光强对雨生红球藻生长的影响

采用BG11培养基,设置日光、500、1 000、2 000、2 500、3 000、4 000 lx的光照强度梯度,用分光光度法测定各组培养液叶绿素a的含量,研究光照强度对雨生红球藻生长速率的影响.结果表明,2 500 lx为雨生红球藻株的最适光照强度,其叶绿素含量随培养时间延长而增长,第8 d其叶绿素a含量达到最大值,之后呈现下降趋势.     

雨生红球藻的培养及虾青素的提取与检测

以雨生红球藻为原材料,通过对光照条件、培养液pH和温度等条件的优化确定雨生红球藻在改良后的BBM培养基中的适宜生长条件;采用研磨结合超声波破碎的方法对雨生红球藻进行破壁,利用乙酸乙酯、丙酮和70%乙醇分别提取雨生红球藻中的虾青素,并通过紫外吸收光谱、红外吸收光谱以及高效液相色谱对虾青素的含量进行检测分析,确定虾青素的最佳提取方法。结果表明:在pH=8.0的改良BBM培养基中,光照度为2 000~2 500 lx时连续24 h光照条件下雨生红球藻能够快速生长和繁殖,采用研磨法破壁后利用乙酸乙酯提取虾青素的提取率可达91.41%。本实验优化了雨生红球藻的培养条件,确定了虾青素提取的有效方法,为雨生红球藻的扩大生产及深入研究奠定了基础。     

雨生红球藻712株营养需求及其培养条件

运用细胞学计数和pH值测定法，研究了3种不同的培养基、维生素B12、氮源、磷源、乙酸钠对雨生红球藻712株(Haematococcus pluvialis 712)生长的影响，实验结果表明添加了维生素B12、乙酸钠及高浓度的氮源、磷源的BBM培养基，在较低的光照(2000Lx)与温度(24℃)下，可以较好地维持雨生红球藻712株的生长。     

雨生红球藻原生质体制备与再生育种

研究了高渗溶液组成及浓度、酶的组成与质量分数、预处理方法、温度和pH等因素对雨生红球藻原生质体制备与再生的影响.结果表明:选用细胞数约为106·mL-1的对数生长期细胞,于50 mmol·L-1EDTA和25 mmol·L-1 DTT缓冲液,30℃下恒温处理1h,再于质量分数2.0%蜗牛酶和质量分数1.0%纤维素酶,温...     

UV-B辐射对雨生红球藻生理特性的影响

研究了UV-B辐射对红球藻生长的影响.在培养的前8 d,藻细胞干质量、叶绿素a含量均升高,9 d之后均呈下降趋势.伴随辐射强度的增强,藻细胞叶绿素Fv/Fm值及细胞放氧速率下降,类胡萝卜素含量增加.     

雨生红球藻β-胡萝卜素酮化酶cDNA的克隆与序列分析

参照Kajiwara等人获得的β-胡萝卜素酮化酶cDNA序列设计引物，利用RT-PCR技术扩增雨生红球藻的β-胡萝卜素酮化酶cDNA的完整编码片段并进行了序列测定与分析．结果表明，所获得cDNA序列与Kajiwara等人报道序列具有96．4％的相似性，蛋白序列具有98．3％的相似性，说明所获得的cDNA序列确为β-胡萝卜素酮化酶的cDNA序列．     

雨生红球藻对紫外光处理的响应及高产藻株的选育

用紫外线连续两代诱变雨生红球藻出发株HP-IS,经筛选获得两个突变品种系HP-M1-1和HP-M3-1,与出发株相比,两个突变株的营养细胞个体较大,周质空间较宽,形成的大孢子较多。两个突变株生长速率较出发株的提高8.2%～11.8%。是青素累积能力明显增强,培养25天时的是青素累积量分别为35.28mg/L和38.05mg/L,比出发株的高75.5%～89.3%。     

