SPF种鸡群的培育

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所利用中国 澳大利亚合作项目“SPF禽饲养预保种设施” ,将京白鸡BWE品系经疫病净化 ,生物学敏感性实验和选育培育试验等技术 ,用定期进行疫病监测并淘汰阳性鸡的方法 ,净化特定的病原和抗体。得出净化了禽白血病病毒等 18种特定病原和抗体 ,对新城疫病毒等 9种病原微生物敏感 ,建立了遗传性能稳定和生产性能良好的具有 7个家系的BWEL SPF种鸡群。已生产SPF种蛋5 0余万枚 ,SPF鸡近 2万只 ,大力支援了科学研究和生产和生物制品生产。该项目的完成是在国内首次采用国内普通鸡群 (京白鸡 )为原材料 ,经净…     

SPF鸡微生物质量控制标准与监测技术

SPF鸡及鸡胚被大量用于人和兽用生物制品的生产基质和质量检定材料,在农业科学、医学科学和生物制品等领域的研究、生产、检定工作中有非常重要的作用。本文总结了SPF鸡及鸡胚的微生物质量控制标准、质量监测技术,以及我国SPF鸡培育和产业发展概况。     

新城疫病毒TL1株的分离鉴定及部分生物学特性研究

新城疫是引起很多禽类发病并致死的一种烈性传染病．本研究通过对内蒙古分离株TL1株应用SPF鸡胚传代、电镜形态学观察、HA及HI试验、毒力鉴定、血凝解脱及血凝素热稳定性试验、动物感染试验等进行了研究。发现TL1株属于新城疫病毒强毒株,血凝素热稳定性较差,属快速血凝解脱型．     

鸡新城疫免疫防制探讨

鸡新城疫是由鸡新城疫病毒感染引起的鸡和多种禽类的一种急性、高度接触性传染病,感染禽多呈败血症经过.不同毒力的鸡新城疫病株感染,以及鸡只不同的免疫状态,鸡新城疫临床症状和病变有所不同.鸡新城疫主要依靠疫苗免疫接种预防.从鸡新城疫病毒的毒力、疫苗种类、免疫接种及影响因素、病原检测方法等方面对鸡新城疫免疫防制相关问题进行论述,旨在为鸡新城疫的有效防控提供参考.     

鸡传染性支气管炎病毒抗体胶体金免疫层析试纸条的研制

[目的]建立一种快速、灵敏的胶体金免疫层析法(Colloidal-gold immunochromatography assay),用以检测禽类早期感染鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)和监测IBV疫苗接种免疫水平.[方法]将重组IBV核衣壳(Nucleocapsid,N)蛋白包被在在试纸条检测线,羊抗兔IgG包被在试纸条控制线,用胶体金-兔抗鸡IgG偶联物作为示踪剂,检测血清中IBV抗体.[结果]制备所得的胶体金免疫层析试纸条与IBV抗体阳性血清反应呈阳性,与鸡新城疫病毒抗体阳性血清、鸡传染性法氏囊病毒抗体阳性血清、鸡毒霉形体抗体阳性血清和SPF标准鸡血清未发生交叉反应;当IBV抗体阳性血清以1:35比例稀释后,依然可以用该试纸条检出;该试纸条在60 d的保存期内重复性良好;以从不同养殖场采集到的鸡血清样本作为测试对象,比较该试纸条和进口 ELISA试剂盒的检测结果,两者符合率为97.44％.[结论]成功制备了检测耗时短、检测限低、特异性强、稳定性好的IBV抗体检测胶体金免疫层析试纸条,为鸡传染性支气管炎的早期诊断以及免疫监测提供了简便高效的技术方法.     

