~(60)Coγ射线对水稻种胚 DNA 合成影响的研究简报

DNA 在电离辐射生物学效应的原初机制中有特别重要的地位.晚近20年来在微生物和哺乳动物中对DNA 辐射损伤和修复过程的研究极为迅速,但对高等植物种胚DNA 辐射效应的研究报导较少.本文以标记化合物~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入水稻胚根DNA 中的量为指标,探索受照射种胚DNA 合成代谢变化,为辐射生物学理论与应用     

~(57)Co(钴~(57))-争光霉素掺入人食管鳞癌细胞株CaEs—17的增殖周期时相

我国自行筛选的抗肿瘤抗菌素-争光霉素与博莱霉素的理化性质基本相同。~(57)Co-争光霉素A_2+B_2混合品和A_5纯品掺入人食管鳞癌细胞株CaEs—17的放射自显影图表明~(57)Co-争光霉素(混合品和A_5)掺入到CaEs—17细胞核中,核仁掺入很少,胞质不掺入。这和博莱霉素与DNA的特异性结合、并与DNA相互作用、而不与rRNA、tRNA、血清白蛋白结合和作用的结果是一致的。从而在细胞内定位方面说明了争光霉素与DNA结合的特异性。通过~(14)C-TdR与~(57)Co-争光霉素同时掺入及先后掺入的双标记放射自显影图和显微分光光度计对标记和未标记细胞DNA相对含量测定等方法,证实了~(57)Co-争光霉素(混合品和A_5)掺入到含有G_1/G_0DNA含量的CaEs—17细胞中。     

~(99m)Tc—甲酯异丙异腈心肌灌注显象剂的研究

采用以α-氨基异丁酸为起始物制备甲酯异丙异腈的化学合成路线,并用自己合成的产物成功地制备了放射性~(99m)Tc-CPI标记化合物.通过聚酰胺薄片层析鉴定表明,~(99m)Tc-CPI的标记率及放化纯均在95％以上,产物无须分离,即可直接用于静脉注射.     

微量Se保护细胞膜和细胞内DNA免受~1O_2损伤的研究

本文利用亚甲蓝光敏化产生~1O_2,对~1O_2的荧光检测法做了研究;利用滤膜过滤法研究了硒化合物保护NIH小鼠肾细胞DNA免受~1O_2损伤的作用;利用~3H-TdR掺入法研究了Na_2SeO_3对~1O_2抑制Wistar大鼠骨髓细胞DNA合成的作用;利用TBA法检测细胞脂质过氧化作用,观察到Na_2SeO_3抑制~1O_2诱导的细胞脂质过氧化的作用.Na_2SeO_3起保护作用的最适宜浓度范围为0.01～1.00μmol/L,高浓度的Na_2SeO_3表现出毒性作用.     

~3H标记化合物显示细胞内大分子代谢动态过程问题研究

使用放射性同位素3H标记的化合物3H-TdR、3H-Urd、3H-Leu作为培养中的动物细胞生物合成的前体,定时对培养细胞做放射性检测,表明生物大分子合成随时间而上升.进一步研究表明,异三尖杉酯碱对生物大分子合成有明显的抑制作用.     

CHO M期同步细胞的研究

引言 1953年,Howard和Pelc以蚕豆根端细胞为材料,用同位素示踪方法摻入~(32)P到蚕豆根细胞DNA中,发现只有在DNA合成时才有~(32)P的掺入,而在DNA合成后到有丝分裂期之间有一间隙(gap)存在,此时~(32)P不能掺入,因此,首先提出细胞周期的概念。1959年Oastler和Sherman利用~3H-Td标记小鼠肠腺窝上皮细胞的有丝分裂象的方法测定细胞周期各时相的时间,为细胞动力学的研究提供了重要手段,他们的实验还确定了在DNA     

细胞体系和非细胞体系下对映-贝壳杉烷二萜化合物Rabdosin B对DNA损伤作用的研究

采用单细胞凝胶电泳法检测Rabdosin B在细胞体系下对人肝癌细胞HepG2 DNA的损伤作用,运用紫外光谱、圆二色谱和琼脂糖凝胶电泳法检测该化合物在非细胞体系下对小牛胸腺DNA空间结构的影响.结果表明,6~15μmol.L-1 Rabdosin B处理HepG2细胞24 h和48 h后,细胞DNA损伤率与对照组相比其差异极显著,并呈时间及浓度依赖性.在非细胞体系下,较低浓度(1~50μmol.L-1)Rabdosin B对小牛胸腺DNA有一定的损伤作用,表现为嵌插和解旋;而较高浓度(10~25 mmol.L-1)的Rabdosin B对pBR322 DNA有较强的切割作用.二萜化合物Rabdosin B对人肝癌细胞HepG2 DNA的损伤作用极可能是抑制HepG2细胞生长和启动细胞凋亡程序的直接诱因.     

