固定化双酶体系（葡萄糖淀粉酶—葡萄糖异构酶）的性质研究

采用大孔型阴离子交换树脂吸附与戊二醛交联法相结合,制备固定化双酶.该酶是将葡萄糖淀粉酶(GA)和葡萄糖异构酶(GI)同时固定在同一载体上,其酶作用的最适pH为6.8,最适温度为55℃,最适底物浓度为15％,热稳定性在50℃以下较稳定.     

明胶—戊二醛固定化双酶体系的研究

采用明胶包埋、戊二醛交联相结合的方法制备固定化葡萄糖淀粉酶—葡萄糖异构酶双酶体系.该酶制备的最适条件是温度50℃pH值6.5.该酶反应的最适温度为50℃,最适pH为5.4,最适底物浓度为15％,热稳定性在50℃以下.     

碱性ABSE接枝淀粉固定化葡萄糖异构酶

以2'-氯乙基二乙胺盐酸盐（DEAE）为载体修饰剂,对β-硫酸酯乙砜基苯胺（SESA）为载体活化剂,制备多孔球状碱性氨基苯磺酰乙基接枝淀粉（ABSE接枝淀粉）载体,采用重氮化方法固定化葡萄糖异构酶．测定DEAE基团量对固定化葡萄糖异构酶pH-活力的影响,同时对葡萄糖异构酶的最佳固定化条件和性质进行详细的研究．结果表明,DEAE基因虽然并没有使固定化异构酶的最适pH发生移动,但却使其加宽,于pH6仍保持最大活力85％．葡萄糖异构酶经固定化后pH稳定性明显提高,但是温度稳定性却有所下降．该固定化葡萄糖异构酶于4℃储存2个月,活力没有明显改变．     

分子筛固定化葡萄糖淀粉酶的制备

以改性分子筛作为固定化酶的载体,用固定化葡萄糖淀粉酶生产葡萄糖。一种新的基于多次吸附多次戊二醛交联的固定化方法增加了固定化葡萄糖淀粉酶的稳定性,另讨论了该方法的机理。制备的固定化葡萄糖淀粉酶在柱反应器中水解淀粉连续使用２２ｄ,产物ＤＥ值维持在９５左右基本保持不变。     

固定化葡萄糖淀粉酶的研究

本文报导了甲壳素—戊二醛固定化葡萄糖淀粉酶的一些研究结果,着重研究了葡萄糖淀粉酶与甲壳素的比例,戊二醛的最适浓度以及p~H值对固定化酶制备的影响因素同时,比较研究了固定化酶与自然酶的一些性质,结果表明两者的最适温度相同皆是50℃;固定化酶的最适P~H值高于自然酶,前者最适p~H为4.4,后者最适p~H为4.0.固定化酶与自然酶对热的稳定性无显著差异。     

底物扩散对分子筛固定化葡萄糖淀粉酶性能的影响

对分子筛固定化葡萄糖淀粉酶在固定床反应器中淀粉液化液的扩散和对固定化酶酶促反应的影响进行了研究;并与反应动力学模型相关联,较系统地探窿了底物溶液流速、底物溶液浓度、载体粒度、载体再造孔等因素对固定化葡萄糖淀粉酶活力的影响;提高了通过再造孔成型能够有效减小外扩散和内扩散的影响,显著提高固定酶的活性。     

多孔性甲基丙烯酸树脂的合成及葡萄糖淀粉酶的固定化

用悬浮聚合法合成了多孔性甲基丙烯酸树脂。用此载体比较了保护戊二醛法，重氮化法和叠氮法固定化葡萄糖淀粉酶的效果，并研究了二乙醇胺保护戊二醛活化载体，树脂多孔结构多数及不同悬臂长度等方面对固定化葡萄糖淀粉酶活力的影响。结果表明，用保护戊二醛法活化的树脂固定化酶效果较好。当戊二醛与二乙醇胺为４∶１（摩尔比），树脂孔径为５５２．１，比表面为２８．３ｍ￣２／ｇ孔容为０．６３５ｃｍ￣３／ｇ时，固定化酶的相对活力为５５．６％，而酶活回收率为２４．７％。     

