尼古丁对人脐带间充质干细胞氧化应激的影响

目的:研究尼古丁对人脐带间充质干细胞(HUCMSCs)超微结构及氧化应激的影响,探讨尼古丁诱导HUCMSCs凋亡的作用机制.方法:不同浓度尼古丁作用HUCMSCs后,透射电镜(TEM)观察HUCMSCs超微结构变化.分光光度计法检测HUCMSCs胞内过氧化氢酶(CAT)活性,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)活性,化学比色法检测还原型谷胱甘肽(GSH)活性,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量.分光光度计法检测一氧化氮合酶(NOS)、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)活性.结果:尼古丁作用HUCMSCs后,细胞内出现大量空泡状结构,粗面内质网扩张成池,线粒体嵴扩张.细胞内CAT、SOD、GSH活性均显著降低,脂质过氧化产物MDA含量显著增加,呈浓度依赖性.NOS、iNOS活性随尼古丁浓度上升而逐渐增加.结论:尼古丁可增加HUCMSCs的NOS、iNOS活性,使细胞发生凋亡结构改变,呈氧化应激状态,发生氧化-抗氧化系统失衡.     

NaCl胁迫对构树、光叶楮生理及细胞结构的影响

以1年生构树和光叶楮幼苗为材料,研究了其细胞膜透性、MDA(丙二醛)含量、SOD(超氧化物歧化酶)和POD(过氧化物酶)活性对不同浓度NaCl胁迫的反应,并观察了细胞超微结构的变化。结果显示：(1)随NaCl浓度的升高及胁迫时间的延长,构树和光叶楮膜透性和MDA含量显著增加;而SOD和POD活性先增加后下降,抗氧化酶活性(SOD和POD)之间协调变化有利于清除活性氧,维持活性氧代谢平衡,保护膜结构。(2)低浓度NaCl处理下(质量分数为0.1 %和0.2 %)构树和光叶楮叶片的细胞超微结构未受到伤害,同时可观察到线粒体增多的现象;随着盐浓度的增加,细胞超微结构变化较大,0.4 % NaCl胁迫时构树和光叶楮叶片细胞器变形严重,液泡增大明显,且构树细胞核明显固缩,核物质凝聚,线粒体结构模糊,细胞结构受到严重伤害。综合分析认为：光叶楮的耐盐性较强。     

三唑磷蓄积对日本是4种组织超微结构的影响

首先根据急性毒性试验确定了三唑磷对日本?的安全浓度为 0.27 mg/L,然后采用透射电镜技术研究了该浓度下三唑磷蓄积对日本(虫寻)4种组织细胞(肌肉、鳃、肝胰脏和心脏)超微结构的影响.结果表明 三唑磷对肌肉损伤的主要靶部位是线粒体和肌原纤维,表现为线粒体内嵴肿胀、空泡化,线粒体溶解,肌原纤维断裂,明暗带不清楚;鳃细胞的损害表现为鳃丝水肿,细胞器溶解,角质层变薄,线粒体、内质网的肿胀、解体,细胞核不规则,核膜肿胀突起;肝胰脏细胞的主要损害特征为肝管微绒毛减少、线粒体水肿解体、内质网扩张、脂肪滴增加;心脏细胞的毒理变化为线粒体内嵴肿胀、瓦解,肌原纤维不规则,细胞核膜肿胀、突起,内质网溶解.鳃和肝胰脏中的变化要比肌肉和心脏明显.     

三唑磷蓄积对日本(虫寻)4种组织超微结构的影响

首先根据急性毒性试验确定了三唑磷对日本?的安全浓度为 0.27 mg/L,然后采用透射电镜技术研究了该浓度下三唑磷蓄积对日本(虫寻)4种组织细胞(肌肉、鳃、肝胰脏和心脏)超微结构的影响.结果表明 :三唑磷对肌肉损伤的主要靶部位是线粒体和肌原纤维,表现为线粒体内嵴肿胀、空泡化,线粒体溶解,肌原纤维断裂,明暗带不清楚;鳃细胞的损害表现为鳃丝水肿,细胞器溶解,角质层变薄,线粒体、内质网的肿胀、解体,细胞核不规则,核膜肿胀突起;肝胰脏细胞的主要损害特征为肝管微绒毛减少、线粒体水肿解体、内质网扩张、脂肪滴增加;心脏细胞的毒理变化为线粒体内嵴肿胀、瓦解,肌原纤维不规则,细胞核膜肿胀、突起,内质网溶解.鳃和肝胰脏中的变化要比肌肉和心脏明显.     

