一种大量制备鼠源性多克隆抗体的方法

 用人绒毛膜促性腺激素或人免疫球蛋白作为抗原,经小剂量、多次免疫Balb/c鼠,并于其腹腔内注射NS-1骨髓瘤细胞,制备了大量高效价的鼠源性多克隆抗体腹水.该实验为快速制备大量鼠源性多克隆抗体提供了一种新的方法.     

用实验动物制备多克隆抗体I．免疫方案的优化

免疫实验动物诱导体液免疫和 /或细胞免疫的生成 ,是当前广泛采用的一种常规手段。许多研究人员需要用这种方法生产抗体。虽然多种动物可用于生产抗体 ,但生产多克隆抗体 (ｐＡｂｓ)和单克隆抗体 (ｍＡｂｓ)最常用的是家兔和小鼠。欧洲一些国家 ,非官方组织和研究所已经颁布了他们自己的标准化方案 ,例如注射的最大剂量、接种途径、接种次数。这些标准的目的在于确保用合适的免疫程序获得预期的免疫结果且不引起实验动物过度的不良反应。免疫方案的每一步骤都会产生较大影响。因此 ,仔细设计免疫方案十分重要。1993年 ,欧洲替代法验证中心 (…     

用实验动物制备多克隆抗体Ⅰ.免疫方案的优化

免疫实验动物诱导体液免疫和/或细胞免疫的生成,是当前广泛采用的一种常规手段.许多研究人员需要用这种方法生产抗体.     

谷胱甘肽转硫酶多克隆抗体的制备及应用

将含有谷胱甘肽转硫酶 ( GST)基因的 p GEX质粒转入大肠杆菌 TG1后 ,在 0 .5 mmol/L异丙基硫代 - β- D-半乳糖苷 ( IPTG)诱导培养下表达了 GST,用亲和纯化得到的 GST免疫新西兰大白兔 ,获得了滴度 ( ELISA)在 2× 1 0 5以上的抗血清 ,纯化后的抗体已成功地应用于两种新的融合蛋白 GST- FLP和 GST- Pre S1的免疫印迹检测和亲和层析法纯化     

三聚氰胺多克隆抗体的制备及鉴定

用三聚氰胺偶联蛋白为抗原,按不同的时间规律及抗原剂量对成年兔进行免疫,获得特异性的三聚氰胺多克隆抗体.效价检验应用蛋白质电泳和间接ELISA方法.应用10%及12.5% SDS-PAGE,验证血清中IgG抗体的产生情况,再用间接酶联免疫吸附试验测得第4次免疫后抗体效价达到1.2×107.此法易于实施,且获得的血清样品具有较高的效价,为今后三聚氰胺多克隆抗体的分离纯化提供了可靠的实验依据.     

小鼠肥大细胞蛋白酶4的原核表达和多克隆抗体制备

文章构建小鼠肥大细胞蛋白酶4（mMCP-4）原核表达体系,获得原核表达蛋白,并制备兔抗mMCP-4多克隆抗体,提取小鼠脾细胞总 RNA ,运用 RT-PCR技术获得目的基因 mMCP-4,构建重组原核表达载体pET28a-mMCP-4,将其转化到大肠杆菌BL21中诱导表达。mMCP-4融合蛋白经Ni亲和层析法纯化后,作为抗原免疫兔子获得mMCP-4多克隆抗体。采用ELISA法测抗体效价,western blot检测抗体特异性。结果表明,构建重组表达质粒pET28a-mMCP-4,经大规模原核表达获得大量mMCP-4融合蛋白,制备的兔抗血清效价达1∶128000,并表现出较好特异性。研究结果为进一步研究mMCP-4生物学功能奠定了基础。     

GGPPS多克隆抗体的制备与鉴定

构建人香叶基香叶基二磷酸合成酶基因(GGPPS)原核表达载体,制备兔抗人GGPPS多克隆抗体.利用DNA重组技术构建原核表达载体pGEX-4T-GGPPS,诱导表达GGPPS融合蛋白,分离纯化该融合蛋白后,作为免疫原免疫家兔制备多克隆抗体.成功构建了pGEX-4T-1-GGPPS原核表达载体,转化Rosetta菌株后可高效表达GGPPS融合蛋白,成功制备GGPPS多克隆抗体,间接ELISA法测定抗体效价为1∶32000,并且抗体具有良好特异性.成功克隆GGPPS基因并制备了特异性的兔抗人GGPPS多克隆抗体,为进一步研究GGPPS的功能奠定了基础.     