低剂量软X射线对人外周血淋巴细胞DNA合成能力的影响

本试验用人血离体淋巴细胞培养和~3H 同位素示踪技术,探讨了软 X 射线对淋巴细胞 DNA合成能力的影响。试验表明,在22伦至440伦的剂量范围内,软 X 射线照射都可导致淋巴细胞 DNA 合成能力的下降。培养前照射和培养后48小时照射,细胞的 DNA 合成受抑率不一。结果表明,培养前(细胞密度较高)照射,细胞对射线的敏感度要高于培养后照射(~3H-TdR(~3H-胸腺嘧啶核苷)平均相对掺入率分别降为40. 58～70. 04%:82. 73～87. 32%);已启动分裂的、培养48小时后受照射的细胞,比未启动分裂的、培养24小时受照的细胞要敏感一些(~3H-TdR 平均相对掺入率分别为67. 52%:82. 88%)。受软 X 射线照射的淋巴细胞 DNA 合成能力的受抑率与前人用~(60) Co-γ射线和硬 X 射线相比,前者略高于后者,在低剂量范围内,R.B.E.约为1. 1～1. 3。     

红缘层孔菌多糖对小鼠核酸蛋白质合成及对肿瘤S-180病毒CBV_3、HSV-Ⅰ细胞增殖的影响

本文用放射性前体掺入法研究红缘层孔菌多糖对小鼠体内核酸及蛋白质合成的影响。结果表明,该多糖较明显地提高了[~3H-Letu]掺入正常小鼠血清蛋白及肝脏蛋白的速率,对部份肝切除小鼠肝脏合成蛋白质的能力也有显著的促进作用;同时,该多糖使[~3H-UR]掺入肝脏脾脏RNA的量对比照组分别增加了12％及26％,但对[~3H-TdR]掺入肝、脾DNA的量无显著影响。红缘层孔菌多糖分别与S-180肿瘤细胞、柯萨奇病毒(CBV_3)及Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-Ⅰ)进行体外培养,结果表明该多糖对三种细胞的增殖无显著影响。     

口服~(125)I-碘酚酸在小鼠体内的吸收、分布与排泄的研究

本文采用热液熔融法对碘酚酸进行碘-125标记,所得~(125)I-碘酚酸的放射化学纯度达98%,标记率为62%. 小鼠经口灌胃~(125)I-碘酚酸24小时内自尿、粪中分别外排18.65%与13.95%给药后三天内的总排出率为64.6%.在小鼠体内,放射性高度聚积在甲状腺中,胃肾、肾上腺及大网膜中次之,肝、心、肠、脂肪及脾中依次减少.     

用^211At和^131I标记蛋白质的研究

报道了砹—211和碘—131标记蛋白质的方法.通过过氧化氢或氯胺T直接氧化制备,使用凝胶色谱从反应产物中分离标记蛋白质,相对法比较放射性计数测定标记产率,过氧化氢适用于~(211)At标记蛋白质,氯胺T有利于~(131)I标记蛋白质.8次实验的结果表明,用过氧化氢氧化标记的~(211)At牛血清白蛋白产率96.4％,氯胺T氧化标记的~(?)I牛血清白蛋白产率66.1％.间接法标记蛋白质,放射性核素~(211)At同对氨基苯甲酸反应获得对—~(211)At—苯甲酸,经乙醚萃取和高效液体色谱分离,然后再偶联到免疫球蛋白或牛血清白蛋白上。动物实验结果表明,此种结合的标记蛋白质在体内稳定,标记率不低于初始~(211)At放射性活度的40%.     

EC109细胞株细胞周期DNA代谢和形态改变的研究

人食管癌细胞株 EC109以显微分光光度计测定癌细胞核 DNA 含量,以放射自显影测定细胞核摄取~3H-TdR 和扫描电镜检查细胞表面的超微结构.大多数 EC109瘤细胞间期细胞核的 DNA 含量增加,主要干系细胞 DNA 含量为2 C,属 G_1期,也可见低于四倍体(3 C),高于四倍体(>4 C).甚至多倍体(>8 C)的瘤细胞.~3H-TdR 加入培养基10分钟后,许多瘤细胞核有银粒出现(S 期细胞).大量细胞进入细胞周期反映其恶性程度高.扫描电镜可见 EC109在细胞周期不同阶段其细胞大小形状和微绒毛也不同.本文结果说明用细胞核 DAN 含量测定,~3H-TdR 掺入和细胞表面超微结构可测定肿瘤周期.也可用这些方法判定瘤细胞的恶性程度.     