DBP对大鼠睾丸支持细胞内Ca2+、线粒体膜电位及Caspase活性的影响

目的通过测定DBP对大鼠睾丸支持细胞内Ca2+、线粒体膜电位及Caspase活性的影响,探讨DBP是否通过影响线粒体膜电位而引起支持细胞凋亡.方法建立支持细胞原代培养体系,将细胞分为0.1%DMSO(对照组)、1 mg/L(低剂量组)、10 mg/L(中剂量组)、100 mg/L(高剂量组),分别处理细胞24 h;荧光分光光度计测定支持细胞内Ca2+的浓度,流式细胞仪检测线粒体膜电位,酶标仪测定Caspase-9和Caspase-3的活性.结果与对照组相比,高剂量组中Ca2+浓度明显升高,差异具有统计学意义(P0.05),而低、中剂量组与对照组比较无统计学意义(P0.05).DBP导致的线粒体膜电位升高在中、高剂量组中具有统计学意义(P0.05),随着DBP浓度的增加,Caspase-9与Caspase-3的活性升高,差异均具有统计学意义(P0.05).结论 DBP能显著降低支持细胞线粒体膜电位,改变线粒体膜的通透性,进一步升高Caspase-9及Caspase-3的活性,并最终导致睾丸支持细胞凋亡.     

根皮素引起前列腺癌LNCaP细胞发生凋亡的机制研究

根皮素是存在于苹果、梨等水果及多种蔬菜汁液中的天然活性物质,具有抗肿瘤活性,能够有效地诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖.本研究初步探讨了根皮素诱导前列腺癌LNCaP细胞的凋亡和相关分子机制.通过形态学观察、噻唑蓝(MTT)比色实验、CCK-8实验测定前列腺癌细胞活性;采用DAPI染色法测定细胞核凝缩破裂;运用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术测定前列腺癌细胞的凋亡率;再通过PI单染流式细胞术测定前列腺癌细胞的周期变化;以及采用Western blot检测PI3K/AKT信号通路及其下游细胞凋亡相关蛋白和细胞周期相关蛋白的表达.实验结果表明:根皮素诱导前列腺癌LNCaP细胞周期阻滞在G2/M期,并呈浓度依赖性降低细胞活性、增加细胞核凝缩破裂,显著提高前列腺癌细胞的凋亡率.在分子机制上,根皮素呈现浓度依赖性下调PI3K/AKT的活性,从而影响细胞凋亡相关蛋白和细胞周期相关蛋白的表达.因此,根皮素对前列腺癌细胞的生长有显著的抑制作用,对治疗前列腺癌具有潜在的临床应用价值.     

维康颗粒对疲劳型亚健康大鼠线粒体再生功能的影响

目的:观察维康颗粒对疲劳型亚健康大鼠骨骼肌细胞线粒体再生功能的影响。方法:建立疲劳型亚健康大鼠骨骼肌细胞模型;观察骨骼肌细胞线粒体形态学改变;测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量;实时定量RT-PCR方法测定过氧化物酶体增殖物激活受体辅激活因子1α(PGC-1α)、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)mRNA的表达水平。结果:比较正常对照组,模型组大鼠骨骼肌细胞线粒体数量减少,呈空泡样变性,嵴消失,内质网及核模扩张,MDA升高及SOD下降(P<0.05),PGC-1α、AMPK mRNA表达水平显著降低(P<0.05),而维康颗粒可逆转线粒体结构损伤,恢复MDA、SOD及PGC-1α、AMPK mRNA表达正常。结论:维康颗粒促进线粒体再生可能是干预疲劳型亚健康的作用机制之一。     

三唑磷蓄积对日本蟳4种组织超微结构的影响

首先根据急性毒性试验确定了三唑磷对日本蟳的安全浓度为0．27mg／L，然后采用透射电镜技术研究了该浓度下三唑磷蓄积对日本蟳4种组织细胞(肌肉、鳃、肝胰脏和心脏)超微结构的影响。结果表明：三唑磷对肌肉损伤的主要靶部位是线粒体和肌原纤维，表现为线粒体内嵴肿胀、空泡化，线粒体溶解，肌原纤维断裂，明暗带不清楚；鳃细胞的损害表现为鳃丝水肿，细胞器溶解，角质层变薄，线粒体、内质网的肿胀、解体，细胞核不规则，核膜肿胀突起；肝胰脏细胞的主要损害特征为肝管微绒毛减少、线粒体水肿解体、内质网扩张、脂肪滴增加；心脏细胞的毒理变化为线粒体内嵴肿胀、瓦解，肌原纤维不规则．细胞核膜肿胀、突起，内质网溶解。鳃和肝胰脏中的变化要比肌肉和心脏明显。     

