骆驼刺高效离体植株再生体系的建立

通过对络驼刺（Ａｌｈａｇｉ ｐｓｅｕｄａｌｈａｇｉ Ｄｅｓｖ）不同外植体来源、不同培养基及激素配比的比较,建立骆驼刺培养高效再生植株实验体系。表明骆驼刺下胚轴切段在含１．５￣２．０ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ和０．５￣１．０ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ的ＭＳ培养基中１００％诱导愈伤组织,在含１．５ｍｇ／Ｌ ６－ＢＡ和１．０ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ的ＭＳ培养基上愈伤组织分化成苗,转至含２．０ｍｇ／Ｌ ＩＢＡ和０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ的ＭＳ培养基上成根得到完整再生植株,组织学观察表明植株再生主要为器官发生途径,染色体稳定遗传。     

荞麦组织培养中的植株再生

用荞麦无菌苗的幼茎和幼叶作外植体分别接种在ＭＳ补加不同激素组合的培养基上培养获得再生植株。实验结果表明,适宜诱导愈伤组织的激素组合为２．４－Ｄ４．０ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ０．２ｍｇ／Ｌ,适宜愈伤组织生长的激素组合为２．４－Ｄ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ１．０ｍｇ／Ｌ。诱导芽的较适宜的组合为６－ＢＡ３．０ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ,不定芽接种到含ＭＳ＋ＩＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ０．１ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上就能生     

正交设计法在白三叶组织培养中的应用

以白三叶的叶片为外植体,采用正交设计法,对愈伤组织生长和细胞悬浮培养的培养基进行了优化筛选。实验结果表明,白三叶叶片愈伤组织生长的最佳培养基配方为ＭＢ＋０．５ｍｇ／Ｌ ２,４－Ｄ＋０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ＋１ｍｇ／Ｌ ＢＡ＋２ｍｇ／Ｌ甘氨酸＋１００ｍｇ／Ｌ肌醇＋３％蔗糖＋０．７％琼脂;细胞悬浮培养的最佳培养基的配方为ＭＢ＋４ｍｇ／Ｌ ２,４－Ｄ＋０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ ＢＡ＋２ｍｇ／     

甘薯毛状根植株再生研究

用发根农杆菌Ｒ１０００菌株感梁甘薯（渝薯３４品种）,获得转化毛状根,从毛状根中选择出了５个无性系,当毛状根培养在含有２ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋１ｍｏｌ／Ｌ玉米素的ＭＳ培养基上诱导出了愈伤组织,当愈伤组织培养在含有１ｍｇ／ＬＫＴ＋１ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋０．５ｍｇ／ＬＩＡＡ的培养基上,３周以后获得了再生植株,用随机及增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）分子标记检测出了再生植株的多态笥。     

球茎甘蓝花托花柄组织培养及其植株再生

球茎甘蓝花托、花柄在ＭＳ＋２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ１ｍｇ／Ｌ培养基上培养,诱导形成愈伤组织．愈伤组织在ＭＳ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ３ｍｇ／Ｌ的分化培养基上培养,能分化出芽．花托在附加６－ＢＡ和ＧＡ３的ＭＳ培养基上培养,能直接出芽．花柄在附加６－ＢＡ或６－ＢＡ和ＧＡ３的ＭＳ培养基上培养,能直接出芽．芽通过继代培养,能再生植株     

怀地黄离体培养再生植株及其生长调控

本文对怀地黄愈伤组织的诱导、分化和再生植株的生长调控进行了研究．结果表明：（１）６－ＢＡ１ｍｇ／Ｌ（单位下同）＋ＮＡＡ０．１的组合有利于叶片愈伤组织的形成，２，４－Ｄ２＋ＮＡＡ２的组合有利于根茎愈伤组织的形成；（２）诱导愈伤组织产生再生植株的最佳组合为６－ＢＡ１＋ＮＡＡ０．０１；（３）ＰＰ３３３对再生植株的生长调控具有良好的效应，ＰＰ３３３１处理后，再生植株生长健壮，根系发达，叶色浓绿．     

枸杞花药愈伤组织细胞悬浮培养与植株再生

采用枸杞花药进行离体培养,建立细胞系,诱导植株再生,结果在含不同激素的４种培养基上都诱导出愈伤组织,诱导率在１．７％￣１６．９％,愈伤组织在ＭＳ＋２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ的固体培养基上获得大量单细胞,在液体培养基中获得含有大量胚状体的愈伤组织块,收集悬浮培养物转移到ＭＳ＋６ＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ的固体培养基上,胚状体能够萌发形成大量绿色小芽,转入生根培养基（ＭＳ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ）中,２０ｄ后得到     