固定化葡萄糖异构酶的制备和性质

引言酶是蛋白质,是具有高度专一性与高效率的生物催化剂。由于酶有容易失活,不能多次使用等缺点,因此使酶的应用受到限制。将酶固定在不溶性载体上,即制成固定化酶,则稳定性增加,并可反复使用。固定化酶技术已为许多国家研究和应用。由于酶的纯化比较麻烦,而且费用较高,近年来又发展了直接将酶固定在菌体内或将产酶菌体固定在载体上,即固定化细胞。使用固定化细胞或固定化酶,能达到同一目的,而前者可以最大限度地提高酶的效率,能降低成本,因此目前对固定化细胞的研究不断深入,品种也不断增加。葡萄糖异构酶可以把葡萄糖转化为果糖。许多国家为了解决食糖供应不足的困难,正在利用淀粉作原料,用葡萄糖异构酶进行转化,生产异构糖,这种糖含有45%的果糖和55%的葡萄糖,甜度与蔗糖相仿,类似蜂蜜香味,可以代替蔗糖用于食品工业。这种糖此蔗糖更     

磁场影响固定化葡萄糖异构酶活性的研究

采用丹麦Novo公司测固定化葡萄糖异构酶 (SweetzymeT)活力的反应体系 ,用半胱氨酸 -咔唑法评价酶的活性 ,研究了磁场在不同条件下对酶活力的影响。实验发现 :在不同磁化时间、温度、磁场强度和pH条件下磁化底物 ,使其活性增加可达 2 8 6 % ,并且具有可逆性 ,但磁化固定化酶或磁场作用于酶—底物反应体系 ,未见酶活力的明显变化。     

甲基丙烯酸-苯乙烯-顺丁烯二酸酐三元共聚物固定葡萄糖淀粉酶

利用自由基沉淀聚合反应合成了不同组成的、具有可逆溶解-沉淀性能的甲基丙烯酸-苯乙烯-顺丁烯二酸酐三元共聚物载体,并测定了其临界pH值(2.47～3.51).利用载体上的酸酐基团固定葡萄糖淀粉酶,得到了具有液相酶和固相酶两者优点的固定化酶.考察了单体组成、固定化反应时间对固定化酶酶活的影响和可回收利用性.固定化酶(湿)酶活可达2 347 u/g,经溶解-沉淀循环3次回收后的固定化酶酶活可保留73%.     

DEAE—纤维素固定化葡萄糖异构酶

DEAE—纤维素阴离子交换剂经预处理,再用磷酸缓冲液平衡,然后加入葡萄糖异构酶溶液,搅拌吸附半小时.把上清液滤去,得DEAE—纤维素—葡萄糖异构酶复合物,用磷酸缓冲液洗三次.每克固定化酶活性为5,000—6,000单位.如果适当增加酶浓度,或把异构酶初步纯化,DEAE—纤维素吸附葡萄糖异构酶的量可以增加,固定化酶活性能高达10,000单位/克左右.     

离子交换树脂固定接枝脂肪酶

 酶法是制取生物柴油的一种新型方法,而酶的重复利用率直接影响该法的运行成本.本文采用吸附法将碱性脂肪酶L4固定在4种不同树脂上,对比了利用不同树脂和在不同酶液浓度条件下的固定化效果,然后采用吸附-交联法将脂肪酶固定在树脂DK110上,考查交联方式和交联剂浓度对酶固定化的影响以及固定化酶的重复使用稳定性.结果表明：大孔型离子交换树脂DK110的固定化效果最好,酶液浓度对脂肪酶固定化影响显著.交联方式对固定化效果有显著影响,酶液先与戊二醛混合后加入树脂载体(JL1)所获得的酶活最大(340U/g),酶液、戊二醛与树脂载体同时混合(JL2)重复使用稳定性最好.该研究为固定酶法制取生物柴油奠定了基础.     

固定化葡萄糖异构酶的研究——Ⅰ萄葡糖异构酶固定化方法的比较

萄葡糖异构酶亦称木糖异构酶(E.C.5.3.1.5),它能将醛糖转化为相应的酮糖.因此将葡萄糖异构酶固定化后连续地使葡萄糖转变为果糖,对提高产品质量、降低酶的成本就具有较大的优越性.由于它在生产上不受地区和季节的限制,原料来源丰富,生产设备简单,故在六十年代末以来,受到人们的广泛重视.目前在国内已有十来个单位进行该酶的固定化技术的研究,在国外固定化葡萄糖异构酶已用于工业化生产.如日本参松公司采用白色链霉菌热固定法可反复使用七次;美国克林顿公司(Clinton Co.)采用DEAE纤维素吸附法酶的半衰期为16天左右;丹麦诺沃公司采用聚丙烯酰胺     