四种赤潮藻多克隆抗体的制备及特异性分析

为了建立4种赤潮藻（赤潮异弯藻（Heterosigma akashiwo）、海洋褐胞藻（Chattonella,marina）、卵圆褐胞藻（Chattonella ovata）、具齿原甲藻（Prorocenlnmz dentatum））的免疫学检测方法,分别用4种赤潮藻免疫Balb／C小鼠,制备针对4种不同赤潮藻的抗血清,间接ELISA检测其亲和性和特异性．结果显示,4种赤潮藻的抗血清对各自藻体均有良好的亲和力和特异性,交叉反应结果显示,抗血清与同种藻之间有较强的反应而异种赤潮藻之间交又反应较弱．表明单种藻免疫获得的小鼠多克隆抗体可特异性地与相应赤潮藻作用,可用于赤潮藻的免疫学检测分析．     

斑马鱼CFL基因的克隆、多克隆抗体的制备及分析

在心脏发育过程中,相关基因的正常表达是有功能心脏形成的关键．斑马鱼CFL基因是从斑马鱼胚胎的cDNA文库中克隆出来的一个心脏发育候选基因．生物信息学分析表明：CFL基因编码278个氨基酸,含有一个CXXC结构域．为进一步研究该基因的功能,采用生物信息学结合RT-PCR的方法获得了该基因．将所得片段插入原核表达载体pET-28a载体中,经测序鉴定正确后转化入Rosetta菌株中,用IPTG诱导表达出pET-28a－CFL融合蛋白,表达的融合蛋白占菌体总蛋白的71％,融合蛋白相对分子质量约为30kD．经包涵体纯化后,免疫新西兰大白兔制备了多克隆抗体．经验证,具有较好的特异性和较高的效价,可以用作western－blot免疫印迹等实验分析．     

碘化酪蛋白多克隆抗体的制备

碘化酪蛋白（Iodinated Casein）是一种蛋白同化类激素,为甲状腺素的前驱物质,具有类似甲状腺素的生理作用．2002年被农业部第176号公告列入禁止在饲料和动物饮用水中使用的药物．     

制备硬脂酸锑新方法

研究了以氧化锑、醋酸酐和硬脂酸为原料合成硬脂酸锑的新方法．本方法分２ 步反应进行：先合成醋酸锑，再利用醋酸锑合成硬脂酸锑．讨论了反应时间、反应温度、物料比对产率的影响；确定了制备硬脂酸锑的最佳工艺条件：反应温度为１４０ ℃，反应时间为４０ ｍｉｎ，物料比（ 氧化锑与硬脂酸的质量比）为０．１６∶１．与其它硬脂酸锑制备方法相比，本方法具有操作简单、成本低、产率高、无污染的特点．     

人小肠癌腹水转移细胞系HIC的建立及其生物学特征

建立了从人小肠癌腹水中分离培养的细胞系ＨＩＣ，目前已传３００余代，存活４２个月，并冻存３ａ余，单层培养细胞最短倍增时间１４ｈ，细胞具有未分化癌细胞特征，在裸鼠体内成瘤并具有非定点转移能力，该细胞系的染色体组型为亚三倍体，众数５３条。     

固载化聚乙二醇树脂合成新法

报导了在温和条件下用聚合物固载聚乙二醇的新方法,并讨论了各种因素(反应方式,催化剂、碱源等)对反应的影响.固载化聚乙二醇的结构用红外光谱鉴定.     

一种新的维生素C测定方法

测定维生素C的方法很多,常用的有:靛酚滴定法[1]、肼比色法[2]、分光光度法[3]、荧光法[4]、高效液相色谱法[5]等.滴定法和肼比色法操作复杂,费时费力.荧光法和高效液相色谱法需使用昂贵的仪器,运行成本高,选择性欠佳.本文用紫外分光光度法研究了VC与BT的反应条件.利用在碱性条件(pH=10.5),温度85℃时,VC将BT还原成蓝色化合物,其雖ax=609.9 nm.建立了测定VC的新方法,该方法简便、快速、重现性好,应用于黄瓜、番茄中VC的测定,结果与碘量法测定值对照,两者一致.     

制备K2SO4新方法的初步研究

本文利用热溶冷结晶原理，提供了一种制备Ｋ２ＳＯ４的新方法。     

胰高血糖素测定方法的新探讨

本文论述了作者经以Ｖｉｓｔａｒ大白鼠肝切片匀装为材料，用邻甲苯胺（Ｏ—ＴＢ测糖法测定胰高血糖素（Ｇｌ．）与其促使肝糖原分解生成的葡萄糖量（Ｇ．）之间的关系，总结并建立了一种简易、快速测定胰高血糖素的方法．