姜黄素通过调控miR-29-3p和TLR4/NF-κB信号通路改善肾间质纤维化

为探究姜黄素通过调控miR-29-3p的表达和Toll样受体(TLR4)/核因子κB(NF-κB)信号通路发挥抗炎及抗纤维化的作用,通过转化生长因子β1(TGF-β1)诱导建立肾间质纤维化细胞模型,采用MTT法和流式细胞术分别测定姜黄素对细胞增殖活性和细胞凋亡率的影响,以酶联免疫吸附法(Elisa)和免疫印迹(WB)分别检测姜黄素和miR-29-3p mimic对人肾皮质近曲小管上皮细胞(HK-2细胞)上清液肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)分泌水平的影响以及Ⅰ型胶原(COLⅠ)、Ⅲ型胶原(COLⅢ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和NF-κB/TLR4信号通路相关蛋白的表达情况,用RT-PCR法检测miR-29-3、Ⅰ型胶原蛋白α1链(COL1A1)和Ⅲ型胶原蛋白α1链(COL3A1)的表达水平。研究结果表明,与模型组相比,当姜黄素浓度为10μmol/L时可显著抑制TGF-β1诱导的肾间质纤维化细胞过度增殖,提高其凋亡率(P<0.05),抑制α-SMA (P<0.05)、COLⅠ(P<0.01)、COLⅢ(P...     

翘嘴鳜miR-146a在胚胎发育过程中的表达及温度对其表达的影响

为了解翘嘴鳜胚胎发育中miR-146a的表达规律以及温度对miR-146a表达的影响,将翘嘴鳜受精卵分别在22℃和25℃水温下孵化,并利用实时荧光定量方法检测miR-146a在各个发育阶段的表达.结果显示,在22℃孵化时,miR-146a的表达在原肠期前处于较高水平且各时期表达没有显著性差异(P0.05),在尾芽期后出现显著性降低(P0.05),并在出膜时达到最低值;在25℃孵化时,miR-146a的表达直到神经胚期仍处于较高水平且各时期表达没有显著性差异(P0.05),发育进入尾芽期后表达显著降低(P0.05),在肌效期达到最低值;miR-146a在25℃水温孵化时的表达较22℃孵化同时期的表达都出现显著降低(P0.05).研究表明,miR-146a可能主要在胚胎发育后期起到调控胚胎发育的作用,在尾芽期后通过下调表达来促进胚胎的发育;并且温度能影响miR-146a的表达,温度升高会降低miR-146a在胚胎发育各个时期的表达,将有利于胚胎的发育.     

TACE治疗对肝纤维化4项及肿瘤坏死因子-α影响的研究

探讨PHC经多次TACE术后肝纤维化的变化趋势及临床意义.选取30例PHC初诊病人进行3次TACE治疗,间隔6周,测定术前与术后血清中HA(透明质酸)、HPC-Ⅲ(人三型前胶原)I、V-C(四型前胶原)、LN(层粘蛋白)及TNF-α(肿瘤坏死因子-α)的含量.测量结果经统计学检验发现PHC病人在TACE治疗后HA、HPC-Ⅲ、IV-C、LN、TNF-α较术前明显升高,尤其在第3次TACE术后,可见上述指标含量升高明显(P0.01).4项肝纤维化指标中,以HA升高显著.重复进行TACE治疗PHC将加重肝纤维化,也使TNF-α含量增加,促使及加重肝纤维化的发生.提出在TACE治疗时应严格掌握适应症及提高操作水平,术后加强保肝及抗肝纤维化治疗.     

血清谷丙转氨酶对代谢正常肥胖个体发生非酒精性脂肪性肝病的预测价值

选取2006年4月~2010年1月期间在湖南省人民医院体检的人员中资料齐全、于1~3年后随访的1 367例,比较正常对照组、代谢正常肥胖(Metabolically Healthy Obese,MHO)及肥胖伴代谢综合征(MS)三组的血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)活性.将血清ALT活性正常的MHO(n=40)行四分位数分组(A、B、C、D组),比较4组MHO个体发生非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的发病情况,分析不同组别发生NAFLD的风险.结果:(1)MHO个体ALT水平低于肥胖伴MS者(30.71±19.59 vs 39.47±27.56,P0.05),高于正常对照者(30.71±19.59 vs 21.39±14.98,P0.05).(2)血清ALT活性正常的MHO个体发生NAFLD的风险较正常对照组明显增加(55%vs 5.71%,OR=20.167,95%CI:8.594~47.323;P0.05).(3)D组发生NAFLD风险明显增高(80%vs30%,OR=9.333,95%CI:1.193~72.991;P0.05).证明正常范围内较高活性的ALT可预测MHO个体中NAFLD的发生.     

