山楂种子休眠与萌发生理研究 Ⅳ.山楂种子内果皮及种皮与种子休眠的关系

通过对１９９４年和１９９５年采收的山楂种子进行层积、发芽、组织培养、生活力测定、ＧＡ３处理等多种方法进行研究认为，层积中山楂种子先解除休眠而后破壳；种子子叶休眠时间短，并可在干藏条件下解除休眠，休眠解除后，种皮抑制其生长；在种子发育过程中，子叶进入休眠前，种皮对子叶生长有一定作用；干藏７个月以内的种子，去除种皮或去除种皮及子叶，胚芽、胚轴、胚根不能萌发     

辣椒子叶和下胚轴离体培养再生

8个辣椒品种的子叶和下胚轴接种在附加不同激素的MS培养基上，经过芽诱导、芽伸长、生根、移栽入盆四个阶段，得到完整的再生植株。实验结果显示：6—8d的苗龄最佳，子叶的分化率高于下胚轴，培养基中添加AgNO3明显促进外植体的分化，GA3是芽伸长的关键因子，IBA的生根效果要好于无激素MS培养基．通过这一过程，建立起一个基于最佳激素组合的高效植株再生体系．     

番茄离体培养的形态发生

对番茄下胚轴、子叶、叶柄不同类型外植体离体培养中有关细胞启动、分裂、分化以及器官发生作了细胞组织学观察,结果表明：番茄不同类型外植体在不同样的培养条件下,愈伤组织生长表现明显差异：下胚轴、子叶诱导产生愈伤组织时,细胞启动早,生长快,分裂方式基本为无丝分裂;下胚轴诱导愈伤组织形成时,细胞不规划的无丝分裂少于子叶,故下胚轴离体培养得到正常芽的比例高于子叶;番茄离体培养中不定芽通常发生在愈伤组织的周边区,也可起源于维管组织结节周围,形成层状细胞。不定根则由茎中柱鞘处发生。     

油用牡丹‘凤丹’种子层积过程中营养物质的代谢变化研究

【目的】探索低温层积不同阶段油用牡丹‘凤丹’种子种皮结构、胚形态以及营养物质、酶活性的动态变化,为其休眠解除以及促进萌发提供理论参考。【方法】以低温层积5个阶段的‘凤丹’种子为材料,用扫描电镜(SEM)和体视显微镜观察种皮结构、种胚形态的变化,测定各层积阶段种子大小、吸水率的变化,同时测定种子中粗脂肪、可溶性蛋白、可溶性糖、淀粉含量的变化以及过氧化物酶(POD)、酸性磷酸酶(APA)活性的变化,分析营养物质含量、酶活性与‘凤丹’种子休眠解除的关系。【结果】‘凤丹’种皮不存在吸水障碍,浸种96 h时,吸水率为54.2%,达到吸水平衡。层积30 d时,种子纵径由8.97 mm显著增加至10.44 mm,增加了16.4%;横径由6.42 mm显著增加至8.87 mm,增加了15.0%;之后种子大小增加缓慢。SEM观察结果表明:种皮主要由角质层、栅栏层和薄壁细胞层3层结构组成,成熟种子、种皮栅栏组织中长柱状细胞排列整齐紧密,但栅栏层、薄壁细胞层中很多细胞间有较小的空隙;层积30 d后,角质层内侧出现了明显的孔洞,栅栏层细胞排列较之前疏松,透性加大。成熟种子的胚较小,层积30 d后子叶略有膨大,下胚轴略有增粗;胚根突破种皮后子叶进一步增大,胚根、下胚轴明显伸长和增粗,但上胚轴仍需层积2个多月才能得以延伸。‘凤丹’种子含油率高,层积处理前种子中粗脂肪含量占种子鲜质量的32.3%,是胚乳中的主要贮藏物质。种子休眠解除过程中,其可溶性糖含量呈下降—上升—下降的变化趋势,而淀粉、可溶性蛋白和粗脂肪含量则一直呈下降趋势;层积过程中,POD和APA活性逐渐增强。【结论】‘凤丹’种皮不存在吸水障碍,透水性不是限制种子萌发的重要原因;成熟的种子胚极小,需在10 ℃条件下层积一段时间,使胚进一步分化发育完全,完成生理后熟作用;胚根突破种皮后仍存在上胚轴休眠现象,需在5 ℃下低温层积较长时间以解除其休眠;层积过程中随着酶活性的不断增强,贮藏物质逐渐被分解,为种子的各种代谢活动提供能量,且粗脂肪的分解与转化是此过程中的主要供能物质。‘凤丹’种子层积过程中其生理生化指标的变化与种胚形态变化呈现高度的一致性。     

