两种中草药的SOD活性测定及其对细胞体外培养存活时间的影响

分别以改良的连苯二酚自氧化法和极谱氧电极法测量了两种药用植物（祁州漏芦和女贞子）提取液ＭＰＥ－１和ＭＰＥ－２含有的超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性。检测结果表明，ＭＰＥ－１和ＭＰＥ－２的ＳＯＤ活性分别为１３１．３ｕ／ｍｌ和２９８．５ｕ／ｍｌ．以ＭＰＥ－１和ＭＰＥ－２为培养液添加物的人红细胞体外培养试验证实，这两种中药提取液均能稍微延长人红细胞体外培养的存活时间。     

灵芝发酵液对小鼠红细胞内SOD活性的影响

对灵芝菌丝体发酵液的ＳＯＤ样活性进行测定，与子实体提取液进行比较，研究其对实验小鼠红细胞朵ＳＯＤ活性的影响。结果表明：发酵液和提取液不仅具有ＳＯＤ样活性，而且经连续灌胃１２ｄ后，小鼠红细胞内ＳＯＤ的活性分别对对照组的２．５６倍和１．９５倍。结果表明灵芝的抗衰老机主主要通过提高机体抗氧化酶活性和清除自由基而起作用。     

9种中草药对鳗鲡病原菌体外抑菌活性的影响

对3株染病的日本鳗鲡肾脏中分离的致病菌进行活化,同时采用二倍稀释法以黄连、大黄、穿心莲、大青叶、黄岑、黄柏、鱼腥草、虎杖、苦参9种单味煎剂对3株分离菌和爱德华氏菌及嗜水气单胞菌的标准株进行最小抑菌浓度和最小杀菌浓度的测定。结果显示大黄及虎杖体外抑菌活性最为理想。     

92种中草药的血凝活性测定

凝集素在研究细胞膜结构功能、分子识别、细胞免疫等方面的应用正不断扩大并日益引起重视．本实验选用了39科92种中草药的干制品（均未经炮制处理）,用NaCl－磷酸盐缓冲液（PBS）提取、离心,取上清液在96孔V型微量血凝板上进行血凝活性效价测定．结果表明,阳性样品分属14科23种（占25％）均能使充红血球凝集,其中12种能使人红血球凝集．凝集效价最高为百合科的卷叶黄精,最低为百合科滇黄精和玉竹黄精．     

实验小鼠数量对重组人促红细胞生成素体内活性测定的影响

目的体内生物学活性是重组人促红细胞生成素（Recombinanthumanerythropoietin,rhuEPO）质量控制的关键指标之一,通过研究找出实验小鼠数量对rhuEPO体内活性测定结果的影响,减少检测的复试率和误判率,控制质量风险。方法根据《中国药典》三部的方法,按低、中、高3个剂量组,分别于皮下注射人促红细胞生成素（EPO）标准品和样品溶液,在注射后第4天从小鼠眼眶后静脉丛采血测定EPO活性。根据实验设计每剂量组实验小鼠分别选择为3只、4只、6只、9只、12只,通过实验观察每剂量组小鼠数量不同对rhuEPO内活性测定结果的影响。结果每剂量组小鼠为3只的EPO活性测定复试率、相对标准偏差、最大误差范围和误判率都远高于小鼠数为4一12只各组的EPO活性测定结果;每剂量组小鼠只数为4只和6只的实验复试率、相对标准偏差和最大误差范围相差不大;每剂量组小鼠为9只和12只的实验复试率、相对标准偏差、最大误差范围和误判率均低于其他3个实验。结论每剂量组小鼠数量越多,EPO活性测定的相对标准偏差、误差范围和误判率等越低,结合检测成本及实际可操作性,我们认为每剂量组小鼠数量设为9只为EPO生物学活性测定最佳的小鼠使用数量。     

绿原酸对体外培养成骨细胞活性的影响

为研究接骨草成分之一绿原酸(CGA)对成骨细胞MC3T3-E1活性的影响,采用MTT法检测11.02,22.05,44.09,88.19μmol/L CGA对成骨细胞增殖率,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测成骨细胞ALP活性,实时定量PCR检测成骨细胞骨相关基因的表达.结果表明:11.02～88.19μmol/L CGA对成骨细胞增殖具有明显的促进作用.培养2d,44.09μmol/L CGA能促进ALP表达上调;22.05,44.09μmol/L CGA能促进ALP、Runx2、Osterix、c-jun和c-fos基因的表达;培养6 d,44.09μmol/L CGA能促进c-fos基因的表达;在整个培养过程中,I型胶原(Col-I)基因的表达具有浓度和时间依赖性.故CGA具有一定的成骨活性,是接骨草的成骨活性成分之一.     

bHGA对体外培养成骨细胞活性的影响

为探讨12b-羟基-去-D-杰氏山竹子素A(bHGA)的体外潜在成骨活性,用bHGA处理MC3T3-E1成骨细胞,研究了其对细胞碱性磷酸酶活性、矿化、骨相关基因表达及早期成骨分化相关基因表达水平的影响.结果表明:bHGA处理细胞后,对Runx2 mRNA表达无显著影响,而对Osx mRNA的表达具有一定抑制作用.bHGA能同时促进骨钙蛋白基因OCN和Ⅰ型胶原Col 1 mRNA的表达,但抑制碱性磷酸酶mRNA的表达,其对骨桥蛋白基因OPN mRNA的表达没有显著影响.说明bHGA不利于骨早期分化,但它通过促进骨钙蛋白和I型胶原mRNA的表达而促进骨成熟.     

