锯缘青蟹抗菌肽Scygonadin基因的转录表达特性研究

Scygonadin是从锯缘青蟹生殖系统分离获得的一种抗菌肽,我们用Dot-blot检测了该基因在锯缘青蟹幼体(溞状幼体和大眼幼体)和成体锯缘青蟹(雄性和雌性)的鳃、甲壳、眼、血细胞、肝胰脏、心脏、肌肉、甲壳下皮层、胃和生殖系统等10个不同组织器官中的转录表达情况.结果显示,该基因仅在雄性生殖系统中转录表达.进一步分析该基因在性成熟雄性锯缘青蟹和远洋梭子蟹生殖系统中不同部位(精巢、输精管、贮精囊和射精管)的转录表达情况,结果显示,Scygonadin基因主要在性成熟锯缘青蟹的射精管中转录表达.     

日本绒螯线粒体DNA序列研究Ⅱ.1.16rRNA

参考果蝇、卤虫与锯缘青蟹的线粒体ＤＮＡ １６ＳｒＲＮＡ基因序列进行了日本绒螯蟹相同基因片段的引物设计、ＰＣＲ扩增及序列测定,得到５６７ｂｐ的咸基序列,其Ａ、Ｔ、Ｇ、Ｃ含量分别为１９４ｂｐ（３４．２２％）、２１６ｂｐ（３８．１０％）、９８ｂｐ（１７．２８％）５９ｂｐ（１０．４１％）,与果蝇、卤虫及锯缘青蟹类的１６ＳｒＲＮＡ基因片序列含量相似。     

氨氮对锯缘青蟹的急性毒性和温度对其耗氧率、窒息点的影响

通过急性毒性实验确定了体重（43.5±2.13）g的锯缘青蟹24 h、48 h氨氮半致死浓度和安全浓度分别为179.99 mg/L、129.99 mg/L和20.34 mg/L。体重（20.8±1.55）g的锯缘青蟹24 h、48 h氨氮半致死浓度和安全浓度分别为175.55 mg/L、131.35 mg/L和20.06 mg/L。锯缘青蟹耗氧率随温度的而增大,在30℃左右达到最大值。体重为（31.6±2.23）g的青蟹,窒息点在15℃时最低为0.17 mg/L,25℃时最高为0.34 mg/L。     

锯缘青蟹感染副溶血弧菌后血淋巴中差异蛋白的初步研究

采用蛋白质组学技术对锯缘青蟹受细菌感染后血淋巴中蛋白表达变化的情况进行初步研究.试验中以未感染锯缘青蟹为对照,用密度为每毫升5.0×107个副溶血弧菌的菌液感染锯缘青蟹,于注射后18 h分别抽取活菌注射组、灭活菌注射组、空白对照组的锯缘青蟹的血淋巴,进行蛋白差异分析.结果发现,与对照相比,锯缘青蟹感染细菌后,血淋巴中出现1条明显差异条带.肽质量指纹图谱及生物信息分析表明,该蛋白为cryptocyanin,是血蓝蛋白基因家族中的重要成员,提示cryptocyanin与免疫反应有关.     

锯缘青蟹碱性磷酸酶活性功能团研究

应用化学修饰法结合酶的紫外吸收光谱及荧光发射光谱的变化研究锯缘青蟹碱性磷酸酶的功能基团性质，结果表明：色氨酸的吲哚基团、赖氨酸的ε－氨基、组氨酸咪唑基及精氨酸残基是酶活性必需基团，而巯基与酶活性无关．     

家蚕中一未知基因的生物信息学分析

对家蚕中一未知基因进行生物信息学分析,结果显示：该基因开放阅读框大小为858bp,编码285个氨基酸,预测分子量为31．1kD,等电点为4．75;该基因编码蛋白含有TPR（Tetratrico Peptide Repeat）结构域,具有个蛋白激酶C磷酸化位点、酪蛋白激酶II磷酸化位点、肉豆蔻酰基化位点、糖基化位点及cAMP和cGMP依赖蛋白激酶磷酸化功能位点。     

