蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)HDYM-02对亚麻生物脱胶沤麻液的理化性质及酶活作用研究

以分离自亚麻温水沤麻液中的蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)HDYM-02为出发菌株,探究沤麻液的理化性质以及一系列脱胶酶的活性,进行了亚麻加菌生物脱胶研究。结果表明,加菌组中的细菌总数始终大于对照组,pH值整体低于对照组。与对照组相比,加菌组果胶酶和果胶裂解酶活性都有所提高,最大值分别为200.1±4.9和366.1±3.1 U·mL~(-1)。相对对照组,加菌组多聚半乳糖醛酸酶、β-甘露聚糖酶和木聚糖酶活性都有所提高,半乳糖醛酸的含量也比对照组含量提高了31%。B.cereus HDYM-02能够提高体系中脱胶酶的酶活,且脱胶周期缩短了24 h。     

沤麻用果胶酶产生菌的选育及脱胶过程中细菌种群的初步分析

由沤麻液中分离并选育得到两株果胶酶产生菌,分别命名为HDYM-01和HDYM-02。采用形态观察、生理生化特征及16SrDNA等方法进行鉴定,确定HDYM-01为霍氏肠杆菌(Enterobacter hormacchei),HDYM-02为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)。通过对沤麻过程中的微生物多样性的研究,确定了在沤麻过程中兼性厌氧菌起主要作用,在沤麻过程中可培养的兼性厌氧菌数最多,可达7.3×107cfu·mL-1。而对沤麻过程中优势菌群的分析可知,假单胞菌属是优势菌属。     

微生物快速脱胶法在温水沤麻中的应用研究

以果胶酶产生菌HDYM-01和HDYM-02为出发菌株,经扩大培养后加入到沤麻池中进行温水沤麻试验。试验结果表明加菌沤麻工艺出麻率较正常沤制高,进行F检验证明差异极显著。利用加菌沤麻所得沤麻水进行回用沤麻试验,结果表明加菌沤麻水回用工艺出麻率较正常沤制高,经F检验差异显著。两项工艺均可使沤麻时间缩短24h,提高强度20～30N(牛顿)。     

沤麻系统中一株甘露聚糖酶产生菌产酶条件的优化

从实验室温水沤麻液中分离到了一株产甘露聚糖酶(mannanase)的芽孢杆菌HDYM-03菌株,经生理生化试验及16S rDNA序列分析鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis).研究了菌株72 h连续发酵过程中产酶及生长的动态变化,通过单因素及正交实验优化得到其实验室最优产酶条件为:碳源6%魔芋粉,氮源3%蛋白胨,初始pH值8.0,装液量100 mL/250 mL三角瓶,接种量2%,37℃振荡培养48 h.在研究条件下发酵液酶活力为5 122 U/mL,比优化前提高了2.1倍.     

木质素降解菌株产木质素降解酶的研究

采用液体静止培养,通过对分离筛选获得的两株高效木质素降解菌株15 -1和14 -7的发酵产木质素酶条件进行优化,得出结论:两株菌的最佳碳源均为稻草,最佳氮源均为尿素,最佳温度均为30℃.在最佳培养条件下进行发酵产酶,测得14 -7的木素过氧化物酶和锰过氧化物酶活力分别为0.350 U· mL-1和0.080 U· mL...     

油菜防御酶系对芸薹根肿菌毒素诱导的响应

为探讨油菜防御酶系对芸薹根肿菌毒素诱导的响应,分别用不同体积分数(10%,25%,50%,85%,100%)的芸薹根肿菌粗毒素处理油菜幼苗,测定其对油菜叶片内过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的影响.结果表明,经毒素处理一定时间,POD、SOD和PPO活性均有不同程度提高,且高浓度毒素处理的酶活呈先升后降的趋势;其中POD活性在48 h时达到最大值,为对照的4.20倍;SOD和PPO活性均在72 h时达到最大值,分别为对照的1.83和7.00倍;CAT和PAL活性呈先降后升的趋势,二者均在72 h时出现活性最高峰,分别为对照的3.52和6.75倍.本试验表明,根肿菌粗毒素可诱导提高油菜叶片5种防御酶活性抵抗毒素的侵害.     