双丁酰环腺苷酸对人胃腺癌体外培养细胞DNA合成的影响

应用~3H-TdR光镜和电镜放射自显影观察表明,MGc80-3 细胞标记指数达31.51％,标记银粒集中于分裂间期的S期细胞核中,细胞核呈重标记状态,绝大多数标记银粒分布于细胞核常染色质区域,少数见于核孔附近的常染色质或核孔附近的细胞质中,核仁未见标记,显示细胞内 DNA合成十分活跃。但经 dBcAMP诱导后,标记指数则降至 4.35％,细胞核呈弱标记状态,电镜放射自显影则未在细胞核内见到标记银粒,表明其DNA合成受到明显抑制。这种变化是由于dBcAMP诱导胃癌细胞内cAMP水平提高而实现的,认为DNA合成抑制是导致MGc80-3细胞走向分化的一个重要原因,对于癌变细胞恶性表型逆转具有重要作用。     

几种糖与氨基酸对鸭血红细胞SOD的保护作用

研究了几种糖、氨基酸不同浓度对鸭血红细胞SOD活力的影响。结果发现,β-环糊精对SOD活力具有明显的激活作用,葡萄糖和乳糖均使SOD活力下降,蔗糖对SOD活力影响不明显;L-组氨酸、L-甲硫氨酸和L-精氨酸均对SOD有一定的激活作用。其中β-环糊精、L-组氨酸和L-甲硫氨酸的效果较好。     

山药多糖对体外培养大鼠胰岛细胞活性及胰岛素分泌的影响

为评价山药多糖对胰岛细胞功能的影响,以不同质量浓度葡萄糖刺激胰岛素释放,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测胰岛β细胞活性,同时以反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测胰岛细胞的抗凋亡基因bcl-2的表达,研究山药多糖与大鼠胰岛细胞共培养对胰岛细胞活性与胰岛素分泌水平的影响,并对其影响机制进行探讨.结果发现,1600 mg/L组胰岛细胞活性稍有下降,但是与对照组没有显著差异(p0.05);其余各组随培养液中山药多糖质量浓度的增加,胰岛细胞活性增加.低糖或高糖质量浓度环境中实验组与对照组的胰岛素分泌没有显著差异(p0.05),RT-PCR发现实验组的bcl-2表达显著高于对照组(p0.05).800 mg/L山药多糖明显提高胰岛细胞的存活率,改善胰岛功能.     

祁州漏芦提取物（MPE—1）对人红细胞保护作用的研究

采用荧光分光偏振技术以及ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）技术，研究了祁州漏芦提取液（ＭＰＥ－１）对人红细胞膜流动性的保护作用以及对细胞膜蛋白高聚物（ＨＭＰ）生成的影响。实验结果表明，ＭＰＥ—１具有超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）相似的保护人红细胞的良好作用。为今后研制开发祁州漏芦适应原药物提供了细胞学依据。     

三种中草药对人肝癌细胞SMMC7721体外增殖抑制

采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法和细胞凋亡形态观察,初步探讨白英、毛麝香和使君子3种中草药的醇提物对肝癌细胞SMMC7721体外增殖的抑制效果.结果表明,白英醇提物对肝癌细胞SMMC7721有很强的抑制作用,当抑制率为50%时,样品的质量浓度(ρ50)达到25.85 mg·L-1,且经50 mg·L-1作用72 h后,细胞逐渐变圆,体积缩小,有凋亡小体形成,呈典型的凋亡现象;使君子、毛麝香的醇提物对细胞抑制作用较弱, 在药物质量浓度达到100 mg·L-1时,对SMMC7721细胞的抑制率分别为43.88%,20.88%,二者的ρ50均大于100 mg·L-1.     

