复方葛根汤诱导结肠癌HCT116细胞铁死亡分子机制研究

为探究复方葛根汤对结肠癌HCT116细胞增长作用及其分子机制,通过MTT法检测、克隆形成、形态学分析探讨复方葛根汤对HCT116细胞增长作用,以活性氧试剂盒检测、荧光显微成像及蛋白免疫印迹法探究其分子机制。研究结果显示,与溶媒对照组相比,复方葛根汤能显著抑制HCT116细胞增长能力,并呈浓度和时间依赖性,机制上能显著增加细胞内活性氧,显著上调铁死亡相关蛋白PTGS2、ACSL4蛋白的表达,及明显下调铁死亡相关蛋白GPX4表达,表明复方葛根汤可能通过诱导铁死亡机制抑制HCT116细胞增长。     

As4S4诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及相关分子机制研究

研究AS4S4对宫颈癌Hela细胞生长抑制厦诱导凋亡作用，并探讨可能的分子机制。以不同浓度的AS4S4分不同时间段处理Hela细胞，用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法测定细胞增殖抑制率；采用流式细胞术测定细胞凋亡；Western blotting测凋亡相关蛋白Bcl-2，Caspase3表达的变化。结果表明，经AS4S4处理的Hela细胞，增殖受到抑制，作用呈明显的时效和量效关系，细胞凋亡率明显增高并呈浓度依赖性；Western blotting示Bcl-2表达下降，Caspase3表达增加。因此，AS4S4对Hela细胞具有增殖抑制和诱导凋亡作用，其机制与下调Bcl-2蛋白、上调Caspase3蛋白表达有关。     

微囊藻毒素对鱼类胚胎发育毒性机制的研究进展

微囊藻毒素是富营养化水体中对水生生物繁殖和发育影响极大的一种细胞内毒素，它通过抑制蛋白磷酸酶的活性，打破细胞内蛋白磷酸化／去磷酸化的平衡，引起细胞损伤甚至坏死，从而影响鱼类胚胎的正常发育。本文就微囊藻毒素对鱼类胚胎发育的影响及其致毒的分子机制进行综述。     

茶氯香酰胺脂质体对人肝癌细胞生长和迁移的抑制作用

以茶氯香酰胺脂质体(TClC-L)为研究对象,研究其对人肝癌细胞(SMMC7721)生长和迁移的影响,并且探索其作用的分子机制,为研发抗肝癌新药提供科学依据.应用MTT法检测TClC-L对SMMC7721细胞生长的影响;应用划痕法和细胞流式分别检测TClC-L对SMMC7721细胞迁移和死亡的影响;应用Hoechst 33258染色检测SMMC7721细胞凋亡形态学变化;应用Western blotting技术检测TClC-L对SMMC7721细胞生长、凋亡和迁移密切相关蛋白表达的影响和其可能作用的分子机制.结果显示,TClC-L对SMMC7721细胞生长有显著的抑制作用,显示出剂量和时间的依赖性关系; TClC-L能够显著地降低SMMC7721细胞的迁移能力,促进其凋亡; TClC-L显著上调抑制肝癌细胞生长和诱导癌细胞凋亡的相关蛋白因子Bax、Caspase-3、PARP和迁移抑制因子E-cadherin蛋白的表达水平,下调促进细胞生长和迁移以及抗凋亡的相关蛋白因子Bcl-2、HGF、cMet、NF-κB、MMP9、VEGFR2、c-Myc蛋白的表达水平. TClC-L抑制人肝癌细胞SMMC7721的生长和迁移作用的分子机制涉及到HGF/c-Met/VEGFR-NF-κB信号通路.     

IRF3在绿脓杆菌感染时抑制中性粒细胞粘附的机制研究

干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3, IRF3)能抑制小鼠中性粒细胞的募集.为了研究其机制,分离小鼠骨髓中性粒细胞进行研究,发现在绿脓杆菌感染时IRF3抑制中性粒细胞的粘附.整合素是中性粒细胞执行功能的重要分子,IRF3能显著地抑制CD11b的表达.进行免疫印迹实验没有检测到Akt的Ser473和Thr308位点的磷酸化,但发现IRF3抑制Akt蛋白的表达.还发现Wortmannin显著地抑制中性粒细胞的粘附和CD11b的表达.由此确定,IRF3抑制中性粒细胞的粘附与整合素CD11b的表达密切相关,而Wortmannin是重要的抑制剂.可以推测,IRF3可能通过抑制Akt蛋白的稳定而调节中性粒细胞的功能.研究结果将为IRF3在绿脓杆菌感染时抑制中性粒细胞募集的分子机制研究指明方向.     