红三叶和白三叶愈伤组织的诱导和胚性细胞悬浮系的建立

以红三叶（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍｐｒａｔｅｎｓｅ）野生品种巴东红三叶的叶片为外植体,在ＭＢ－１至ＭＢ－９的固体培养基上诱导愈伤组织,筛选出最佳培养基是ＭＢ－９培养基．以白三叶（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍｒｅｐｅｎｓｅ）裁培品种“路易斯安娜”和“Ｈｕｃａ”的叶片为外植体,接种在ＭＢ－９固体培养基上诱导愈伤组织．愈伤组织形成以后,均在ＭＢ－９固体培养上继代培养３～４次后,获得胚性愈伤组织,然后转至ＭＢ＋３ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ＋０７ｍｇ／ＬＢＡ＋０２ｍｇ／ＬＮＡＡ＋２ｍｇ／Ｌ甘氨酸＋５００ｍｇ／ＬＣＨ＋３％蔗糖的液体培养基中,经强化培养,２个月后,获得胚性细胞悬浮系．实验结果表明,缩短换液时间,即每隔３～４ｄ换一次,可加快胚性细胞悬浮系的建立．     

雪兔子叶的组织培养及植株再生

以雪兔子无菌苗的幼叶为外植体,接种到ＭＳ补加ＮＡＡ（１．０－２．０）ｍｇ／Ｌ、６－ＢＡ（０．１－１．０）ｍｇ／Ｌ的培养基上诱导愈伤组织,其中以ＭＳ＋ＮＡＡ２．０ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ的诱导效果最好,经６周培养即可形成大量的黄绿色愈伤组织,诱导率可达１００％,经２－３次继代培养后,将生长发良好的愈伤组织转接到ＭＳ附加６－ＢＡ（０．５－２．０）ｍｇ／Ｌ、ＩＡＡ（０．０５－０．１）ｍｇ／Ｌ、Ｎ     

荞麦的组织培养及植株再生

荞麦（Ｆａｇｏｐｙｒｕｍ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ Ｍｏｅｎｃｈ．）无菌苗下胚轴切段在含不同激素配比的ＭＳ培养基上进行愈伤组织诱导,发现在 ２． ０ ｍｇ／Ｌ ２． ４－Ｄ与 １． ５ ｍｇ／Ｌ ６ ＢＡ组合时,可１００％地诱导出愈伤组织。愈伤组织在含 １．５ｍｇ／Ｌ ６ＢＡ和１．５ ｍｇ／Ｌ ２．４－Ｄ的激素条件下继代培养１代后转入含２ｍｇ／Ｌ ６ ＢＡ和１ｍｇ／Ｌ ＫＴ的 ＭＳ培养基上,计有８０％以上可分化出苗。转入０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ的 １／２ＭＳ培养基上则可诱导出根。研究建立了荞麦离体诱导高频率再生植株的实验体系。     

高粱(Sorghum bicolor (L.) Moench)未成熟胚乳培养的研究

高粱未成熟胚乳在含有 BA或 2 .4-D与 KT组合的培养基上诱导启动 .诱导形成愈伤组织的适宜激素是 :2 .4-D4mg/L,BA1m g/L,NAA0 .2 mg/L 的组合或 2 .4-D2 mg/L,KT1m g/L 的组合 .适宜的分化激素组合是 (1)2 .4-D0 .5 mg/L,NAA0 .2 mg/L,BA0 .7mg/L,KT4mg/L;(2 ) NAA0 .5 mg/L,ZT1mg/L;(3 ) 2 .4-D0 .5 m g/L,KT1m g/L.脱分化后的胚乳细胞 ,部分细胞进入分裂期形成愈伤组织 ,胚乳愈伤组织有较强的分化能力 .植株形成方式为器官发生 .     

高羊茅高频再生体系的建立

目的建立高频再生体系,为相关基因的转化提供良好的受体系统。方法以高羊茅(Fes-tuca.arundinacea)成熟种子为外植体,以MS为基本培养基,进行高羊茅胚性愈伤组织诱导、继代、分化及生根培养。结果初生愈伤组织在MS 2,4-D5 mg/L CH400 mg/L 蔗糖60 g/L 琼脂12 g/L的继代培养基诱导出体细胞胚后,在含6-BA2.0 mg/L NAA0.5 mg/L的MS培养基上分化形成丛生苗,分化率达78.9%;再生苗在1/2 MS NAA0.5 mg/L生根培养基上生根,生根率达100%。结论MS 2,4-D 9 mg/L为最佳愈伤组织诱导培养基,MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 0.5mg/L为最佳分化培养基,1/2 MS NAA0.5 mg/L为最佳生根培养基。     