温度骤降对锯缘青蟹可溶性蛋白与可溶性糖含量的影响

锯缘青蟹是生活在河口海区的一种重要经济甲壳动物,其生活的环境温度经常发生温度的骤然增高或降低.本研究采用生物化学的方法对温度骤降后不同时间锯缘青蟹鳃,肝胰腺和肌肉中可溶性蛋白和可溶性糖含量进行测定.结果显示锯缘青蟹可溶性蛋白和可溶性糖含量在骤降温初期(2 h)升高,骤降温2 h后可溶性蛋白虽然呈现波动性变化,但最后出现明显下降;骤降温2 h后可溶性糖含量在鳃中逐渐下降,而在肝胰腺和肌肉中呈现波动性下降.实验结论为锯缘青蟹骤降温初期可溶性蛋白和可溶性糖增高是机体对寒冷应激的一种积极反应,后期下降是生理反应中物质和能量消耗所致.     

中国东南沿海青蟹属不同种类的mtDNA COI基因序列分析及其系统发育

对采自中国东南沿海青蟹属的4种青蟹锯缘青蟹Scylla serrata(Forskal,1775),紫螯青蟹S.tranquebarica(Fabricius,1798),榄绿青蟹S.olivacea(Herbst,1796),拟穴青蟹S.paramamosain(Estampador,1949)的线粒体COI基因片段进行了测定,分析研究了其种间遗传差异及系统发育关系.研究结果显示:4种青蟹在COI基因片段上存在差异,种间序列差异远大于种内差异.青蟹属在我国的优势种与GenBank上的S.paramamosain的遗传距离为0.001 3,与S.serrata的遗传距离为0.121 3.序列特征、遗传距离和系统进化等分析结果表明中国青蟹属的优势种为拟穴青蟹S.paramamosain.     

不同温度和盐度对锯缘青蟹抱卵的影响

1999～2004年分别在浙江温岭、三门和江苏通州等地进行锯缘青蟹生产性育苗，并结合生产实践，开展了不同温度、盐度等对锯缘青蟹抱卵的效果试验，结果表明：青蟹培育池水温15℃时，青蟹可以抱卵，25℃时抱卵情况最佳；盐度20．2时青蟹可抱卵，但优质抱卵率低，盐度升高会改善抱卵质量，25～30是青蟹抱卵的理想盐度。     

锯缘青蟹的无公害养殖技术

从养殖场地选择、养殖设施建造及清塘、蟹苗选择与放养密度、饲养管理方法、病害防治和商品蟹的收获方法几个方面阐述锯缘青蟹（Scylla serrata Forskal）的无公害养殖技术，为人工养殖青蟹提供参考。     

锯缘青蟹越冬温室的热环境试验研究

在冬季寒潮来临时,对锯缘青蟹越冬温室内外的气温、相对湿度、水温等与热环境相关联的因子进行昼夜连续测试,分析了它们的变化规律,旨在为锯缘青蟹越冬温室的管理提供科学依据.     

虾蟹亲体生殖生态学的研究

凡纳滨对虾、日本囊对虾和锯缘青蟹是我国海水养殖的重要种类.本文概述了作者近年来有关凡纳滨对虾、日本囊对虾和锯缘青蟹亲体生殖生态学方面的部分研究结果.     

锯缘青蟹肌肉组织坏死的病理研究

针对福建省龙海县土池人工养殖的锯缘青蟹发生肌肉浊白现象，开展肌肉组织病理学研究，发现病蟹的肌纤维断裂、肌细胞坏死溶解、细胞核萎缩和空泡变性、在肌肉组织中存在大量的20面体、大小约为150nm的球形病毒粒子，初步推断该病毒为锯缘青蟹肌肉坏死症的病原体。     

不同温度和盐度对锯缘青蟹抱卵的影响试验

1999～2004年分别在浙江温岭、三门和江苏通州等地进行锯缘青蟹生产性育苗,并结合生产实践,开展了不同温度、盐度等对锯缘青蟹抱卵的效果试验,结果表明:青蟹培育池水温15℃时,青蟹可以抱卵,25℃时抱卵情况最佳;盐度20.2时青蟹可抱卵,但优质抱卵率低,盐度升高会改善抱卵质量,25～30是青蟹抱卵的理想盐度.     

