β—glucuronidase基因在水稻植株中的表达

采用花粉管通道法，将带β－ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄａｓｅ（ＧＵＳ）基因的ｐＢＩ１２１质粒ＤＮＡ导入栽培稻农垦５８。用荧光法检测ＧＵＳ活性，证明ＧＵＳ基因在水稻转基因植株中得到表达。Ｄｏｔ ｂｌｏｔ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ的结果表明经花粉管通道途径导入的外源ＤＮＡ整合到了转基因植株的基因组中，本文还对转基因植株后代的各种变异进行了讨论。     

基因工程与外源DNA导入技术

基因工程是把目的基因与适当的载体相连接形成重组ＤＮＡ, 并引入到适当的寄主细胞中进行复制和表达; 外源ＤＮＡ 导入技术是将供体总ＤＮＡ的片段, 在自花受粉后一定时期内, 使其沿着花粉管通道或其他方法进入胚囊, 转化受精卵或其前后的细胞． 基因工程方法思路清晰、原理清楚、目的明确, 但操作繁琐, 费用高; 外源ＤＮＡ导入技术简便易行, 费用低, 但目的性不强, 工作量大． 如将两种方法结合使用, 可降低费用, 提高整合率． 综述了两种方法的研究进展情况及在实际应用中所取得的成果     

大豆DNA导入后的稻米粗蛋白与直链淀粉含量的相关性

以大豆为外源ＤＮＡ 供体,采用浸种及幼苗期浇灌法和花粉管通道法直接将大豆总ＤＮＡ 导入受体水稻,经常规栽培获得水稻后代种子⒚采用微量凯氏定氮法和Ｊｕｌｉａｎｏ 法分析水稻后代种子糙米的粗蛋白含量和直链淀粉含量,并对两者进行相关分析⒚结果显示：糙米的粗蛋白含量和直链淀粉含量呈负相关关系,相关系数ｒ＝ － ０．７６２,达极显著水平⒚由此推测将大豆ＤＮＡ导入水稻培育高蛋白稻米的同时,可降低稻米的直链淀粉含量,从而达到改良稻米食味品质的目的     

转几丁质酶基因烟草后代的遗传分析

本论文采用分子检测(PCR扩增、PCR-Southern杂交)与表型检测(接真菌实验、酶活力测定)相结合的手段，对花粉管通道法及载体法导入几丁质酶基因烟草后代的遗传表现进行研究。结果证明通过不同方法导入受体细胞基因组中的外源基因均能遗传给后代，并能在转化受体当代及后代中高效表达。但采用花粉管通道法导入的外源基因虽然能够遗传给后代，但分离比复杂，遗传规律性较差。而载体法导入的外源基因T1代x^2检测符合3：1的遗传分离比，遗传稳定性要好于DNA直接导入。因此，建立良好的遗传转化系统是外源基因稳定遗传和表达的前提。     

黄瓜外源 DNA 导入技术方法研究

依据黄瓜的花器结构及开花习性,研究了通过花粉管通径将外源DNA 导入黄瓜子房的方式以及DNA 溶液的浓度、用量、pH 值和黄瓜花粉粒的渗透压等因紊对导入效果的影响.采用花粉与DNA 溶液混合授粉和子房微量注射均可成功的获得10~(-2)～10~(-3)的高遗传转化率.证明了应用外源DNA 导入进行黄瓜分子育种的可行性.     

青菜花粉管通道法导入外源DNA的研究初报

采用花粉管通道法，将青菜株系７５Ｆ５、１４号大白菜、紫阳等三个品种的总ＤＮＡ及质粒ｐＡｃｔ１－Ｄ ＤＮＡ导入青菜６０５品系，收获青菜种子。种子发芽后分别提取约两周苗龄的小苗总ＤＮＡ，并经ＥｃｏＲⅠ酶切，以ｇｕｓ基因片段为探针做子杂交，证实了外源ｇｕｓ基因已整合到青菜６０５品系中；田间观察还获得了一株与供体大白菜花形相似的变异株。     

紫薇受粉习性及花粉管生长的研究

用脱色苯胺蓝对紫薇花粉和花粉管进行染色，在荧光显微镜下观察其自然条件下的受粉习性及花粉管生长行为，以确定花粉管通道的形成时期．结果表明，盛花期的紫薇在开花后1.5h内完成受粉，花粉落量多，受粉率为100％；开花后24h左右进行受精；单果种子数为36～50粒，认为可以用花粉管通道法转化紫薇，导入外源DNA的最佳时机为开花后24h左右.     

植物抗盐性及其遗传工程

从盐胁迫对植物遗传物质的影响、植物抗盐遗传和育种、与抗盐有关的基因的分离鉴定以及外源ＤＮＡ花粉管通道技术转化植物和抗盐性研究四个方面探讨了植物遗传工程与抗盐性研究的关系,为研究抗盐机理和选育抗盐植物提供理论基础     

作物外源总体DNA导入技术及研究概况

对国内外作物外源总体ＤＮＡ导入技术及研究进展进行了综述。介绍了ＤＮＡ的制备，ＤＮＡ浓度、纯度及活性的鉴定，外源总体ＤＮＡ导入的方法及后代鉴定等主要技术环节。总结了该项技术所取得的成就及应用前景。     

经大豆DNA溶液处理后选育的变异水稻基因组RAPD分析

利用花粉管通道法和浸种及苗期浇灌法,将供体大豆DNA直接导入受体水稻,获得两种水稻变异株系。采用RAPD技术对供体大豆、受体水稻和两种水稻变异株系的基因组进行了多态性分析。所用31种10碱基随机引物中有24种扩增出清晰的DNA条带。分析比较了4个样品DNA扩增条带的相似率。根据试验结果分析,外源大豆DNA导入受体水稻能引起后代基因DNA序列变化,扩大水稻的遗传组成;作者还分析了由外源大豆DNA导入引起受体水稻产生变异现象的原因。     