有氧运动介导lincRNA-ROR靶向Wnt/β-catenin信号通路对脑缺血后神经血管单元的机制研究

为检测lincRNA-ROR在脑缺血后脑组织中的基因表达,并探讨有氧运动干预下lincRNA-ROR通过Wnt/β-catenin通路对脑缺血后神经血管单元的改善作用机制,构建慢性脑缺血模型小鼠20只,随机分成有氧运动跑台组(TM)和模型组(M),并设假手术组(SO),每组10只。通过神经行为学评估、ELISA酶联免疫法、Nissl染色及qRT-PCR技术研究有氧运动介导下小鼠脑缺血后神经血管单元的变化。神经行为学评估显示构模小鼠脑组织损伤得分显著增加(P0.01);运动干预后,脑组织损伤得分MTMSO。M组血清中NSE和S100B含量显著增加(P0.01); TM组BDNF含量上升(P0.01)。M组脑组织神经元结构出现大面积损伤,核固缩、空泡、核深染严重,TM组优于M组。相比M组,TM组中Wnt5a和β-catenin mRNA表达上升; GSK-3β及lincRNA-ROR mRNA明显下降(P0.01)。说明有氧运动干预能抑制linc-ROR高表达,促进Wnt/β-catenin信号通路发挥调控作用,调节神经元分化和微血管发生,缓解或减轻缺血后脑损伤症状。     

七氟醚调控MAPK信号通路参与不同孕期动物模型子代认知功能的研究

研究七氟醚调控丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对不同孕期大鼠子代认知功能的影响。将80只大鼠随机分为4个组别：对照组、孕早期(孕6 d)组、孕中期(孕12 d)组和孕晚期(孕18 d)组(N=20)。吸入七氟醚(3%),子代出生7 d后进行水迷宫、回避和避暗实验。通过TUNEL染色和蛋白免疫印迹检测海马神经元凋亡和P38 MAPK通路水平。实验结果显示：孕早期组的子代学习记忆功能显著低于对照组,回避时间和错误次数、海马神经元凋亡情况、P38 MAPK蛋白磷酸化水平显著高于对照组(P<0.05);孕中期组的子代学习记忆功能显著低于孕早期组,回避时间和错误次数、海马神经元凋亡情况、P38 MAPK蛋白磷酸化水平显著高于孕早期组(P<0.05);孕晚期和对照组各项指标比较差异无统计学意义(P<0.05)。研究表明,孕早期和孕中期吸入七氟醚会激活子代P38 MAPK通路诱导海马神经元凋亡,对子代认知功能产生负面影响。     

改良小柴胡汤剂对乙型肝炎临床疗效及血清肝功能相关指标的影响研究

研究改良小柴胡汤剂对乙型肝炎临床疗效及血清肝功能相关指标的影响,为临床的推广应用提供参考。选取2015年1月—2017年12月中国石化集团胜利石油管理局胜利医院收治的乙型肝炎患者114例作为研究对象,根据随机数字表法分为观察组和参照组,每组72例;参照组应用常规治疗方法对患者进行治疗;观察组在参照组的基础上应用改良小柴胡汤剂予以治疗,对比2组治疗后的临床疗效与血清肝功能相关指标。结果显示:(1)观察组的总有效率为98.6%,而参照组的总有效率为87.5%,观察组总有效率明显高于参照组,且差异具有统计学意义(P0.05)。(2)从治疗后的3个月开始2组研究对象的谷草转氨酶、谷丙转氨酶及总胆红素值均有明显下降,且观察组的各指标值的恢复情况明显高于参照组,差异均具有统计学意义(P0.05);同时对2组的病毒学指标HBV-DNA与HBeAg进行了比较,观察组的2项指标转阴患者的例数明显高于参照组,差异显著(P0.05)。(3)2组治疗前的各项肝纤维化指标均无统计学意义(P0.05);治疗后,2组的层粘连蛋白(LN)、透明质酸酶(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及Ⅳ型胶原(ⅣC)4项指标明显较治疗前显著(aP0.05),且观察组的各项指标均明显优于参照组,差异均具有统计学意义(b P0.05);(4)参照组治疗前后的CD+4、CD+8与NK免疫功能指标无统计学意义(P0.05);观察组治疗后CD+4与NK的值明显的升高了(P0.05),CD+8值明显降低(aP0.05);且明显的优于参照组(b P0.05)。(5)参照组发生不良反应9例,不良反应发生率12.5%;观察组发生不良反应4例,不良反应发生率为5.5%;观察组不良反应发生率明显高于参照组,且差异显著(P0.05)。改良小柴胡汤剂应用于乙型肝炎的治疗中提高了临床疗效,改善了血清肝功能相关指标和肝纤维化情况,提高了免疫功能,降低了不良反应发生率,最终提高了患者的生活质量,适合临床的推广与应用。     

