应用TD—PCR技术和限制性内切酶技术鉴定猴B病毒

从DNA水平上鉴定猴B病毒，并区别人单纯疱疹病毒(HSV-1)；用PCR技术对猴B病毒和HSV-1进行扩增，并用限制性内切酶技术对扩增产物进行酶切，对PCR扩增产物和酶切产物进行电泳；电泳结果显示猴B病毒和HSV-1的PCR扩增产物为128bp，酶切后，B病毒能产生72bp和56bp片段，而HSV-1不能产生酶切产物；该方法能较好地鉴定猴B病毒，同时也将有密切抗原关系的HSV-l区分开来。     

优化的热启动PCR—限制性酶切法检测冠心病患者？…

改进传统的载脂蛋白Ｅ基因多态性检测方法，建立热启动聚合酶链反应－限制性片段长度多态性检测分析方法。方法：应用热启动ＰＣＲ－限制性内切酶酶切－聚丙烯酰胺凝胶电泳－固定银染法测定１５８例冠心病患者和１１６例正常对照者的ＡｐｏＥ基因型。     

限制性内切酶介导的整合技术

限制性内切酶介导的整合技术是近年发展起来的一种研究基因的新方法,与质粒拯救相结合,可快速分离质粒两侧的DNA序列,进而对该序列做进一步分析和研究．该技术已应用于基因突变、基因标记、寻找新基因等研究领域．本文重点介绍了限制性内切酶介导的整合技术的原理、影响因素及应用现状．     

绿头鸭mtDNA限制性内切酶酶切分析

采用碱变性法制备绿头鸭肝细胞ｍｔＤＮＡ，经纯化后测其分子量为１６．７ｋｂ．用限制性内切酶进行酶切分析，结果表明ＢａｍＨⅠ、ｐｓｔⅠ和ＨｉｎｄⅢ在绿卖鸭ｎｔＤＮＡ分子上分别有４个、２个和３个酶切位点。与由番鸭、北京鸭和建昌鸭肝细胞ｍｔＤＮＡ为材料所得的研究结果比较，发现绿头鸭与番鸭及家鸭在ｍｔＤＮＡ种质方面存在着高度差异。     

应用TD-PCR技术和限制性内切酶技术鉴定猴B病毒

从DNA水平上鉴定猴B病毒,并区别人单纯疱疹病毒(HSV-1);用PCR技术对猴B病毒和HSV-1进行扩增,并用限制性内切酶技术对扩增产物进行酶切,对PCR扩增产物和酶切产物进行电泳;电泳结果显示猴B病毒和HSV-1的PCR扩增产物为128 bp,酶切后,B病毒能产生72 bp和56 bp片段,而HSV-1不能产生酶切产物;该方法能较好地鉴定猴B病毒,同时也将有密切抗原关系的HSV-1区分开来.     

四种昆虫病毒基因组DNA限制性内切酶图谱分析

应用限制性内切酶图谱分析,结果ＤＮＡ单分子层和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交方法,对黄地老虎颗粒体病毒,甘兰菜粉蝶颗粒体病毒,三叶草夜蛾颗粒体病毒和荨麻蛱蝶核型多角体病毒等四种杆状病毒提取基因组ＤＮＡ用９处限制性内切酶酶切,得到不同的酶切图谱使其在基因型上进行区分,通过ＤＮＡ单分子展层发现其核酸链都呈闭环和超螺旋构型,用＾３２Ｐ标记ＡｕＮＰＶ与ＧＶ杂交,没有发现与ＧＶ的同源性。     

利用限制性内切酶技术获得木霉菌插入变异

利用限制性内切酶介导整合（REMI）技术,通过插入线性化质粒DNA获得了生物防治番茄灰霉病（Botrytis cinerea）效果优于初发菌Trichoderma viride T21菌株（初发菌）的3个变异株Ttrm31、Ttrm34和Ttrm55．变异株本身产生的和诱导番茄植株产生的几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶的活性均比初发菌高,因此,通过REMI技术可以获得新的有益变异株,在一定程度上提高了生物菌株防治番茄灰霉病的水平,尤其是提高诱导番茄抗病水平．对侵染花器和叶片的灰霉病防效分别比原生物防治木霉菌株提高了16．9％和89／6,说明REMI技术可以用于改良生防木霉菌株的功能,提高生物防治效果．     

鳙鱼线粒体DNA的限制性内切酶图谱

用１１种限制性内切酶分析鳙鱼的线粒体ＤＮＡ，构建了全部１１种酶２２个切点的物理图谱，鳙鱼线粒体ＤＮＡ的分子大小约为１６．４４ｋｂ。酶切位点的分布是非随机的。     

蓖麻蚕蛹mtDNA的限制性内切酶图谱

采用碱变性法制备蓖麻蚕蛹ｍｔＤＮＡ，经九种限制性内切酶单酶和双酶酶解后，琼脂糖凝胶电泳检测酶切位点数和酶切片段长度。根据片段的大小确定消失片段与新生片段关系，通过对片段重叠、拼接、判断各片段邻近位置，从而构建了９种限制性内切酶、共２４个酶切位点蓖麻蚕蛹ｍｔＤＮＡ酶切图谱。     