镉对匍匐翦股颖成熟胚愈伤组织诱导及再生的影响

研究了不同浓度的镉离子对匍匐翦股颖愈伤组织形成、生长和植株再生的影响. 结果表明: 当培养基中镉离子浓度在2.50 mg/L 以下时, 愈伤组织的诱导频率高于对照, 并在浓度为2.50 mg/L 时高达83.3%, 说明低浓度镉离子对匍匐翦股颖愈伤组织的形成可能具有刺激效应; 随着镉离子浓度的进一步增加,  愈伤组织的诱导频率明显下降, 并在浓度大于50.00 mg/L 时完全抑制了愈伤组织的形成; 在愈伤组织生长初期(0~30 d), 镉离子浓度为12.50 mg/L 时, 愈伤组织生长形态最大, 随着愈伤组织继续生长(30~45 d), 低浓度(2.50 mg/L)的镉离子对愈伤组织生长的刺激效应强于更高浓度. 在植株再生过程中, 当镉离子浓度为1.25 mg/L 时的效果最佳, 再生苗生长最好.     

植物生长调节物质对华黄芪愈伤组织诱导、增殖及芽分化的效应

以华黄芪叶片为外植体,在附加不同浓度和比例的２,４－Ｄ与６－ＢＡ的ＭＳ培养基上,探讨植物生长调节物质对华黄芪愈伤组织诱导、增殖及芽分化的效应,并在愈伤组织增殖过程中,初步对愈伤指数与愈伤组织生长量的关系进行了比较,结果表明：在ＭＳ＋２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ０．３ｍｇ／Ｌ培养基上诱导率最高,且形成愈伤组织时间最短;在ＭＳ＋２,４－Ｄ０ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ０．３ｍｇ／Ｌ培养基上,芽的分化率最高;愈伤指数与“称重法”测定愈伤组织生长所得结果一致．     

醉蝶花的组织培养及其细胞遗传学研究

研究发现赤霉素对醉蝶花(Cleome spinosa Jacq.)种子发芽和幼苗生长有明显的促进作用，其中10mg／L浸种30min的处理对种子发芽和幼苗生长的促进作用最明显，发芽率达到80％．用不同激素组合诱导醉蝶花下胚轴和子叶形成愈伤组织，MS 6-BA0．5mg/L NAA0．5mg/L KT0．5mg／L中子叶的出愈率最高，达到100％．下胚轴出愈不及子叶，最高只有93％．MS 6-BA2mg／L NAA0．05mg/L适合于芽的分化，诱导率达到100％．以醉蝶花幼芽为材料，用常规染色体制片方法确定醉蝶花体细胞染色体数目2n=20．     

毛花猕猴桃愈伤组织诱导与植株再生

从毛花猕猴桃（ＡｃｔｉｎｉｄｉａｅｒｉａｎｔｈａＢｅｎｔｈ）田间生长的茎段、种子无菌条件下萌发的下胚轴及试管苗的茎段和叶片得到愈伤组织。田间来源的茎段诱导愈伤组织较难，愈伤组织生长缓慢；下胚轴及试管苗茎段和叶片容易产生愈伤组织，愈伤组织生长旺盛。消毒时间、接种方法、基因型和培养基都可能影响到田间来源的茎段愈伤组织产生。在ＭＳ附加玉米素或６－苄氨基嘌呤（ＢＡＰ）的培养基上下胚轴来源的愈伤组织不经转代即分化芽和根。试管苗茎段和叶片在附加玉米素或Ｎ－（２－氯基－４－吡啶基）－Ｎ′－苯基脲（ＣＰＰＵ）的ＭＳ培养基上培养一代也分化出芽、试管苗茎段在附加０．００２５ｍｇ／ＬＣＰＰＵ和０．１ｍｇ／Ｌ吲跺乙酸（ＩＡＡ）的ＭＳ培养基上产生愈伤组织、芽的分化和苗生长都较理想；试管苗叶片则以附加０．０２５ｍｇ／ＬＣＰＰＵ和０．１ｍｇ／ＬＩＡＡ或０．５ｍｇ／Ｌ玉米素和０．１ｍｇ／ＬＩＡＡ的ＭＳ培养基较好。当苗伸长至１ｃｍ或以上时切下，转入ＭＳ基本培养基（大量元素减半）上后可形成完整植株。     

葶苈子植物愈伤组织诱导及植株再生的研究

对葶苈子植物 :葶苈 (Drabanemorosa)、印度菜 (Rorippaindica)及北美独行菜(Lepidiumvirginicum)愈伤组织的诱导、分化、再生苗的生根进行了研究。结果表明 :(1)在基本培养基为MS ,附加 6 -BA 0 .5mg/L +NAA0 .5mg/L的培养基上三种植物均能产生愈伤组织 ,其出愈率达 10 0 % ,而且 2 0 %的外植体具有一次成苗的能力 ;(2 )在愈伤组织的分化中 ,6 -BA1mg/L +NAA 1mg/L的激素组合是最佳的 ,其分化率为 10 0 % ;(3)无根苗生根的培养基为MS + 0 .5mg/LNAA ,生根率为 90 %