磁场对缺氧性心肌损伤大鼠血红细胞SOD活性变化的影响

目的：探讨磁场对缺氧性心肌病大鼠血红细胞SOD活性变化的影响。方法：将大鼠随机分为四组：空白对照组、磁作用对照组、缺氧性心肌损伤组、缺氧性心肌损伤磁场治疗组。采用四氮唑蓝法测定各组大鼠血红细胞SOD活性。结果：大鼠血红细胞SOD活性,心肌损伤磁场治疗组明显高于缺氧性心肌损伤组（P＜0．01）,磁作用对照组高于空白对照组（P＜0．05）。结论：在磁场作用下缺氧性心肌损伤大鼠和健康大鼠血红细胞SOD活性可明显升高,进而表明：磁场对缺氧性心肌损伤大鼠和健康大鼠心肌具有一定的保护作用。     

女贞子对大鼠垂体促肾上腺皮质激素细胞的影响

中药女贞子所致大鼠垂体促肾上腺皮质激素细胞超微结构变化的观察发现，胞浆中的分泌颗粒、核糖体和线粒体的数量显著增加，显示女贞子能提高该细胞合成促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）的能力，为中药女贞子补益作用机理的研究提供了形态学依据     

人角膜细胞在体外培养的研究进展

人角膜是光通过的窗口,在维持眼压和对光路调节方面也起着重要的作用,由角膜缺损或病变引起的眼疾严重时会导致患者失明。目前治疗这类疾病的唯一办法就是角膜移植,但是及其匮乏的角膜供体使得多数患者失去重新获得光明的机会。近些年来兴起的组织工程人角膜体外重建技术给数以千万计的患者带来了福音。来自自体的人角膜细胞是上述组织工程所需的最理想的种子细胞,本文就人角膜细胞在体外的培养和扩增的进展和存在的问题进行综述。     

氨对重组中国仓鼠卵巢细胞生长及人红细胞生成素表达的影响

氨对重组中国仓鼠卵巢（CHO）细胞的生长具有明显的抑制作用，并遵循二级抑制模型，抑制常数Ka为41．5（mmol/L)^2，即当氨浓度为6．45mmol/L时，细胞的比生长速率下降到最大比生长速率的50％，在重组CHO细胞的批培养过程中，细胞密度和红细胞生成素浓度随着起始氨浓度的提高而下降，但存在一最适的氨浓度，在此浓度下，单位重组CHO细胞的EPO比生成速率最大。     

两种不同基质对体外培养成骨细胞促贴壁生长的影响

目的 比较多聚赖氨酸(PoLy lysine PLL)与鼠尾胶原对成骨细胞体外培养生长的影响。方法 分别采用 PLL和鼠尾胶原铺制培养皿,然后接种成骨细胞。于24 h、48 h、72 h镜下观察细胞形态及占培养皿面积的百分比。 结果 24 h PLL组,细胞贴壁呈均匀分布状,贴壁面积比为(30.6±12.9)％;鼠尾胶原组细胞贴壁呈团状,贴壁面 积比为(42.5±15.7)％,两者比较差异显著(P ＜0.05);48 h PLL组,细胞呈均匀分布生长,贴壁面积比为(43.8± 14.5)％;鼠尾胶原组,细胞团相互连接,生长面积比为(61.3±17.1)％,差异极显著(P ＜0.01);72 h PLL组细胞相 互连接生长面积比为(56.3±15.4)％;鼠尾胶原组,细胞连成片, 生长面积比为(94.4±14.1)％,两者比较差异极 显著(P＜0.01)。结论 对体外培养成骨细胞鼠尾胶原促贴壁生长比PLL更为适宜。     

石见穿萃取物对体外培养成骨细胞活性的影响

石见穿以95%乙醇抽提得总提物.分别用不同试剂萃取总提物,获得其石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物以及其水溶性成分.以体外培养成骨细胞MC3T3-E1为模型,用cck-8法测定细胞增殖,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒法测定了上述不同萃取物对成骨细胞增殖和分化的影响.结果表明:总提物在浓度10～-3、10-4、10-...     

体外诱导的同种反应性淋巴细胞输注对大鼠皮肤移植存活时间的影响

目的观察体外诱导的同种反应性淋巴细胞输注是否可以诱导大鼠皮肤移植免疫耐受,从而探索一条诱导器官移植耐受的新途径。方法以供者Lewis大鼠淋巴细胞作为刺激物,体外刺激受者BN大鼠淋巴细胞增殖,应用CFSE法检测增殖情况;以增殖后的BN大鼠淋巴细胞作为自身独特型疫苗,输注给同品系的BN大鼠,并行Lewis到BN的皮肤移植,观察皮肤移植物生存期。结果同种反应性淋巴细胞体外能够活跃增殖;同种反应性淋巴细胞输注可以显著延长皮肤移植物的存活时间(P<0.05)。结论体外诱导的同种反应性淋巴细胞输注有可能成为诱导抗原特异性免疫耐受的一种新途径。     

乙草胺对泥鳅肝脏组织超氧化物歧化酶活性的影响

为探讨低毒除草剂对水生生物的危害,用急性染毒法研究了0．125,0．250,0．500,1．000,2．000μL／L5个浓度组的乙草胺处理液在24,48,96h对泥鳅肝脏超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响．结果表明,在24和48h,处理液对泥鳅的半数致死浓度分别为4．7和4．4μL／L．不同浓度的乙草胺处理对泥鳅肝脏中SOD活性都具有诱导作用,因此可以用泥鳅肝脏中SOD活性变化作为水环境监测的生物学指标来评价水生生物的生态环境．