两步亲和层析纯化限制性核酸内切酶Bsp 63Ⅰ

以Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐｈａｅｒｉｃｕｓ６３为材料,采用ＤＮＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ和ＣｉｂａｃｒｏｎＢｌｕｅＦ３ＧＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ两步亲和层析,分离纯化得到电泳均一纯限制性核酸内切酶Ｂｓｐ６３Ⅰ。酶的得率约为１３０单位／ｇ湿菌,比活力高达６１４００单位／ｍｇ蛋白。还报道了ＤＮＡ－Ｓｐｅｈａｒｏｓｅ４Ｂ两种亲和吸附剂制作方法的改进。     

澳洲鳗、日本鳗和欧洲鳗的RAPD初步比较分析

运用RAPD技术,以日本鳗Anguilla japonicus、欧洲鳗Anguilla anguilla和澳洲鳗Anguilla australia尾鳍DNA作为模板,在20种随机引物中筛选出4种随机引物进行扩增反应,得到这3种鳗鱼DNA的RAPD扩增片段,通过比较这3种鳗鱼的扩增条带的特异性、种间相似性指数(日本鳗和欧洲鳗之间的相似指数为0.556 5,日本鳗和澳洲鳗、欧洲鳗和澳洲鳗的相似指数分别为0.510 2和0.5278)和遗传距离,探讨这3种鳗鱼的遗传差异,为鳗鱼的种质鉴定奠定基础。     

木通属植物的RAPD研究

以木通属4个种的12个材料为研究对象,用RAPD技术对其进行亲缘关系分析,建立适合木通属植物的RAPD-PCR反应体系,从40个随机引物(10mer)中筛选出5个,对所有供试材料进行扩增,共获得5张DNA指纹图谱,共在52个位点上扩增出条带,平均每个引物扩增10.4个,多态位点43个,占总带数的82.7%. 指纹图谱的直观分析结果表明,1.七叶木通与三叶木通,白木通,五叶木通亲缘关系较远;2.白木通是三叶木通的一个变种, 与其有较近的亲缘关系;3.三叶木通的遗传多样性在湖南、湖北两省的分布上存在的差异很小.     

具有时滞的三种群Lotka-Volterra竞争模型分析

考虑了具有时滞和周期系数的三种群Lotka-Volterra竞争模型,得到唯一存在全局渐近稳定周期解的条件.     

具有密度制约的两种群食物链模型的稳定性

讨论了一个具有密度制约的两种群食物链模型解的整体存在性和一致有界性,并应用线性化方法和Lyapunov函数方法分析了该模型非负平衡点的局部渐近稳定性和全局渐近稳定性.     

一类具混合功能反应函数的三种群捕食链模型分析

提出并研究了一类具有脉冲干扰和混合功能反应的三种群捕食链模型.得到系统存在半平凡周期解.通过脉冲微分方程的Floquet理论和小幅扰动方法,研究了半平凡周期解的局部稳定性.证明了系统所有解是一致最终有界的.最后给出了数值分析实例.     

侵染薇甘菊的菟丝子属植物及其分类学鉴定

20 0 0年在粤东调查时发现菟丝子CuscutachinensisLam 侵染薇甘菊MikaniamicranthaH B K ;2 0 0 1年又发现南方菟丝子CuscutaaustralisR Br 及田野菟丝子CuscutacampestrisYunker均侵染薇甘菊 ,尤以田野菟丝子能使薇甘菊大片死亡。讨论了几种菟丝子侵染薇甘菊的发现及其分类鉴定特征。     

蚶科三种贝类ITS2核苷酸序列分析

对蚶科三种贝类ITS2进行PCR扩增、测序及分析,用Mega3.1软件进行了系统发育初步分析.结果显示:毛蚶、泥蚶和魁蚶的ITS2大小分别为284～288bp、380bp、413～417bp,三种蚶的445个序列比对位点中,共有172个保守位点,245个变异位点,166个简约信息位点,78个单突变位点.系统发育分析结果显示,毛蚶和泥蚶先聚为一支,而后与魁蚶聚在一起.ITS2分析结果显示毛蚶和泥蚶种间的遗传关系较近.     

一类三种群生态模型的同伦分析解法

利用同伦分析方法,研究了一类三种群生态模型,得到了该模型的近似解.为了检验该方法的有效性,通过实例,将近似解与数值解作了比较.比较结果表明,该方法用于研究三种群生态模型可行.     

3种解放钟干型枇杷酒香气成分分析

采用顶空固相微萃取技术,结合气质联用对3种不同产地的解放钟干型枇杷酒的香气成分进行检测分析.结果表明,3种不同产地的解放钟干型枇杷酒均含有苯乙醇、异丁醇、丁二酸二乙酯、苯甲酸乙酯等,同时还含有少量的乳酸乙酯、苯乙酸乙酯、山梨酸等.不同产地枇杷酒香气成分的种类及相对含量存在一定的差异:A型枇杷酒中含量相对较高的有甲酸异戊酯、乙酸乙酯、己酸乙酯等;B型枇杷酒中的特征性香气成分包括庚酸丁酯、癸酸乙酯、正己醇等;C型枇杷酒含有辛酸乙酯、甲氧乙酸戊酯、糠醇等.香气成分的差异赋予了解放钟干型枇杷酒独特的风味及口感.