木聚糖酶产生菌固体发酵条件的初步研究

木聚糖酶产生菌 (Aspergillusniger) 1 - 1 3菌株以白酒丢糟作为碳源进行固体发酵生产木聚糖酶 .采用单因素搜索对其最适产酶的氮源和发酵条件进行优化 ,结果表明 :添加的最适氮源为硫酸铵 ,最适加入量为 1 6% (以白酒糟干质量计 ) ;最适产酶发酵条件 :温度为 30℃ ,初始含水量为 5 5 % ,接种量为 1mL菌悬液 (浓度为 7× 1 0 7个 /mL)接种到 1 0 g固体培养基中 .在此优化条件下培养 72h ,木聚糖酶活力可达最高为 370IU/ g酒糟粉     

两株水胺硫磷降解菌的分离与鉴定

从污泥中分离出两株降解水胺硫磷的细菌,编号为HDNJ-1和HDNJ-3;两者在琼脂平板培养时对40%水胺硫磷乳油的最大耐受浓度分别为14%和12%;液体培养96 h后两株菌对水胺硫磷的降解率分别为67%和74%;根据两株菌的培养特征和生理生化特征初步鉴定为沙雷铁氏菌属(Serratia)和假单胞菌属(Pseudomonas)细菌.     

动力学光度法测定水中痕量氟

利用氟离子对H_2O_2—Fe(Ⅲ)—二苯胺磺酸钠催化反应体系的抑制作用,提出了一种测定痕量氟的动力学方法.在F~-含量为0～0.95μg·mL~(-1)范围内,1g(Am/Ai)(Am,Ai分别为非抑制反应和抑制反应体系的吸光度)与F~-离子浓度呈线性变化关系;表观摩尔吸光系数ε_(390)=4.25×10~5,方法灵敏度为0.019μg·mL~(-1).用本法测定了废水和自来水中的氟含量,结果良好.     

嗜酸氧化亚铁硫杆菌培养及其影响因素

研究了温度、pH值、溶氧量(以转速表征)、金属离子浓度等因素对氧化亚铁硫杆菌的生长状况及体内ATP酶活力的影响,确定了最适的培养条件.通过对比培养前与培养后微生物扫描电镜(SEM),探讨环境胁迫对微生物表面形貌和菌体生长的影响.结果表明,初始pH 2.0,温度30℃,转速150r/min,氧化亚铁硫杆菌培养60h,酶的活性较高,其中最大值为2.8U/mL,金属离子Zn2+、Cu2+、Mg2+会降低微生物ATP酶的活性,当Zn2+浓度小于0.03mol/L,Cu2+浓度小于0.08mol/L,Mg2+浓度小于0.04mol/L时,对微生物的抑制作用不明显.初始pH=2.0,温度30℃,转速150r/min,培养嗜酸氧化亚铁硫杆菌,与对照菌株相比,菌体形状大小没有明显变化,菌体数量显著增加,菌体表面有生物膜形成.     

一株蜡样芽孢杆菌对麦麸降解作用的研究

通过测定发酵过程中发酵液的纤维素酶、半纤维素酶活、可溶性总糖和还原糖浓度以及底物残渣重、残渣结晶度、傅立叶红外光谱和表面结构的变化来研究蜡样芽孢杆菌(Bacillus sp.X10-1-2)对麦麸的降解作用。结果发现:菌体产酶的同时进行木质纤维素的降解和糖化,发酵液中纤维素酶和半纤维素酶的活性分别于菌株培养到第12h和48h达到最大,总糖和还原糖含量分别于4h和12h达到最高值,降解5d后麦麸的结晶度未发生明显变化。通过分析底物残渣的傅立叶红外光谱可知,此菌株对麦麸的降解以半纤维素为主。麦麸中木质纤维素的各主要成分纤维素、半纤维素和木质素的降解率分别为2.72%、25.61%和1.09%。利用扫描电镜观察麦麸降解5d后的残渣,可观察到,Bacillus sp.X10-1-2主要降解了底物内表面蜂巢结构的边缘骨架。     