雨生红球藻的培养及虾青素累积条件的探讨

探讨了雨生红球藻(Haematoccuspluvialis) 712株的适宜培养条件及藻体诱导累积虾青素的培养基条件.重点研究了温度、pH和光照条件对雨生红球藻营养生长的影响,以及NaNO3 、Fe2 + 盐和乙酸钠浓度对雨生红球藻诱导累积虾青素含量的影响.结果表明,2 4℃、10 0 0～15 0 0lx连续光照,pH8.0左右的生长条件适合雨生红球藻游动细胞增殖,使平均生长速率达到0 .2 5 2d-1.通过正交试验表明缺氮培养基对于雨生红球藻细胞累积虾青素最为有利,虾青素含量达到6 .72 μg·mL-1,而FeSO4和乙酸钠浓度对虾青素的累积无显著性的影响     

雨生红球藻提取虾青素不同机械破壁方法的研究

对雨生红球藻厚壁孢子细胞的几种常用机械破壁方法的工艺条件分别进行研究,得到高压均质法,超声波法和冻融法的较优工艺条件.并分别在上述几种机械破壁方法的最佳工艺条件下比较了几种不同破壁方法对破壁率和虾青素提取率的影响.结果表明,高压均质法最适合于雨生红球藻厚壁孢子的破碎和虾青素的提取.高压均质的优化条件为:40MPa,循环3次,室温,破壁率达到91.4%,虾青素提取率为28.0μg mg(细胞干重),比未经破壁处理的提取率提高了10.1μg mg(细胞干重),提高了56.3%.     

双抗体夹心ELISA检测禽流感病毒方法的初步建立

用饱和硫酸铵初步纯化的兔抗AIV-H9高免血清中的IgG作为包被抗体,利用抗AIV-NP-7B4单抗作为ELISA的第二抗体,建立了检测禽流感病毒(AIV)抗原的双抗体夹心ELISA方法. 经方阵滴定试验测定反应的最佳工作条件为:兔抗AIV-H9高免血清IgG包被稀释度为1: 8 000(浓度为3.531 ug/mL),抗AIV-NP-7B4单抗腹水最佳使用稀释度为1: 800,酶标二抗的工作浓度为1: 4 000. 与其他禽易感病毒(NDV、IBV、EDS-76V)等均没有交叉反应. 结果表明,本方法具有很高的特异性.     

ELISA检测姜片虫病患者抗体的研究

研究了姜片吸虫成虫冷浸抗原检测姜片吸虫病患者血清抗体的敏感性和特异性及其在流行病和临床上的应用价值．超声粉碎制备姜片吸虫成虫冷浸抗原．以评价ELISA法检测姜片虫病血清抗体的敏感性、特异性和交叉反应性．按常规ELISA方法操作,目视与酶标仪判断结果．普查2189人中姜片吸虫卵阳性者168例;168例中165例ELISA阳性,ELISA与改良加藤法的阳性符合率98．21％;健康居民血清147份,阳性6份,阳性率4．08％;与血吸虫病交叉阳性为9．38％,肺吸虫病交叉阳性为5．36％．姜片吸虫成虫冷浸抗原1：3500工作浓度包被酶标板,检测姜片虫病血清抗体具有敏感性高、特异强和交叉反应率低的特点．     

Preparation of monoclonal antibody based indirect competitive ELISA for detecting 19-nortestosterone residue

19-Nortestosterone (NT) has been illegally used in horse racing to boost physical performance, and in animal husbandry to accelerate weight gain. To monitor the abuse of NT, our goal was to develop a commercial enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) kit. For this purpose, hybridomas were prepared by fusing NS0 mouse myeloma cells with splenocytes isolated from immunized BALB/c mouse. Noncompetitive and competitive indirect ELISA were used to screen positive cell clones. To optimize the indirect competiti...     

两种方法检测汉坦病毒滴度的比较研究

【摘要】 目的：比较双抗体夹心ELISA法与直接免疫荧光(DFA）法在检测汉坦病毒灵敏度方面的差别。方法：用汉坦病毒76-118株感染Vero-E6细胞,取不同时间点的病毒感染细胞制备细胞爬片或细胞培养物冻融上清,分别用本室制备的抗汉坦病毒单克隆抗体标记荧光素或辣根过氧化物酶（HRP）建立直接免疫荧光法和双抗体夹心ELISA法检测上述细胞中的病毒抗原,并比较两者的检测灵敏度,用空斑形成实验结果作为金标准,以评价两种方法在检测病毒抗原灵敏度方面的差异。结果: 用两种检测方法测定不同时间点的汉坦病毒培养物抗原,双抗体夹心ELISA法不仅检出的时间早,而且其病毒滴度均较IFA法高（P＜0.01）。结论：ELISA法检测汉坦病毒滴度的灵敏度较IFA法更高,并且操作简单,可重复性好,便于大批量规模化检测,因此更适用于汉坦病毒的检测。     