不同活力花生种子蛋白质的研究

花生种子经人工加速老化处理后种子活力下降，其蛋白质总含量、胚轴和子叶中的蛋白质含量均随之下降，胚轴、子叶中可溶性蛋白质含量也随种子活力的下降而减少，低活力花生种子胚轴可溶性蛋白质和结合蛋白质的合成能力显著下降．低活力种子萌发时，贮藏蛋白质迅速降解，而新合成的蛋白质却较少，随着种子活力的下降，胚轴可溶性蛋白质和结合蛋白质的种类也随之减少．     

南丰蜜橘组织培养及植株再生

以南丰蜜橘种子无菌苗的子叶、上胚轴、茎端、下胚轴为材料,在不同激素配比的MS基本培养基上进行外植体筛选和诱导不定芽分化、继代及生根培养,确定了诱导植株再生的最佳外植体和最适条件:(1)诱导不定芽分化最好外植体为上胚轴,不定芽分化率达90%;(2)继代培养中最适激素配比为MS+0.8 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.5 mg/LD-泛酸钙;(3)生根最适合培养基为MS/2+0.1 mg/L NAA.     

BA和激素对‘Bonny Best’试管番茄愈伤组织形态发生的影响

用’Bonny Best’番茄品种的子叶和下胚轴作为外植体,在MS附加不同水平和比率的BA和2,4—D(或NAA)或IAA的培养基中,愈伤组织形态发生的情况是不同的。MS+BA4.44μM+2,4-D10μM(子叶),MS+BA0.44-4.44μM+2,4-D1—5μM(下胚轴)使外值体产生淡黄色疏松的愈伤组织,而且生长迅速。若2,4-D浓度低于5μM(子叶)或高于5μM(下胚轴)时,外植体形成白色紧密的愈伤组织,而且生长缓慢,固定2,4-D的浓度,BA浓度由高到低,所形成的愈伤组织的结构由紧密向疏松变化。愈伤组织的液体培养中也出现了类似现象。把愈伤组织转移到生茎培养基中,白色紧密的愈伤组织形成茎较为容易,培养21天后,茎的分化即开始。而疏松的愈伤组织的形态发生则经过了黄色疏松、深褐色胶状到白色紧密的变化。茎的分化出现较晚。愈伤组织培养时生长调节剂的水平对茎的分化有着直接的影响。较高水平的BA(22.2—44.4μM)+NAA10-40μM有利于茎的分化。把子叶和下胚轴切段培养在MS+BA22.2-44.4μM+IAA1-5μM的生茎培养基上,24—60天后,70％以上的外植体正常分化并伸长成茎,生枝率每个切段为3—4个。转移到MS培养基上,形成正常的带根幼苗。把下胚轴切段直接培养在没有激素的MS培养基上,三周后,45.8％的下胚轴形成正常幼苗,出枝率为1.0。把这些幼苗移栽到温室     

怎样识别蔬菜种子的新与陈

蔬菜种子的新与陈,直接影响种子的发芽率,现介绍简便的识别方法:1.甘蓝、萝卜等十字花科的蔬菜种子:先看种皮,再压种仁.新种子表皮光滑,富有光泽,有清香气味,用指压种仁有油分,碎后成片状,种皮脱离,子叶浅黄或黄绿色.而陈种子表皮无光泽,贮藏不好表皮有“盐霜”,闻之有“哈喇”味,用指压子叶易碎,种皮易脱离,子叶黄色,油分少.2.菜豆等豆类种子:新种子子叶绿色.富油分,有香味,口咬有涩味,而陈种子子对深黄,或有上黄色斑纹,无清香味.3 南瓜、黄瓜等瓜类种子:新种子富有光泽呈乳白或白色,富含油分有香     

