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1.
《华东理工大学学报(自然科学版)》2016,(3)
采用表面引发原子转移自由基聚合反应,原位制备了聚乙二醇开管毛细管液相色谱柱,色谱固定相床超长的聚乙二醇分子在毛细管内壁形成散堆结构,极大地提高相比及样品容量,扫描电镜可观察到毛细管内壁形成的床层表面粗糙。在毛细管液相色谱模式下,4-羟基苯甲酸、苯甲酸、2,4-二羟基苯甲酸和苯的混合样品被用于评价其分离性能,结果表明,所制备的新型开管柱不仅保留了开管柱分析速度快的特征,也因其散堆结构较通常的开管柱提供更多的作用位点,还能有效改善分离性能。连续5次进样,4种小分子的混合物保留时间的相对标准偏差均小于2.5%,说明该柱的重复性较好。进一步将色谱柱用于混合蛋白质的分离,也取得了良好的效果。 相似文献
2.
就蛇毒蛋白质组学研究的主要方法、所取得的成就及存在的问题进行了综述.利用高通量质谱技术对蛇毒组分进行全方位研究,是近年来蛋白组学研究中的一个热点.蛇毒蛋白质组学研究包括粗毒分离、质谱分析及生物信息学鉴定三个部分.粗毒分离的主要方法包括双向电泳、凝胶过滤及反相-高效液相色谱;质谱分析的方法包括基质辅助激光解离-飞行时间质谱、液相色谱质谱联用、电喷雾离子化串联质谱和电喷雾离子化傅立叶变换离子回旋共振质谱;而利用MS-Fit或Mascot搜索引擎访问相应的蛋白质专门网站对质谱所获肽序进行查询则是生物信息学鉴定的主要方法.迄今,利用蛋白质组技术已经对游蛇科、眼镜蛇科、蝰科中的58个属100多种(亚种)蛇毒的毒物进行了研究,鉴定出了十多个蛋白质家族.这些结果不仅有助于增强人们对毒素进化与分化以及中毒机理的了解,并对新药设计中的先导化合物寻找具有重要意义.未来,蛇毒蛋白质组学研究在与高通量蛇毒组的绝对定量及所鉴定蛋白的功能表征有关的方法技术方面仍有待突破. 相似文献
3.
溶胶-凝胶环糊精衍生物CEC开管柱分离TATB炸药副产品 总被引:1,自引:0,他引:1
采用溶胶-凝胶法制备的2,6-二丁基-β-环糊精(DB-β-CD)开管毛细管电色谱柱,分离火炸药生产过程中的副产品甲苯富集物和丙酮富集物.通过考察缓冲液的pH值、物质的量浓度、有机添加剂的体积分数比等因素优化分离条件,实验获得了高达几百万塔板数/m的柱效和较高的分离度.通过与C18填充柱毛细管电色谱以及高效液相色谱分离同种样品的结果比较,从侧面论证了采用溶胶-凝胶法制备的2,6-二丁基-β-环糊精(DB-β-CD)开管毛细管电色谱柱分离火炸药生产过程中的副产品是行之有效的方法. 相似文献
4.
利用亲和毛细管电色谱整体柱对色氨酸对映体进行了手性拆分研究.利用溶胶-凝胶法制备了壳聚糖/硅胶复合基质毛细管整体柱,然后采用戊二醛交联柱上键合牛血清白蛋白(BSA)得到亲和毛细管整体柱,以毛细管电色谱(CEC)模式分离色氨酸对映体,考察了缓冲液pH、浓度及有机修饰剂含量对分离过程的影响.在缓冲液的浓度为20 mmol/L,pH 7.5时,色氨酸对映体分离效果良好,分离度为2.44. 相似文献
5.
《杭州师范大学学报(自然科学版)》2020,(3)
利用阴离子层析、凝胶排阻色谱和反相高效液相色谱从短尾蝮蛇毒中分离金属蛋白酶和磷脂酶A2,用蛋白印迹法检测两种组分的磷酸化修饰信号,结合LC-MS质谱鉴定并预测磷酸化修饰位点.结果表明,利用3种色谱法串联组合,最终分离获得两种条带单一且纯度高的短尾蝮蛇毒蛋白,经LC-MS质谱鉴定分别为蛇毒金属蛋白酶和磷脂酶A2.免疫印迹检测发现这两种蛇毒蛋白受到明显的磷酸化修饰,解析质谱图发现蛇毒金属蛋白酶有4个氨基酸位点受到潜在的磷酸化修饰(含1个丝氨酸和3个苏氨酸),磷脂酶A2仅有1个酪氨酸位点受到潜在的修饰.所得结果是磷酸化位点修饰抗体在蛇毒蛋白磷酸化修饰信号检测中的一次尝试,基于修饰位点的预测可为蛇毒蛋白功能受磷酸化修饰影响的研究提供基础. 相似文献
6.