山葡萄多酚对大鼠缺血再灌注心肌线粒体损伤的保护作用

目的 观察山葡萄多酚(PVAR)对大鼠缺血再灌注心肌线粒体损伤的保护作用.方法 结扎Wistar大鼠冠状动脉30min再灌注20min,测定心肌线粒体中琥珀酸脱氢酶(SDH)、细胞色素C氧化酶(CCO)和SOD活性,膜磷脂及MDA含量.结果 与模型组比较,PVAR(200,400mg/kg )组SDH,CCO,SOD活性明显升高(P＜0.05),膜磷脂含量增加(P＜0.05),MDA含量降低(P＜0.05).结论 PVAR对缺血再灌注损伤的心肌线粒体功能具有保护作用.     

紫甘薯花色苷对人肝癌细胞HepG2的作用

以人肝癌细胞HepG2为模型研究紫甘薯花色苷的抗肿瘤活性.通过MTT实验检测紫甘薯花色苷对HepG2细胞的生长抑制作用,HE染色观察细胞形态,流式细胞仪测定细胞周期变化.MTT结果表明,不同浓度的紫甘薯花色苷处理HepG2细胞24、48、72,h后,低浓度的紫甘薯花色苷促进肿瘤细胞的生长,高浓度的紫甘薯花色苷抑制肿瘤细胞的生长,800,μg/mL花色苷处理72,h抑制率高达80%.HE染色结果表明,正常HepG2细胞的细胞核和细胞质清晰可见,而加入花色苷后,出现细胞核固缩、染色质浓集于核膜表面、形成新月形致密小斑块、细胞膜形态变得不规则等凋亡的特征.流式细胞仪分析结果表明,花色苷能够促进肿瘤细胞的凋亡,且细胞的凋亡率随花色苷浓度的增加而增大.     

Experimental study and mechanism analysis on cell electroporation due to low-intensity transient electromagnetic pulses

The phenomenon of cell electroporation due to low-intensrty transient electromagnetic pulses was studied by using a broad band transverse EM-wave cell (BTEM CELL). The experimental results and preliminary mechanism analysis are presented.     

超抗原SEA体外对Jurkat T淋巴细胞增殖活性与表面超微结构的影响

目的:通过显微形态观察和功能检测分析超抗原(SEA)对Jurkat T淋巴细胞的影响.方法:应用CCK-8法,原子力显微镜(AFM)体外检测Jurkat T淋巴细胞增殖活性、及其细胞膜超微结构的改变.结果:与对照组比较,不同浓度的SEA随着作用时间的增加,细胞膜超微结构与Ra值明显发生改变.Jurkat T淋巴细胞经过质量浓度为0.1-100 mg/L SEA,作用48 h期间,Jurkat T细胞的表面超微结构(平均粗糙度,Ra)和增殖活性(A值)变化非常明显.其中,质量浓度10 mg/L SEA作用24 h,Jurkat T淋巴细胞表面结构变化最明显,而细胞增殖活性在48 h达最强.结论:SEA作为超抗原作用于Jurkat T淋巴细胞后,Jurkat T淋巴细胞的活化表现出表面形态结构改变先于代谢水平的改变,较后者更灵敏.     

Nicotiana ovule extracts in duce nuclear reconstitution of demembranated Xenopus sperm in cell-free system

s Nicotiana tabaccum ovule extracts induced nuclear reconstitution of demembranated Xenopus leavis sperm in a ceil-free system. Demembranated Xenopus sperm began to swell after 15 rmin of incubation with Nicotiana ovulde extracts. Accompanying the process of incubation,Xenopus sperm decondensed and their shapes changed gradually from long and ellipse to round. The completely decondensed chromatin was surrounded with membrane structure, which was a mixture envelope of a double membrane and a single membrane. Nucleosome assembly was verified by means of micrococcal nuclease digestion to reconstituted nuclei and DNA electrophoresis. Nicotiana ovule extracts supplied one more experimental model and system.The new system could promote powerfully the research on mechanisms of cell division and cell cycle regulation.     