ACC氧化酶反义基因转化青花菜的研究

以青花菜的下胚轴和带1～2mm子叶柄的子叶为转化受体，建立了根癌农杆菌介导的转化体系，获得了含番茄果实ACC氧化酶反义基因的转基因植株。经筛选获得了5株抗性植株，其中1株来自下胚轴，另外4株来自带子叶柄的子叶。PCR及Southern blot检测证实，外源．ACC氧化酶反义基因已整合进其中2株拟转化青花菜植株的基因组。转化植株移栽到室外均能成活，成熟小花蕾的乙烯测定结果表明乙烯的合成受到了不同程度的抑制。     

唐古特白刺愈伤组织诱导及再生体系的研究

以唐古特白刺(Nitraria tangutorum Bobr.)子叶、下胚轴、根为外植体, 接种在不同浓度激素配比的培养基中, 研究愈伤组织的诱导及植株再生.结果表明: 子叶和下胚轴是诱导愈伤组织的良好外植体; 以MS补加2,4-D(0.5～1.0 mg·L-1)或6-BA(1.0～2.0 mg·L-1)+NAA(0.5～1.0 mg·L-1)可100%高频产生愈伤组织;在MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1培养基上,下胚轴可产生不定芽; 最佳增殖培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA(0.5～1.0 mg·L-1),增殖系数为5.75; 最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg·L-1,生根率达94.6 %.     

黄皮胚轴的脱水敏感性及成苗

黄皮（Ｃｌａｕｓｅｎａ ｌａｎｓｉｕｍ「Ｌｏｕｒ．」Ｓｋｅｅｌｓ）离体胚轴（不带子叶的胚）在无激素的木本植物培养基上可长成小植株。几种因素包括胚轴剥取和培养技术均可影响胚轴成苗。成苗是衡量黄皮胚轴活力的一项重要指标。     

白菜型油菜原生质体培养的研究

以白菜型油菜为材料,从5日龄无菌苗的子叶和下胚轴游离原生质体,在DPD培养基中作浅层培养,密度为1×10~5个/ml。接种后48小时出现第一次分裂,6天后发生第二次分裂。此时,子叶原生质体停止发育,下胚轴原生质体可持续分裂。约一个月,形成大细胞团,转入固体培养基后可发育成愈伤组织。     

大白菜组织培养

介绍在MS基本培养基中分别添加KT或ANN或AgNO3成份，组合成3种培养基，进行大白菜(B.pekinensis)“早熟五号”子叶及下胚轴愈伤组织的诱导，确定了适合该白菜品种子叶和下胚轴最优化愈伤组织培养的培养基。     

黄瓜的离体子叶和胚轴诱导成株

1979——1981年对黄瓜叶片、叶柄、嫩茎、卷须、幼果、花药、胚轴和子叶等八个部位的组织进行离体组织培养,除卷须外,其它都已获得愈伤组织。其中胚轴和子叶培养已获得植株,并现蕾形成花器官。培养基采用MS NAA0.1mg/1或1mg/1 6-BAlmg/1 腺嘌呤 4mg/1 EDTA-Fe母液5ml/1 蔗糖6％ 琼脂0.8％。分化根的培养基是MS基本培养基。     

向日葵耐盐突变体筛选

以MS为基本培养基,研究了不同激素对康地5号向日葵愈伤组织的诱导效果,筛选出了最佳诱导愈伤组织培养基;以子叶、下胚轴及真叶作为外植体。确定了子叶和下胚轴作为康地5号组织培养的最佳外植体;在含50、100、及150mmol／L NaCl不同盐浓度培养基上分别诱导出向日葵耐盐愈伤组织,继代培养后得到不同耐盐程度的新株系,移栽后得到完整植株．     