嗜热硫氧化硫化杆菌一新菌株的分离与鉴定

从云南腾冲酸性热泉富集物中分离到一株适度嗜热喜酸菌YN22.该菌革兰氏染色阳性,直杆状或微弯,长约1.6~2.8μm,直径0.4~0.7μm.该菌能在25~60℃下生长,最适生长温度为53℃;生长pH为1.0~5.0,最适pH为1.5;化能自养型,0.025%(w/V)的酵母提取物对其生长有明显的促进作用,在酵母提取物存在的情况下能快速氧化Fe2 ,但对S0和还原型硫化物的氧化能力较低.16s rDNA系统发育分析表明,该菌与嗜热硫氧化硫化杆菌(Sulfobacillus thermosulfidooxidans)的16s rDNA序列相似性达99%.YN22基因组DNA的G C含量为47.3 mol%,与嗜热硫氧化硫化杆菌模式菌株VKM B-1 269非常接近,后者基因组DNA的G C含量为47.5 mol%.基于形态特征、生理生化特性、系统发育学和G C含量的分析结果,YN22应归于硫化杆菌属(Sulfobacillus),为嗜热硫氧化硫化杆菌(Sb.thermosulfidooxidans)的一新菌株.这是国内首次分离,并经多种方法鉴定、确认的嗜热硫氧化硫化杆菌,从而为我国浸矿微生物的基础和应用研究提供了最典型的适度嗜热菌种.     

好氧颗粒污泥的驯化及其对含四环素模拟废水的除污染效能

在序批式反应器(SBR)中驯化好氧颗粒污泥(AGS),研究不同剪切力对其形态及性能的影响。在剪切力为1. 86 cm·s~(-1)时,可驯化出成熟且形貌好的AGS,其生物量和沉降性能最好,MLSS和SVI值分别达到6. 0 g·L~(-1)和35 m L·g~(-1)。在优化选定的剪切力条件下,考察驯化好的AGS处理含四环素的模拟畜禽养殖废水的除污染效果,结果表明,驯化后的颗粒污泥对四环素的去除效果明显,去除率从运行初期的74%左右逐渐上升,在第35 d达到稳定,约为90%,而对COD、NH_4~+-N和TP等常规污染指标的去除率分别为98. 56%、86. 14%和93. 58%,与不含四环素废水的对照处理效果相当。采用16S rDNA宏基因组高通量测序技术,对比分析不同运行阶段颗粒污泥样品中微生物的群落结构,结果显示,四环素的去除与AGS中的优势菌种密不可分,包括Comamonas、Flavobacterium、Lactococcus、Shinella、Actinotignum等可能利用四环素作为碳源的优势菌属。     

槲皮素对脂多糖诱导人脑微血管内皮细胞的作用机制

为研究槲皮素对脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导人脑微血管内皮细胞(Human brain microvascular endothelial cell,HBMEC)的作用机制,体外培养HBMEC,用LPS诱导HBMEC造模,将细胞分为正常组、模型组、槲皮素组及依达拉奉组,采用噻唑蓝法检测LPS诱导炎症因子变化的时间和槲皮素对HBMEC增殖能力的影响,用实时定量PCR法检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α) mRNA、趋化因子C—C基元配体20(chemokine C—C motif ligand 20,CCL20) mRNA和白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8) mRNA的表达,用酶联免疫吸附法检测TNF-α,CCL20和IL-8的含量,用蛋白免疫印迹法检测p-NF-ΚB p65,NF-ΚB p65,p-IKKα和IKKα的蛋白表达。结果发现,与正常组比,1 mg·L-1的LPS组细胞活力明显下降(P0.01);模型8 h组TNF-αmRNA,CCL20mRNA,IL-8 mRNA表达显著上升(P0.01);槲皮素各给药组(12.5,25,50,100,200,400μmol·L-1)细胞活力变化不明显。与模型组相比,200μmol·L-1槲皮素组的模型细胞增殖明显(P0.01);槲皮素组和依达拉奉组TNF-αmRNA,CCL20 mRNA,IL-8 mRNA表达和TNF-α,CCL20,IL-8的含量显著下降(P0.05);槲皮素组蛋白数量比n(pNF-ΚBp65)/n(NF-ΚBp65),n (p-IKKα)/n (IKKα)显著减小(P 0. 01),而依达拉奉组n (p-NF-ΚBp65)/n (NF-ΚBp65),n(p-IKKα)/n(IKKα)无明显变化。说明槲皮素具有抑制LPS诱导HBMEC的损伤作用,可能是通过下调IKKα/NF-ΚB p65信号通路减少炎症相关因子TNF-α,CCL20和IL-8的表达。这为槲皮素应用于脑血管病变引起的帕金森病临床防治提供了实验依据。