低强度瞬态电磁场下动物细胞的电穿孔效应

用低强度瞬态电磁场处理动物细胞后,一些胞内蛋白可以溢出细胞,荧光标记抗体蛋白（ＩｇＧ）可以进入细胞,通过扫描电镜观察到红细胞膜上有电致孔洞,证实了低强度瞬态电磁场作用能起电穿孔。     

Effects of low frequency electromagnetic fields on osteoblasts proliferation and cell cycle

After primary mouse osteoblasts and ROS osteo-like cells were exposed to 50 Hz low frequency electromagnetic fields (EMF), the MTT method and flow cytometry have been used to determine cell proliferation, cell cycle and apoptosis. The results show that, compared with the control, the cells after exposure are more abundant, have larger S phase ratios and lower apoptosis ratios. The results indicate that EMF has an important biological effect which influences cell proliferation and cell cycle.     

Nicotiana ovule extracts induce nuclear reconstitution of demembranated Xenopus sperm in cell-free system

Nicotiana tabaccum ovule extracts induced nuclear reconstitution of demembranated Xenopus leavis sperm in a cell-free system. Demembranated Xenopus sperm began to swell after 15 min of incubation with Nicotiana ovule extracts. Accompanying the process of incubation, Xenopus sperm decondensed and their shapes changed gradually from long and ellipse to round. The completely decondensed chromatin was surrounded with membrane structure, which was a mixture envelope of a double membrane and a single membrane. Nucleosome assembly was verified by means of micrococcal nuclease digestion to reconstituted nuclei and DNA electrophoresis. Nicotiana ovule extracts supplied one more experimental model and system. The new system could promote powerfully the research on mechanisms of cell division and cell cycle regulation.     

野生型人DNA polβ高表达中国仓鼠卵巢细胞系的建立及其生物学特征

脂质体转染法将野生型人DNA聚合酶beta(polβ)重组绿色荧光蛋白表达载体转染入中国仓鼠卵巢细胞系(CHO),经G418筛选得到稳定高表达人野生型polβ的CHO细胞.通过RT-PCR方法检测转染细胞polβmRNA的表达水平,流式细胞仪测细胞周期,软琼脂实验测细胞恶性增殖能力,6-TG实验测细胞自发突变率,以探讨转染细胞的生物学特性.结果显示,转染细胞polβ的mRNA的表达较空载体转染细胞、对照细胞增加,细胞周期多被阻滞在S期,细胞软琼脂集落形成率增高,自发突变率增加,表明polβ的过表达与细胞周期的分布、细胞恶性增殖程度、遗传稳定性相关.     

激光照射金纳米微粒靶向细胞对细胞膜通透性的影响

利用光吸收性纳米微粒靶向选定细胞后,采用短脉冲激光照射可以得到局部的定位损伤,因此光吸收性纳米微粒作为媒介可诱导可控细胞微效应.激光照射结合有金纳米微粒的细胞可以暂时提高细胞膜的通透性.激光照射后,利用流式细胞仪,测量细胞对异硫氰酸荧光素葡聚糖和碘化丙啶的吸收量来判断细胞膜的暂时通透性和细胞的死亡率.通过实验发现,对于Karpas-299细胞,最高的转染率可以达到65%以上.实验结果表明,细胞的死亡率和转染率受到金纳米微粒浓度、细胞抗原蛋白和类型的影响.     

油茶种子老化进程中质膜伤害的定量分析

油茶种子老化进程中脱氢酶活性和SOD活性与质膜相对透性,MDA,钾离子和可溶性糖之间呈显著负相关,脱氢酶活性和SOD活性与质膜相对透性,MDA,钾离子和可溶性糖的弹性系数均属于EP＜0,处于脱氢酶活性和SOD活性对这些生理指标的负效应阶段,弹性系数和相应的边际量因高温高湿和高温低湿的不同老化处理方法而呈较大差异,MDA的弹性系数差异最大。     

循环冷却水的复合式电磁灭菌阻垢系统

针对微生物和水垢对火力发电厂循环冷却水系统造成的危害,提出将高压低频脉冲和高频低压脉冲相结合的复合式电磁水处理新方法.通过分析高压低频脉冲和高频低压脉冲在水中产生的电磁和生化效应,推证了进行灭菌和阻垢的可行性.根据灭菌阻垢所需的各种电磁参数对高压低频脉冲和高频低压脉冲信号发生装置进行设计,并通过电磁仿真方法辅助处理腔形状的设计和改进.利用复合式电磁水处理实验系统进行模拟实验.实验结果表明:该系统能输出峰值达到7 kV的高压低频脉冲信号和峰值达100 V、频率在500 kHz～2 MHz之间可调的高频低压脉冲信号,且该系统对细菌的灭菌率达到91%,同时对化学垢的阻垢率达到71%.因此,该系统有望通过进一步研究达到工业水处理的标准.