番茄组培苗的不同阶段对抗生素和PPT的抗性筛选试验

以番茄高效再生体系为基础,在番茄子叶和下胚轴的出愈、芽分化生长以及生根的各阶段培养基中,分别添加不同质量浓度的卡那霉素、新霉素和除草剂PPT三种选择性试剂,以确定番茄遗传转化所需的最佳筛选质量浓度.试验表明:T79和T151两个自交系对卡那霉素、新霉素、除草剂的抗性差异不大;卡那霉素与PPT在组培的各个阶段均对外植体有强烈的抑制作用,而新霉素对它们的抑制作用则不明显;在番茄组培的不同阶段、不同外植体对卡那霉素和PPT的反应存在较大差异,以下胚轴出愈对卡那霉素反应最敏感,子叶出愈和生根阶段对其反应迟钝;下胚轴出愈和芽分化对PPT的反应较敏感,子叶出愈对其反应较迟钝.因此建议在番茄遗传转化中,卡那霉素对子叶出愈和生根阶段的筛选质量浓度为100mg·L-1,对下胚轴出愈为50mg·L-1,对芽分化及其生长为70mg·L-1;而除草剂PPT对子叶出愈阶段的筛选质量浓度为1.0mg·L-1,对下胚轴出愈为0.5mg·L-1,对芽分化和生根阶段为0.75mg·L-1.     

番茄外植体诱导直接分化不定芽建立高频再生系统

研究以番茄(Lyeopercicon esculention Mill)栽培品种贵妃和碧娇为试材，通过对番茄子叶、下胚轴、叶片和茎段进行离体培养，不经愈伤组织阶段，诱导直接分化不定芽，研究并得到其高频再生的最适培养基和试管苗扦插繁殖的最适培养基，并对影响高频再生的其他因素做了研究，建立了再生频率高达98％以上的番茄高频再生系统，为番茄快速繁殖及基因转化研究奠定了基础．     

甘农四号紫花苜蓿愈伤组织诱导研究

以甘农四号紫花苜蓿的下胚轴、叶柄、子叶、叶片为外植体,研究了不同质量浓度的2,4-D对愈伤组织诱导的影响.结果表明:不同外植体的愈伤组织发生能力存在显著差异,外植体愈伤率下胚轴>叶柄>子叶>叶片.下胚轴在接种后16d的愈伤率高达100%,显著高于其他外植体.叶柄、子叶、叶片的愈伤率分别为:95.65%,88.06%,79.37%.其中叶柄的愈伤率显著高于子叶和叶片,子叶和叶片之间差异不显著.在附加3个不同质量浓度2,4-D的MS培养基上外植体的愈伤诱导率差异不显著,愈伤率均达到了90%以上.     

用根癌农杆菌介导法建立抗真菌病害油菜育种体系的研究初报

用含β－１,３－葡聚糖酶和几丁质酶串联基因双价载体质粒ＰＢＬＧＣ的根癌农杆菌侵染甘蓝型油菜（Ｂｒａｓｉｃａｎａｐｕｓ）带柄子叶和下胚轴的方法,初步建立了抗真菌病害油菜高效基因转化育种体系．研究了不同种类和不同浓度的激素对带柄子叶和下胚轴不定芽诱导的影响,试验结果表明经卡那霉素（ｋａｎ）筛选,含６ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ的ＭＳ培养基中带柄子叶的出苗率及绿苗分化率最高,分别为１００％和２５％;下胚轴在含１ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ和０．１ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ的ＭＳ培养基中出芽率及绿苗分化率最高,分别为１００％和２３％．绿苗在含５０ｍｇ／Ｌｋａｎ的诱根培养基中培养后移栽于花盆,套袋自交,自交种子所得无菌苗的带下胚轴子叶再经含５０ｍｇ／Ｌｋａｎ的ＭＳ培养基筛选培养,结果小苗全部生根成活,初步证明目的基因已转入油菜植株中,经诱导不定芽阶段和生根阶段两次ｋａｎ筛选是有效的     

黄瓜子叶下胚轴愈伤组织诱导及植株再生试验

将7—10天龄黄瓜无菌苗的子叶、下胚轴在添加不同生长激素的MS培养基上培养5—20天,子叶下胚轴产生愈伤组织.继续培养7—10天,产生绿色芽点,分化率达75%,1mg/1浓度的bBA有利于芽的分化,添加0.1mg/l浓度的IBA,对根的形成有促进作用.