北京鸭红细胞HMG非组蛋白的提取和分离 总被引:1,自引:1,他引:0
用0.15M硫酸铵从纯化的北京鸭红细胞核中提取HMG染色体非组蛋白,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳对HMG蛋白质进行鉴定和分子量测定。用CM-Sephadex C-25离子交换柱层析分离HMG蛋白质的不同组份(HMG1,HMG2a,HMG2b,HMG14和HMG17),并测定其氨基酸组成。用高效液相色谱(HPLC)的反相柱(RP)分离HMG蛋白质,得到较好的效果。 相似文献
7.
《科技导报(北京)》2010,(22)
<正>中国化学会将于2011年10月9—13日在大连召开"第37届国际高效液相色谱和相关技术会议及仪器展览会"。征文内容包括分离科学原理:理论模型,数据分析;液相分离技术的研究进展:塔技术和固定相,整体柱和小颗粒超压和高温色谱法,微型分离和微全分析系统,微流控、芯片和纳米技术、微型检测、电分离技术,毛细管电泳样品制备方法;联用分离: 相似文献
8.
用自行合成的双-[6-氧-(2-间羧基苯磺酰基-丁二酸-1,4-单酯-4)]-β-环糊精衍生物制备高效毛细管电泳柱,以此β-环糊精衍生物作为电泳手性固定相分离利多卡因、普鲁卡因、布比卡因,得到了最佳电泳分离条件.与空管柱分离效果相比,利多卡因、普鲁卡因分离度有所改善,但未达到基线分离;布比卡因在4 min内实现了手性异构体的分离,分离度达到14.71.实验表明:卡因类手性药物与键合在柱上的β-环糊精衍生物有一定的相互作用,并对自制的键合β-环糊精衍生物高效毛细管电泳柱进行了初步的扫描电镜表征. 相似文献
9.
高效毛细管电泳(CE)具有进样量少、分离效率高、速度快等优点,已成为适于元素形态分析的一种新型分离技术,特别对于环境和生物样品分析具有相当大的潜力.在铝的形态分析研究中,尤其是在人血清中铝的形态的研究中,多采用以高效液相色谱分离和原子光谱检测联用的技术,以毛细管电泳为分离手段的研究较少本文的目的是以合成的人血清溶液为研究对象,用高效毛细管电泳分离和氟化辅助电热蒸发-等离子质谱检测联用研究各不同铝的形态.优化了分离和检测条件,取得了较为满意的结果. 相似文献
10.
使用DEAE Sepharose CL-6B阴离子交换色谱、Sephadex G-25 凝胶色谱和Sephasil C18反相高效液相色谱等分离纯化技术,采用体外培养淋巴细胞增殖试验,从牛胎盘提取液中分离出了具有免疫调节活性的多肽。免疫调节多肽对淋巴细胞增殖的促进作用具有剂量依赖性。纯化后的免疫调节多肽经过毛细管电泳(CE)鉴定为单一组分。毛细管等电聚焦电泳(CIEFE)测定多肽的等电点是3.82。基质辅助激光解吸附飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定多肽的相对分子质量为2134。蛋白质测序仪测定多肽的序列为Tyr-X-Phe-Leu-Gly-Leu-Pro-Gly-X-Thr。 相似文献
11.
采用固相pH梯度等电点聚焦-SDS双向聚丙烯酰胺凝胶电泳对莽山烙铁头粗毒进行了分析,通过银染法显色,电脑软件识别出约40个蛋白质点.其中分子量超过130 kD的蛋白质点很少,分子量90 kD~10 kD的区域均有蛋白质点分布,分子量34 kD区域的蛋白质点较为密集,且它们的含量明显较高.从蛋白质点的等电点分布范围分析,偏于碱性端的蛋白质明显多于酸性端的蛋白质,且分布在中性偏碱(pH 7~8)的区域.质谱数据的数据库搜寻结果表明:莽山烙铁头蛇毒中含有类凝血酶组分、纤溶酶组分、血小板聚集蛋白、抗血小板聚集蛋白和平滑肌钙离子通道阻断剂等组分. 相似文献
12.
XIANG Kaijun ZOU Chunsen ZHU Zhiqiang TENG Maikun NIU Liwen & LIU Jing School of Life Science University of Science Technology of China Hefei China 《科学通报(英文版)》2003,48(19)
Local hemorrhage are common consequences of viperid and crotalid envenoming. Many experiments clearly demonstrated that local hemorrhage can be attributed to snake venom metalloproteinases (SVMPs), which comprise a series of zinc-dependent proteases of varying molecular masses[1,2]. More than 100 SVMPs, including the isozymes from the same species, have been isolated and the amino acid sequences of about 20 enzymes have been determined. They all contain a zinc-binding motif of HEXXHXXGX… 相似文献
13.
