生质体形成和再生的影响．结果表明：采用液体静置培养12h～14h的菌丝体,在含有纤维素酶0．6％,蜗牛酶0．3%,溶菌酶0．1％的混合酶系统中,置35℃酶解3.5h,原生质体形成率最高;采用双层平板培养法于32℃再生,再生率达到70.6%     

柠檬酸生产菌Aspergillusniger的原生质体制备与再生

本文对柠檬酸生产菌ＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒＣｏ－８２７菌丝原生质体的制备和再生进行了研究。对影响原生质体游离与再生的诸因素，如酶配比、菌龄、渗透压稳定剂和酶解温度等进行了优化，并进行了原生质体的再生培养。     

洁霉素产生菌原生质体的形成、再生和融合

洁霉素产生菌不论生长在含有甘氨酸的S培养基或不含甘氨酸的S培养基的菌丝中,其细胞壁均可被溶菌酶溶解而释放出原生质体。甘氨酸浓度为1.0%破壁效果最好,溶菌酶的作用浓度以2.5mg/ml为最佳。原生质体在Hb培养基上能够很好地再生。用P培养基配制的40%(w/v)PEG1000溶液,能有效地诱导洁霉素产生菌原生质体融合。融合重组频率达6.7%。     

他克莫司产生菌原生质体制备、再生与诱变

对筑波链霉菌的原生质体制备、再生条件进行了研究,建立了筑波链霉菌的原生质体诱变筛选体系.在此基础上,通过原生质体的紫外诱变处理,筛选得到1株高产菌株,与出发菌株相比,该菌株的平均发酶单位提高51.4%.通过原生质体的紫外诱变来筛选他克莫司高产菌株是一种行之有效的方法.     

纳豆芽孢杆菌原生质体制备条件的研究

以纳豆芽孢杆菌ZJ-zx为出发菌株,利用溶菌酶进行原生质体制备,并对其制备条件进行了优化.结果表明:在溶菌酶质量浓度为0.6mg/mL、酶解时间为40min、酶解温度为35℃、渗透压稳定剂为0.7mol/L的条件下,制备原生质体的形成率为95.46%,再生率为15.83%,为下一步的诱变育种工作奠定了基础.     

正交设计法探讨茯苓原生质体的最佳制备条件

应用正交设计法研究了不同因素对茯苓原生质体制备的影响.实验结果表明，渗稳剂的种类和酶解时间对茯苓原生质体产量的影响最显著；培养5 d的菌丝体在30 mg/L溶壁酶＋20 mg/L蜗牛酶的酶液中，以0.6 mol/L的蔗糖作为渗稳剂，30℃酶解1 h，茯苓原生质体的产量最高.     

微生物絮凝剂产生菌的培养条件优化及其应用

采用正交试验法对微生物絮凝剂产生菌Bacillus subtilis B-3的发酵培养基进行优化.通过对实验结果的统计学分析,得到培养基最佳C源、N源、无机盐质量浓度比为10∶5∶1.在此基础上,对发酵条件进行优化,结果表明:该菌产絮凝剂的最佳培养温度为35℃,初始pH为8.0,转速为200 r/min,培养时间为16 h.用絮凝剂处理不同来源的污水,实验表明,该絮凝剂对南京炼油厂污水、校园生活污水以及南京金川河内污水均具有较好絮凝效果.     

碱性脂肪酶产生菌--扩展青霉K40原生质体的制备和再生

采用 0 .6%纤维素酶加 0 .6%蜗牛酶的混合酶由扩展青霉 K4 0中获得大量的原生质体 ,并比较了菌龄、二硫苏糖醇 ( DTT)预处理方式、酶解时间、温度、 p H、培养基成分及稳定剂等因素对原生质体的形成和再生的作用 .选出制备原生质体的最适条件 :0 .6%纤维素酶 +0 .6%蜗牛酶 ,在 0 .6mol/L Na Cl+0 .3 %Ca Cl2 ,DTT预处理 0 .5h,菌龄为 1 9～ 2 0 h,p H 5.4 ,2 8℃酶解 3～ 3 .5h,原生质体产量可达 2 .3 6× 1 0 7个/ml,实现再生 ,再生率达 70 %～ 80 % .并对原生质体的释放和再生方式进行跟踪观察