用蕉芋淀粉酶法制造果葡糖浆

本文研究了以蕉芋淀粉为原料,用淀粉酶和固定化葡萄糖异构酶生产果葡糖浆的各种最适条件,包括pH、酶浓度、底物浓度、金属离子、温度、时间等因素。结果表明,α-淀粉酶和葡萄糖淀粉酶水解蕉芋淀粉的葡萄糖值可达95一99%。固定化葡萄糖异构酶转化葡萄糖为果糖的转化率可达45-54%,其甜度超过同浓度的蔗糖。通过与木薯、甘薯淀粉比较实验表明,蕉芋淀粉是制造果糖的良好原料,而且,它在长江以南均可普遍栽培。     

大孔树脂固定化葡萄糖异构酶及其动力学研究

研究了用大孔径聚丙烯腈树脂固定化葡萄糖异构酶的方法及固定化酶的性质．固定化酶活力达到４．６２９６×１０－６ｍｏｌ·ｇ－１·ｓ－１左右．同时研究了固定化酶的反应动力学，测得其米氏常数Ｋｍ＝６．００ｍｏｌ·Ｌ－１，最大反应速度Ｖｍａｘ＝１．４０×１０－５ｍｏｌ·ｇ－１·ｓ－１．     

低温辐射聚合固定化葡萄糖淀粉酶的研究

研究葡萄糖淀粉酶与α-甲基丙烯酸-β-羟基乙酯单体的低温辐射聚合固定化,观察载体的微孔结构,确定单体浓度(%)在40—60、辐射剂量在5×10~5—1.2×10~6rad、聚合温度在-60—-70℃酶在载体上的担载量在40—70mg/g 之间,所制得的固定化酶的相对活力可达45%以上的最适宜条件,并对工业应用进行了模拟实验.     

固定化葡萄糖异构酶的研究——Ⅱ.固定化葡萄糖异构酶的性质

固定化葡萄糖异构酶能连续地使葡萄糖异构化成为果糖,生产葡果糖浆,其甜度近似于蔗糖,为生产食用糖源提供了一条新途径.它具有能反复使用,适于自动化、管道化生产,不会给产品带进杂质等优点.目前在国外已大规模投入生产。在国内也在葡萄糖连续异构化的扩大试验中取得了较为满意的结果。本文比较研究了固定化葡萄糖异构酶与自然酶的一些性质。因自然酶经明胶包埋、     

改性离子交换树脂固定化漆酶及其动力学性质研究

环氧基改性的丙烯酸系树脂含环氧基,环氧基可在温和条件下与蛋白质上的亲核基团氨基反应而实现其固定化.研究了环氧基改性的离子交换树脂固定化漆酶的最优条件和固定化漆酶的酶学性质,结果表明,固定化漆酶时,在硫酸铵浓度为1.5mol·L-1、加酶量0.2U·g-1、pH 6.5、温度35℃条件下固定3h,测得固定化酶活性最好,比活力为0.026U·g-1,活力回收率为3.67%;该固定化酶催化反应的的最适温度为45℃,最适pH 4.5,米氏常数(Km)为1.233×10-3 mmol·L-1.锰离子、铁离子和钙离子在4×10-3~4×10-4 mol·L-1浓度之间时对固定化漆酶活性有抑制作用,在4×10-5~4×10-6 mol·L-1浓度之间时有激活作用.     

三氯化钛活化氧化铝为载体固定化根霉葡萄糖淀粉酶的研究

用TiCl_3活化氧化铝为载体固定根霉葡萄糖淀粉酶,固定化酶的活力回收达35％、淀粉转化为右旋糖的DE值达97％以上,半衰期为433.6小时。其风干粉剂在4℃可贮存三个月以上、酵活保持不变。同时,固定化酶的最适pH范围,热稳定性和抗蛋白变性剂的能力均优于溶液酶。     

分子筛固定化葡萄糖淀粉酶性能的研究

研究了温度、pH值、底物流速、底物浓度、底物的葡萄糖当量值(DE)等因素对分子筛固定化黑曲霉葡萄糖淀粉酶水解淀粉液化液反应性能的影响规律,考察了固定化酶催化剂的寿命. 在适宜条件下,供给质量百分数10%的淀粉液化液,连续22 d可产生DE值95以上的糖化液,运转30 d,活力仅下降25%. 以DE值15的玉米淀粉液化液为底物,糖化液中葡萄糖的质量百分数可达97%以上.