应用负压隔离器和SPF鸡制备特异性高免禽类抗血清

负压隔离器是目前国外广泛用于动物实验的先进设备。其优点是能保证实验结果的可靠性。提高实验水平并能防止污染环境。我国最近才从国外引进了这一先进设备应用于动物实验,取得了一些成果。我们应用负压隔离器和SPF鸡制备高质量禽类抗血清取得了成功,用12种禽类抗原测定了抗血清的特异性。结果表明抗血清的特异性和滴度均达到了设计要求。完全可以用于各和血清学的诊断和研究。     

SPF级实验动物在兽用疫苗检定中的应用

摘要: SPF级实验动物来源清晰,并且对它们携带的微生物进行严格控制,它们不仅应用在生命科学研究、生物制药等领域,而且在兽用疫苗检定等动物疫病防控中发挥了极其重要的作用。     

介绍SPF鸡用的鼻环

<正> 目前,世界各国所饲养的SPF鸡,绝大多数均选用轻型的来航鸡。这种鸡的体型小,采食量少,产蛋量高,可以获得很好的经济效益。我国在北京、山东、江苏与江西所养的SPF鸡,也都是来航鸡。轻型的来航鸡在饲养管理过程中,容易出现相互鹐啄的问题,尤其是在产蛋初期,经常遇到脱肛与鹐啄的现象,给生产造成很大的损失。在SPF设施内若发生这种情况,对生产的影响就会更大。在蛋鸡生产中,解决这个问题的办法就是对鸡实行断喙术,把鸡的喙切去一部分,防止其鹐啄。但目前,我国的断喙器的刀片质量不过关,在为产蛋鸡实行断喙时操作麻     

SPF鸡舍屏障设施最优化运行的自动化改装及研究

SPF鸡舍的净化质量和节能问题一直是困扰SPF鸡生产领域的难题,通过对鸡舍屏障设施自动化改装和研究,使达到净化指标的屏障设施更优化、更节能。     

北京实验动物研实中心SPF禽类单元开始产蛋

<正> 中澳技术合作项目北京实验动物研究中心禽类单元于1991年7月7日首次引进澳方赠送的SPF种蛋,经3周孵化出雏鸡之后,在中方科技人员的精心饲养下,于同年12月9日开始产下第一批SPF鸡蛋,监测人员进行了13种病毒检测,均末发现污染。 SPF鸡蛋是儿童麻疹疫苗的主要原料,我国自研制成功儿童麻疹疫苗后,一直使用     

浅谈禽病ELISA操作技术

在疾病监控方面,酶联免疫吸附试验(ELISA)技术是应用最为广泛的血清学检测技术,禽病ELISA抗体检测试剂已经大量应用到SPF鸡微生物学监测中。ELISA不仅操作技术上有一定的要求,而且影响因素也较多,如不注意有可能导致试验结果不准确。因此,将禽病检测过程中,ELISA操作各环节需注意的问题归纳总结,与各位同仁一起交流学习。     

SPF家兔的培育及植入肠道正常菌群后生长性能的观察

目的对普通级实验家兔进行剖腹净化建立SPF家兔种群,提高实验用兔的质量,满足科研、生产及检定工作需要。方法采用剖腹摘取子宫术,在无菌隔离器内以人工哺乳方法将仔兔培育成无菌兔,再将双岐杆菌等肠道正常菌接种到无菌兔体内,使其成为SPF兔;对SPF环境中植入肠道正常菌兔和未植菌兔离乳后生长性能进行观察比较。结果人工培育出的SPF兔,经微生物和寄生虫检测,符合国家SPF兔标准;植入肠道正常菌群兔体重与未植入肠道正常菌兔生长体重相比极显著增加。结论通过剖腹摘取子宫术,人工哺乳仔兔和植入肠道正常菌群的方法建立了SPF实验用兔种群。     

SPF家兔种群的建立

目的对普通级实验家兔进行了剖腹净化,建立我国SPF家兔种子核心群,使普通级兔子升级换代,以满足科研、生产及检定工作不断发展的需要.方法采用剖腹摘取子宫术,在无菌隔离器内以吮吸法人工哺乳仔兔,离乳后将正常菌群植入仔兔体内,并转入SPF屏障设施内饲养、繁殖.结果建立了具有100只种兔的SPF兔子核心群,兔群生长发育正常.经多次微生物检测,符合SPF标准.SPF兔群将作为建立SPF实验用兔生产群的核心种群.     