真核细胞基因转录抑制机制的研究

真核细胞的基因转录抑制受多方面的调节,目前的研究已经揭示了转录因子产生转录抑制的分子机制,蛋白之间的相互作用产生的转录抑制等几方面的作用机制.研究了全酶与基因的转录、染色质与真核基因转录抑制、干扰激活因子活性等,在真核细胞基因转录抑制中起的作用.     

驱动蛋白及其作用研究进展

驱动蛋白是一种非常重要的细胞内运输"货物"的分子马达,它沿着微管运动来行使其功能.介绍了驱动蛋白的结构、运动及物质运输机制、在精子发生过程中的功能以及在抑制癌症过程中的作用,并对驱动蛋白及其作用研究存在的问题进行了探讨,为今后更进一步深入研究和认识驱动蛋白提供有价值的新信息、新思路.     

白英总皂苷的抗炎作用及机制研究

利用脂多糖刺激RAW 264.7细胞(小鼠单核巨噬细胞系)产生的炎性反应，检测了白英总皂苷对RAW264.7细胞的TNF-α、MD2和TLR4蛋白表达的影响，探讨了白英总皂苷在炎性反应中的作用及分子机制.结果表明：白英总皂苷对RAW264.7细胞无毒性作用，但对TNF-α蛋白表达有抑制作用，且这一过程可通过抑制MD2和TLR4蛋白的表达实现.     

泛素样蛋白ISG15抗冠状病毒感染作用的研究进展（英文）

干扰素刺激基因15(ISG15,interferon-stimulated gene 15)是一种泛素样蛋白，在调节机体天然免疫和抗病毒感染过程中发挥重要作用。ISG15在针对流感病毒、乙型肝炎病毒、HIV病毒、埃博拉病毒、SARS病毒、中东呼吸综合征冠状病毒、巨细胞病毒等病毒的抗病毒研究已有文献报道。除此以外，最新的研究表明ISG15分子会在新型冠状病毒的木瓜蛋白酶样蛋白酶的作用下失活，从而抑制其抗病毒功能。因此抑制新型冠状病毒木瓜蛋白酶样蛋白酶，除能直接阻断病毒的生命周期、抑制病毒在体内的复制以外，同时也会提升ISG15分子水平，继而间接提升机体免疫能力，降低感染风险。该文介绍ISG15抗新冠病毒的过程，重点介绍ISG15抗冠状病毒作用的特异性，此外，总结新冠病毒通过木瓜蛋白酶样蛋白酶阻断ISG15介导的天然免疫实现免疫逃避的机制，并罗列了潜在的木瓜蛋白酶样蛋白酶的抑制剂。本文从ISG15抗病毒天然免疫的分子机制角度，总结抗SARS-CoV-2药物的最新进展，并对相关药物的研发前景进行展望。     

恩度对雌激素受体阳性的人乳腺癌细胞生长的抑制作用及其分子机制的研究

研究了重组人血管内皮抑素(恩度)对雌激素受体阳性的人乳腺癌MCF-7细胞株生长的抑制作用与其分子机制.采用MTT法、台盼蓝染色法和中性红染色法检测不同浓度恩度对MCF-7细胞生长的抑制作用,Hoechst33258荧光染色法和TUNEL分析法观察恩度诱导MCF-7细胞凋亡的形态变化,蛋白印迹法检测恩度作用的MCF-7细胞中与生长和凋亡相关蛋白的表达.结果表明,恩度显著性地抑制MCF-7细胞的生长并诱导细胞凋亡.此外,恩度显著性地减少MCF-7细胞VEGFR1,c-Met,ERα,Akt,NF-κB,Bcl-2和CyclinD1蛋白的表达,明显地上调Bax蛋白的表达,其作用的分子机制可能是通过抑制VEGFR1/c-Met/ERα-Akt-NF-κB信号传导通路,下调Bcl-2/Bax蛋白比率、降低CyclinD1蛋白的水平.     

A new method of research on molecular evolution of proteinase superfamily

The molecular evolutionary tree, also known as a phylogenetic tree, of the serine proteinase superfamily was constructed by means of structural alignment. Three-dimensional structures of proteins were aligned by the SSAP program of Orengo and Taylor to obtain evolutionary distances. The resulting evolutionary tree provides a topology graph that can reflect the evolution of structure and function of homology proteinase. Moreover, study on evolution of the serine proteinase superfamily can lead to better understanding of the relationship and evolutionary difference among proteins of the superfamily, and is of significance to protein engineering, molecular design and protein structure prediction. Structure alignment is one of the useful methods of research on molecular evolution of protein.     