傅若农 《北京理工大学学报》1991,(2)
用臭氧作引发剂进行交联的SE—54弹性石英毛细管柱分离工业硝基化合物或生产废水中的硝基化合物.分离效能高,分析速度快.用10m长的毛细管柱可很好地分离MNT,DNT,TNT和硝基氯苯等异构体。 相似文献
14.
研究峨嵋双蝴蝶植物水提物的抗五步蛇毒作用.建立小鼠五步蛇毒中毒模型,观察小鼠的中毒表现,并统计小鼠的死亡率,比较小鼠组织出血、组织坏死及组织溃疡状况.结果发现,峨嵋双蝴蝶植物水提物给药组动物的死亡率较模型组的明显下降,局部和全身症状较轻,而且随着剂量的增加症状显著减轻,尤其是对于组织的保护作用比较明显.峨嵋双蝴蝶植物水提物具有抗五步蛇毒作用,能降低蛇毒毒性. 相似文献
15.
使用SE-30短毛细管柱、SE-54毛细管柱和新型的高分广液晶毛细管柱分离甲苯的硝基化合物、硝基氨基化合物和二氨基甲苯异构体.分离效能好、分析速度快,适于工业分析之用。 相似文献
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XIANGKaijun ZOUChunsen ZHUZhiqiang TENGMaikun NIULiwen LIUJing 《科学通报(英文版)》2003,48(19):2055-2060
Two cDNAs encoding hemorrhagic snake venom metalloproteinase acutolysin A and non-hemorrhagic metalloproteinase(BR)were cloned into the expression vector pET-22b,respectively,and the corresponding two recombinant proteins,A-22b and BR-22b,were produced in inclusion bodies in E.coli BL21(DE3).The reombinant proteins were then subjected to solubilization,purification and refolding in vitro.A-22b showed hemorrhagic activity and fibronectin.Natural autolysin A had both hemorrhagic activity and proteolytic activity toward these substrates.BR-22b showed the proteolytic activities toward fibrinogen,but no hemorrhagic activity.In addition,two chimeric genes,C1 and C2,were constructed and cloned into pET-22b,and the corresponding recombinant proteins,C1-22b and C2-22b,were also expressed in inclusion bodies.C1-22b involved N-terminal 110 amino acidos of BR and C-terminal 95 amino acids of acutolysin A,while C2-22b contained N-terminal 108 amino acids of acutolysin A and C-terminal 112 amino acids of BR. The biological activities of A-22b and BR-22b,respectively.Our results suggested that N-terminal major subdomain of a snake venom metalloproteinase might play a key role in hemorrhagic activity and have an appreciable effect on the selectivity for protein substrates. 相似文献
17.
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研究了以二苯并-14-冠-4为侧链的聚硅氧烷作固定液的毛细管柱的制备与应用.这种侧链冠醚聚硅氧烷是一类新型气相色谱固定液,对羟基化合物异构体具有好的选择性,可以很容易地涂渍在弹性石英毛细管柱上,柱效高,热稳定性好.30m长的毛细管柱可以很好地分离苯酚、甲酚、二甲酚及三甲酚十几种异构体,以及其他多种异构体。 相似文献
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就国内外主要毒蛇的蛇毒组分、对凝血系统的影响及蛇毒在医药领域的应用进行了综述.蛇毒的化学成分十分复杂,主要包括酶、神经毒性多肽、神经生长因子、膜活性多肽及其他生物活性肽,其中酶类包含多种与凝血系统、纤溶系统相关的成分.蛇毒在医药领域具有非常重要的作用,主要有促凝作用、溶栓作用、镇痛作用、降压作用和抗肿瘤作用. 相似文献
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建立毛细管气相色谱法测定几种中草药中啶虫眯痕量残留的方法.样品经甲醇超声提取、Florisil硅土层析柱净化后,采用不分流进样方式,DB-1弹性石英毛细管柱(30 m×0.25 mm×0.25 ?m)经柱程序升温技术,并用电子捕获检测器检测,该方法的线性范围为6.70 ? 10-4~1.50 mg/L,相关系数为0.999 1。检测限为6.0×10-4mg/L,最低检出量为6.0×10-10mg,被测样品中均含有不同程度的农药残存.本方法检测灵敏度高,重现性好,样品预处理净化效果好,可用于中草药中啶虫眯残留量的检测. 相似文献