中国东南沿海锯缘青蟹群体的形态判别分析

测量了福建连江、浙江宁海、福建厦门、广东深圳、海南三亚、广西北海6个样地锯缘青蟹群体的23个形态特征值,用SYSTAT统计软件对这6个样地的锯缘青蟹群体进行聚类分析和判别分析,并建立了判别公式.聚类分析把宁海群体、连江群体、深圳群体、北海群体、三亚群体划为一组;厦门群体划为一组.判别分析可将6个锯缘青蟹群体完全分开,平均拟合概率为88.89%.其中连江群体、宁海群体、深圳群体、三亚群体、北海群体及厦门群体的判别准确率分别为90.5%、85.7%、90.5%、76.2%、90.5%及100%.6个锯缘青蟹群体的形态特征比率非常相似.     

拟穴青蟹HSP70基因的克隆与组织表达

热休克蛋白70(HSP70)是一种重要的功能蛋白.利用RACE和基因克隆等分子生物学技术,获得拟穴青蟹(Scylla paramamosain)HSP70全长cDNA序列,全长共2 189 bp,包括110 bp的5′UTR(untranslated regions)、126 bp的3′UTR和一个1 953 bp的开放阅读框(ORF).ORF可编码650个氨基酸残基,总分子质量约为71.2 ku,pI为5.38.同源蛋白的比较结果显示,拟穴青蟹HSP70序列与其他一些物种具有很高相似性,推测HSP70基因具有很高的遗传保守性,而基于HSP70氨基酸序列比对而绘制的系统树基本能够反映出各物种间的进化关系.以RT-PCR法检测雌性拟穴青蟹一些组织中的HSP70表达,结果显示各待测组织中均能扩增得到HSP70,说明HSP70在拟穴青蟹为组成型表达.其中,HSP70在卵巢中表达量最高,其次为脑神经节,推测这与HSP70作为分子伴侣的功能相关.     

锯缘青蟹(Scylla serrata)脑中FSH和LH的免疫识别

为研究甲壳动物卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)的存在与分布，我们应用免疫细胞化学技术对FSH和LH在锯缘青蟹(Scylla serrata)脑中的分布进行了定位研究.结果显示：在近成熟期雌蟹和精子细胞期雄蟹脑中检测到FSH中等免疫阳性反应和LH弱免疫阳性反应，免疫阳性细胞分布在前脑的前中胞体群和后脑的后侧胞体群.发育早期雌蟹和精原细胞期雄蟹未见FSH和LH免疫阳性反应.研究结果表明：FSH和LH存在于锯缘青蟹脑中并具有发育阶段特异性，可能参与性腺发育及精卵成熟的调节.     

锯缘青蟹SCYLLA SERRATA繁殖生态的初步研究

根据1989－1995七年期间对183尾锯缘青蟹实验室暂养产卵和浙南海区抱卵蟹调查的结果,总结出锯缘青蟹产卵的基本规律：产卵所需的环境条件为水温146℃以上,盐度30‰左右,底质以细砂、泥等易理栖软基为宜;性成熟年龄为一年以上,雌性生物学最小型为甲幅108mm;实验室产卵期为4月中旬至7月下旬,并行夜间产卵5怀卵量一般为2000000－3000000粒范围之内,怀卵量Q（×104pes）与甲幅L（mm）之间的关系为Q＝3．386L－196．32（r＝0．91）;在人工强化条件下培养,第一次产卵后只需40d左右时间,卵巢能再次发育成熟,进行第二次产卵。     

锯缘青蟹大颚器对精巢发育的调节作用:离体研究

器官联合培养表明,锯缘青蟹大颚器对精巢发育的调节作用主要表现为促进精母细胞期生精小管的生长和促进生精细胞的发育和精子成熟.随着锯缘青蟹大颚器的发育,其生物效应逐步增强.本研究首次证实了精巢组织是甲壳动物大颚器分泌物的靶器官.     

青蟹种间人工杂交技术建立及杂交子一代表型和遗传特征鉴定

杂交育种是改良动植物经济性状的有效手段,因杂种子一代具有明显的杂种优势,故被广泛应用于生产实践中.本研究以拟穴青蟹和锯缘青蟹为亲本,建立了种间人工杂交技术,包括:拟穴青蟹和锯缘青蟹候选亲本挑选和暂养、雌雄亲本人工定向交配、受孕母本营养强化和抱卵蟹培育、人工育苗培育杂交子一代苗种.同时,采用肉眼和显微观察技术鉴定了杂交子...