烟支密度的微波检测研究

介绍了烟支密度的微波检测原理.基于微波的特性,当烟支穿过微波谐振腔时将导致腔体产生谐振频率的偏移和幅度的衰减,不同密度的烟支所导致的偏移和衰减不一样,通过测量这2个变量便可得到烟支的相关数据.实践证明,在一定条件下使用微波在线检测烟支密度是可行的.     

流式细胞仪检测线粒体膜电位方法的研究

通过流式细胞仪进行检测,研究选择每种检测线粒体膜电位(Δψm)荧光染料的适用条件.选用罗丹明123、Di OC6(3)、TMRE、JC-14种荧光染料,通过对紫外线诱导后细胞的线粒体膜电位进行检测,分析每种染料的检测条件.结果表明,罗丹明123检测到的Δψm变化较大,这可能与罗丹明123适用于检测细胞急性损伤中线粒体膜电位变化相关.通过比较实验方法,为将来采用流式细胞仪检测线粒体膜电位提供更准确的实验方法.     

人工介质富集微生物对藻类和藻毒素降解试验研究

采用人工介质富集微生物的方法对藻类和微囊藻毒素的生物降解进行了试验研究.中试结果表明:在水力停留时间6～7 d,源水叶绿素a为15.3～266.1μg/L条件下,人工介质对叶绿素a的去除率达59.4%.运用高效液相色谱(HPLC)对微囊藻毒素进行了检测,当进水总微囊藻毒素TMC-RR和TMC-LR分别为0.25～8.93,0.15～4.73μg/L,胞外微囊藻毒素EMC-RR和EMC-LR分别为0.13～0.68,0.02～0.11μg/L时,人工介质对TMC-RR,TMC-LR和EMC-RR,EMC-LR平均去除率分别为69.8%,93.7%,42.2%和68.4%.聚合酶链反应(PCR)电泳图谱发现,人工介质上富集有大量的假单胞菌属和芽孢杆菌属等溶藻细菌.通过人工介质富集微生物的方法可有效降解太湖水体中的藻类和微囊藻毒素.     

食酸戴尔福特菌USTB04生物降解微囊藻毒素的活性研究

云南滇池底泥中筛选了1株能够降解做囊藻毒素（Microcystins,MCs）的微生物纯菌种,经中国科学院微生物研究所鉴定为食酸戴尔福特菌USTB04（Delftia acidovorans）,该菌能在2d时间内将初始浓度分别为90．2mg／L和39．6mg/L的MC-RR和LR全部降解,日均降解能力分别达到45．1mg／L和19.8mg／L。进一步活性研究显示,添加外源含碳和含氮化合物虽然可以促进该菌的生长．但对MCs的降解过程没有明显的促进作用。各为1mg／L浓度下,金属离子Cu^2＋、Mn^2＋和Zn^2＋均对该菌降解MCs的过程没有明屁的促进作用,其中Cu^2＋还有一定的抑制效应。本研究对于丰富MCs生物降解理论以及去除水体中MCs的应用都具有重要意义。     

虾夷扇贝定向检测方法研究

吊耳法养殖虾夷扇贝需要在钻孔前将扇贝按同一姿势排成一列.机械定向方法易使扇贝受到振动、碰撞和边缘磨损.造成病贝、死贝.为此提出了一种新的方法,利用机器视觉识别扇贝耳部朝向.通过摄像头获取扇贝图像,采用计算机对输入图像进行预处理、图像分割,提取扇贝特征参数.通过轮廓提取、改进的随机Hough变换检测背缘线,进一步根据背缘与形心的相对位置,确定扇贝耳部朝向.试验表明,该方法检测速度快,正确率高,能够满足虾夷扇贝定向要求.摄像头与扇贝不接触.可以避免机械振动、碰撞对扇贝的损伤.