生物素标记的PSTV互补DNA探针分子杂交的研究

用~(32)P标记的互补DNA探针进行分子杂交是基因重组和分子克隆中常用技术,然而由于~(32)P的半衰期短,从而为供应和保存带来不便,致使这一技术的应用受到一定限制。近年来国内外均十分重视研究应用非同位素标记DNA探针的技术。我们用Biotin—11—dUTP(Bethesda Research Laboratories)以缺口平移(Nick translation)标记了pST-B14和pST-B5 DNA中的PSTV cDNA插入顺序,制备出生物素标记的DNA     

BrdU及其单克隆抗体的应用

5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入DNA后,可用荧光染料或被荧光染料标记的抗BrdU单克隆抗体进行定量和定性测定。抗BrdU单克隆抗体的应用为细胞动力学、肿瘤学和遗传学上区别DNA合成细胞,测定DNA合成速度、顺序和部位提供了一个快速、敏感和精确的方法。     

感染日本血吸虫小鼠CD4~+,CD8~+T细胞凋亡相关基因转录水平

目的:探讨日本血吸虫感染过程中.宿主CD4~+和CD8~+T细胞凋亡的相关基因TGF—β(转化生长因子—β.Transforming growth factor—β)在转录水平上的变化.方法:用地高辛标记的探针作原位杂交.观察促凋亡基因TGF—β在CD4~+和CD8~+细胞的TGF—βmRNA的表达随感染时间的延长而升高,感染后第10周起CD4~+T细胞TGF—βmRNA的表达明显高于CD8~+T细胞,差异有显著性意义.结论:在日本血吸虫感染过程中,CD4~+细胞凋亡比率超过CD8~+细胞.提示CD4~+和CD8~+细胞t比值下降与TGF—β基因的活化有关.     

~(125)Ⅰ-碘化标记抗CEA单克隆抗体的制备

本文报道了~(125)I-碘化标记抗癌胚抗原(CEA)单克隆抗体的制备方法。用氯胺-T法进行放射性碘化标记,标记率68.9—84.2%。产品经Sephadex G-50柱层析分离纯化后,放化纯度达94.1%;若使用前再通过凝胶过滤一次,能达到更高的纯度。产品能保持良好的免疫活性和稳定性,并已用于免疫放射测定法(IRMA)研究中,亦得到了较满意的结果。     

DNA分子标记在猫科动物系统发生关系研究中的应用

DNA分子标记的广泛应用,使得系统进化、生物地理、群体遗传及人类学等领域的研究得到前所未有的发展.猫科动物分子系统发育关系的重建是目前猫科动物DNA研究的主要方向,进而可以从DNA分子水平上研究猫科动物的进化过程及系统发育关系的本质.本文对DNA分子标记在猫科动物分子系统学中的部分研究成果做了概括.     

一种新型抗癌放射性药物前体的设计与合成

设计并合成一种用于治疗肿瘤的放射性125I标记的药物前体： 2-（2,-磷酸化羟苯基）-6-碘-4-（3氢）-喹唑啉酮,并经荧光光谱、FTIR、MS和NMR确证了目标化合物的结构.在碘标记当中,使用双(三丁基)锡来活化标记困难的有机分子,方法操作简单,定位准确,结果证明有用.     

四异硫氰基哌啶氧自由基对白血病L7712型细胞增殖和代谢的影响

用细胞培养~3H-TdR掺入法,证明四异硫氰基哌啶氧自由基对白血病L_(7712)型细胞的增殖有明显的抑制作用。吉姆萨染色低渗法,发现4μg/ml上述自由基能明显降低培养24小时L_(7712)型细胞的有丝分裂指数。用~3H-TdR,~3H—Urd和~3H-Leu体外掺入,滤膜处理和液内测量技术,发现上述自由基能明显地抑制L_(7712)型细胞DNA,RNA,和蛋白质的合成。     

小鼠脾细胞DNA合成实验技术及其影响因素的研究

本文以测定氚化胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入新鲜制备的离体的小鼠脾有核细胞DNA的方法,来判断细胞DNA合成能力,并对影响脾细胞DNA合成的某些基本因素的作用进行了研究。研究表明,2毫升pH7.4的Eagle培养液中含4×10(?)个脾有核细胞时,加入1.2微居里~8H-TdR(比活度为5居里/毫摩尔),持续作用4小时,可获最佳实验结果。植物血凝素(PHA)和小牛血清在此实验中可以不用。