富钾植物DNA导入早稻变异后代的RAPD分析

应用花粉管通道法和浸种法将两种富钾植物空心莲子草和商陆DNA导入到不同的水稻品种中,结果在其后代产生了广泛的变异,并从中筛选出耐低钾的变异材料。应用PCR技术对其中耐低钾的4个变异材料进行了RAPD分析。结果表明,所用100个随机引物中有7个引物在受体和变异后代间扩增出了多态性产物。后代和受体的相似系数均在90%以上,而与供体的相似系数只有6%以下,其中有三个引物的扩增产物中出现了供体的特异性带。这说明空心莲子草和商陆DNA导入水稻后确实引起了水稻基因组结构的变化,同时也为变异后代所发生的生物学性状的改变提供了直接的分子证据。     

高粱总DNA导入春小麦新品系高分子量麦谷蛋白亚基的变化

通过花粉管通道法将高粱总DNA导入春麦甘麦8号、陇春13号和陇春10号,经过多代选择获得了5个稳定遗传新品系.在高分子量麦谷蛋白亚基分析中,甘麦8号后代89144的高分子量麦谷蛋白亚基发生突变,较其受体多了5 10亚基,而少了2 12亚基;其他几个转基因后代与其受体比较,高分子量麦谷蛋白亚基组成未发生变化;但是各亚基的相对质量分数有较大变化.高分子量麦谷蛋白亚基的组成和各亚基质量分数的变化直接影响小麦品质.本研究对外源总DNA花粉管通道法导入小麦在改良小麦品质方面的作用进行了讨论.     

导入野生大豆DNA小麦后代的农艺性状研究

用花粉管通道法将野生大豆总DNA导入小麦，获得了转基因小麦，其后代的农艺性状有较大的变化。田间实验分析了变异系小麦植株与对照植株在叶片的光合速率、蒸腾速率、叶面积及株高、穗粒、穗重等性状上的差异。t检验结果显示，变异系小麦在叶面性状及产量性状上的差异是显著的，外源DNA的导入改善了植物的农艺性状，并在后代中表达，为选育高产、优质的新小麦品种提供了依据。     

Maize transformation via pollen tube pathway and the inheritance of transgene in progeny

The herbicide-resistant gene als was introduced into maize inbred line Qi319 through pollen-tube pathway. The inheritance of transgene was studied up to 33 generation. Transformation was performed by applying plasmid DNA carrying solution on the severed styles after self-pollination, or just prior to selfpoll/nation. After herbicide screening, PCR and Southern blot analysis, seventeen plants were confirmed positive in TO generation, and sixteen of them were self-bred to construct family to 33 progeny. Through PCR analysis and herbicide screening in offspring, four lines were confirmed following a 3 : 1 Mendelian segregation ratio. In other lines the numbers of positive plants were lower than expected. Therefore, it is necessary to select large population in progeny to produce stable inherited lines when transgene was delivered by pollen tube method.     

中国鹅掌楸雄性生殖单位的二维结构

中国鹅掌楸花粉属二细胞型，观察了６枚在异己－北美鹅掌楸柱头沟中的花粉管。在花粉管进入柱头沟时，管长为花粉直径的４－１０倍期间，生殖细胞分裂形成两精细胞，同一花粉管的两精子在大小、形态上有明显差异、精子两形，两精细胞相互邻接，位于管的先端，两精子被营养细胞内质膜包围，大的精细胞通过细胞延伸乌黑营养核，同时部分地被营养核的裂片所包围，两精子和营养核形成的共同包装即为雄性生殖单位。败育花粉管中，精细胞几     

盐胁迫下小麦新品系89122的抗氧化酶类活性变化的研究

利用受粉后的花粉管通道将高梁ＤＮＡ导入普通小麦陇春１３号,在其后代中出现了广泛变异,从中选育出已稳定遗传的丰产、抗逆性强的新品系８９１２２。经大田和盐池鉴定,８９１２２的耐盐性明显高于陇春１３号,用ＮａＣｌ（０,０．１,０．１５,０．２,０．２５ｍｏｌ／Ｌ）处理８９１２２和陇春１３号幼苗７ｄ,测定盐胁迫后其幼苗中抗氧化酶类活性的变化。结果发现,转基因小麦８９１２２较其受体陇春１３号能维持较高的ＳＯ     

新鲜果蔬汁稳定性比较

探讨了新鲜番茄汁、西瓜汁、黄瓜汁、橘子汁、菠萝汁及胡萝卜汁的稳定性及稳定时间.通过分析各种果蔬汁的色泽、滋味、香气、酸值、澄清度在放置期间的变化.实验发现:各种果蔬汁在制备30 min后其色泽有较大变化,尤其是西瓜汁、桔子汁及黄瓜汁;在制备10 min后各种果蔬汁的滋味、香气持续下降,放置3 h后,黄瓜汁、菠萝汁、胡萝卜汁、桔子汁及番茄汁出现异味,放置1 h后西瓜汁出现异味;放置10 min后,各种果蔬汁的澄清度随时间增加持续下降;果蔬汁放置后期的实验显示,7 h后出现肉眼可见变质现象.实验表明,新鲜西瓜汁、黄瓜汁、番茄汁、胡萝卜汁、黄瓜汁及西瓜汁应在制作后30 min内饮用,以最大程度保留其风味和滋味,而不宜1 h后饮用.