林木与病原菌分子互作机制研究进展

近年来林木与病原菌互作的分子机制研究成果丰硕,尤其是HIGS与CRISPR/Cas9等技术的发展,促进了林木病原菌关键致病基因的功能、病原菌基因组与转录组学、病原菌效应蛋白、林木抗病基因功能、林木抗病与生长平衡、林木抗病分子育种等多个层面研究的快速发展.从植物-病原菌分子互作的基本问题出发,综述了国内外林木-病原菌分子...     

植物转化酶抑制子及其分子生物学的研究进展

综述了转化酶抑制子的生化特性、生理学功能、与转化酶的结合机制以及当前有关转化酶抑制子的分子生物学研究情况.     

光合细菌研究进展

光合细菌分布广泛,本身无毒,富含蛋白质、类胡萝卜素等多种营养物质,得到广泛应用。光合细菌的分子生物学研究已开展了40多年,在固碳和蛋白质表达系统研究方面取得了丰硕成果。阐述了光合细菌cbb操纵子固碳的分子机制和光合细菌作为新型蛋白质表达系统的研究进展,提出了未来的研究重点,为光合细菌的综合开发和利用提供了新思路。     

大草履虫总DNA的提取方法比较

快速而稳定地提取大草履虫的基因组DNA是进行后续分子生物学研究的前提.文章通过比较传统SDS法、CTABⅠ法和CTABⅡ法等提取大草履虫DNA的效果,进一步优化提取方法,获得快速稳定地提取大草履虫基因组DNA的方法.结果表明:用CTAB I法提取的DNA浓度低,杂质较多;CTABII提取的DNA电泳时检测不出条带;而SDS法提取的DNA在电泳时带型较整齐,无降解,且DNA的得率和纯度较高,但仍有蛋白质污染.针对蛋白质的去除,用SDS-蛋白酶K法和SDS-NaAc法来提取DNA,经过试验发现这2种方法都能够很好地去除蛋白质,所获DNA样品的纯度和得率都能用于进一步分子试验,而SDS-NaAc法更经济适用.     

植物医药基因工程研究进程

转基因植物是现代生产药用蛋白的一个廉价表达的,称为分子药用（molecular medicine farming)或医药工厂化农业（medicine factory faming),它已成为目前植物基因工程的研究热点,综述其研究进展及其独特的优势,提出进一步所要解决的问题,以利于该研究领域的深化。     

转基因植物研究中目标蛋白鉴定方法研究进展

随着分子生物学和基因工程的迅速发展,基因转化技术的应用日益广泛.转基因研究的关键不仅要确定目的基因的正确导入,还必须证明目的基因正确表达,并形成有功能的蛋白.因此,转基因研究中对目标蛋白质的鉴定必不可少.本文对转基因研究中目标蛋白的鉴定方法概括总结,并对其发展趋势及研究热点予以展望.     

研究生分子生物学综合实验设计──IMPACT蛋白单柱亲和纯化

设计了一个研究生分子生物学综合实验,利用内含肽介导的IMPACT系统对蛋白质进行纯化。将目的基因构建入pTWIN2载体,转化至大肠杆菌ER 2566中诱导其表达,进化亲和层析,检测其表达情况。该方法具备比以往亲和层析纯化方法更加经济的特点,可提高目的蛋白表达的成功率。通过本实验使学生掌握的分子生物学研究中最新的蛋白质分离纯化操作技术,为进一步学习和掌握复杂、综合性的分子生物学技术打下扎实的基础。     

绿脓杆菌外毒素A与Ⅱ型单纯疱疹病毒糖蛋白嵌合表达质粒的构建及其免疫原性的研究

构建外毒素结构域Ⅰ a基因(EPA103)与Ⅱ型单纯疱疹病毒糖蛋白(HSV-2-gD)嵌合蛋白表达载体(pET-EgD),得到嵌合表达蛋白.利用外毒素结构域Ⅰ a基因表达蛋白的佐剂效应,以pET-EgD表达嵌合蛋白免疫Balb/c小鼠.结果显示:嵌合表达蛋白(pET-EgD)免疫小鼠,可在小鼠体内诱导产生抗HSV-2特异性抗体.嵌合表达蛋白(pET-EgD)具有较强的免疫原性,为开发研究Ⅱ型单纯疱疹核酸疫苗奠定了基础.     

分子伴侣及其作用机理的研究概况

分子伴侣为一类与其他蛋白不稳定构象结合并使之稳定的蛋白质,广泛分布于各种生物体内。本文对分子伴侣的最新研究作一综述。