H5亚型禽流感病毒HA基因昆虫/杆状病毒系统的表达及对BALB/c小鼠的免疫保护

经RT-PCR扩增了禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1／96 H5N1亚型1．7kb HA基因的cDNA,将其克隆到pMD18-T中并测序。亚克隆到杆状病毒转移载体pMelBacA的蜜蜂蜂毒素分泌信号下游中,测序正确后与线性化的杆状病毒DNA(Bac-N-BlueTM DNA)共转染Sf9昆虫细胞。将重组杆状病毒感染HFive细胞,72h左右收获细胞,超声波裂解,SDS—PAGE结果表明HA基因在重组杆状病毒感染的HFive细胞中获得表达。蛋白胶薄层扫描分析显示:表达的HA蛋白占重组杆状病毒感染细胞总蛋白含量的17．1％。Western-blot 及血凝实验结果显示,表达的禽流感H5N1亚型病毒HA蛋白具有生物学活性。表达的H5 HA蛋白定量乳化后,皮下多点注射免疫SPF 级BALB/c雌性小鼠,免疫后产生了H5 HA特异抗体,并在三免前后达到并保持较高水平。用致死剂量的HPAIV H5N1攻击小鼠,免疫组小鼠提供了100％的保护力,而对照组小鼠先后发病且死亡:为研制禽流感H5N1亚型病毒亚单位疫苗,防制禽流感奠定了基础。     

IRM-2小鼠SPF核心保种群的建立

目的为建立我国SPF级IRM-2小鼠核心群,以满足科研、生产及检定工作不断发展的需要,对普通级IRM-2小鼠进行了剖腹净化。方法采用剖腹摘取子宫术,在无菌隔离器内操作、饲养和繁殖。结果建立了具有12只SPF级IRM-2小鼠核心群,种群生长发育正常。经2次微生物检测,符合SPF级标准。结论通过剖腹技术成功地建立了SPF级IRM-2小鼠核心保种群。     

SPF级实验小鼠4种致病菌多重PCR方法的建立及优化

目的 建立一种可同时检测4种SPF级屏障环境常见致病菌的多重PCR方法。方法 本研究针对鼠伤寒沙门氏菌invA基因、肺炎克雷伯杆菌khe基因、嗜肺巴斯德菌16SrRNA基因、铜绿假单胞菌ecfX基因序列分别设计合成特异性引物,构建可同时鉴别4种菌的多重PCR反应体系,优化后测定其特异性、灵敏性并人工模拟感染样本。结果 建立的4重PCR方法能对同一样品中的4种致病菌模板进行特异性扩增,无交叉反应;对4种目的菌的检测灵敏度为10-3ng/μL;也可从混合感染的病料中特异性地检测出4种致病菌。结论 本试验建立的多重PCR方法具有快速、简便、灵敏的特点,为4种致病菌的快速诊断和监控提供了有效的技术支持。     

鸭不同MHC单倍型对禽流感重组疫苗免疫效果的影响

目的不同品系的鸭对禽流感(AI)疫苗诱导的效价有差异,分析这种差异是否与主要组织相容性复合体(MHC)有关。方法用表达H5亚型禽流感HA基因重组鸭瘟活载体疫苗免疫抗原提呈相关转运体TAP基因等位基因型不同的4种SPF鸭,比较其血清HI动态变化。结果免疫后连续观察的9周中,B3群SPF鸭HI抗体效价始终显著高于另外3个群。结论鸭的不同MHC单倍型可能与AI疫苗的不同免疫效力相关。