乔松素对心肌缺血再灌注后血管收缩功能的影响机制研究

揭示乔松素对心肌缺血再灌注后血管收缩功能影响的潜在机制.培养大鼠主动脉平滑肌细胞(VSMC),通过PDTC介导ETB受体增加,分为对照组、模型组、乔松素组(高、中、低剂量).通过分子水平与蛋白水平检测分析血管内皮相关因子ETB、AT1R、BAX、NF-κB p65、ERK的表达,并通过对各实验组别细胞凋亡率、细胞存活率、细胞迁移数等分析研究其在细胞水平的变化情况.结果显示:乔松素高剂量组细胞凋亡率显著低于模型组与其他乔松素组(P<0.05);乔松素高剂量组细胞存活率与细胞迁移数显著高于模型组与其他乔松素组(P<0.05);乔松素高剂量组ETB、AT1R、BAX、NF-κB p65、ERK在mRNA水平和蛋白表达量方面显著低于模型组与其他乔松素组(P<0.05);在血液、脑组织和肝组织中模型组ROS表达量显著高于对照组及其他乔松素组(P<0.05).研究表明乔松素可能通过抑制血管内皮相关因子ETB、AT1R、BAX、NF-κB p65、ERK的表达使得平滑肌细胞引起的血管收缩能力减弱.     

槲皮素对脂多糖诱导人脑微血管内皮细胞的作用机制

为研究槲皮素对脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)诱导人脑微血管内皮细胞(Human brain microvascular endothelial cell,HBMEC)的作用机制,体外培养HBMEC,用LPS诱导HBMEC造模,将细胞分为正常组、模型组、槲皮素组及依达拉奉组,采用噻唑蓝法检测LPS诱导炎症因子变化的时间和槲皮素对HBMEC增殖能力的影响,用实时定量PCR法检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α) mRNA、趋化因子C—C基元配体20(chemokine C—C motif ligand 20,CCL20) mRNA和白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8) mRNA的表达,用酶联免疫吸附法检测TNF-α,CCL20和IL-8的含量,用蛋白免疫印迹法检测p-NF-ΚB p65,NF-ΚB p65,p-IKKα和IKKα的蛋白表达。结果发现,与正常组比,1 mg·L-1的LPS组细胞活力明显下降(P0.01);模型8 h组TNF-αmRNA,CCL20mRNA,IL-8 mRNA表达显著上升(P0.01);槲皮素各给药组(12.5,25,50,100,200,400μmol·L-1)细胞活力变化不明显。与模型组相比,200μmol·L-1槲皮素组的模型细胞增殖明显(P0.01);槲皮素组和依达拉奉组TNF-αmRNA,CCL20 mRNA,IL-8 mRNA表达和TNF-α,CCL20,IL-8的含量显著下降(P0.05);槲皮素组蛋白数量比n(pNF-ΚBp65)/n(NF-ΚBp65),n (p-IKKα)/n (IKKα)显著减小(P 0. 01),而依达拉奉组n (p-NF-ΚBp65)/n (NF-ΚBp65),n(p-IKKα)/n(IKKα)无明显变化。说明槲皮素具有抑制LPS诱导HBMEC的损伤作用,可能是通过下调IKKα/NF-ΚB p65信号通路减少炎症相关因子TNF-α,CCL20和IL-8的表达。这为槲皮素应用于脑血管病变引起的帕金森病临床防治提供了实验依据。     

游泳训练通过激活PI3K-Akt信号通路抑制2型糖尿病引起的心肌细胞凋亡

目的:通过建立Wistar大鼠2型糖尿病(T2DM)动物模型,观察T2DM大鼠心肌细胞凋亡及游泳训练对该凋亡事件的保护作用,并探讨其内在影响机制.方法:实验材料Wistar大鼠60只,造模完成后随机分成3组,1)正常对照组(CON);2) Diabetes模型组(DI);3)游泳运动组(DI+ SEX),每组15只.游泳训练共计8周.结果:T2DM造成心肌组织Bcl-2水平降低,Bax水平升高;线粒体内及胞浆蛋白中Bax/Bcl-2比值升高,促凋亡物质细胞色素c( Cyt c)向胞浆释放增多(P＜0.01);糖原合成激酶3β(GSK-3β)磷酸化水平升高(P＜0.05).另外,T2DM引起胰岛素受体亚型1(IR1)水平降低(P＜0.05),失活PI3 K-Akt信号级联.相对地,游泳训练可明显抑制Bax/Bcl-2水平升高及GSK-3β磷酸化水平(P＜0.05),显著性提高PI3K,Akt蛋白磷酸化及胰岛素受体IR1水平(P＜0.05).虽对IR2水平有所提高,但无统计学意义.结论:游泳训练能有效抑制T2DM引起的Wistar大鼠心肌细胞凋亡.其抗凋亡作用可能是通过,至少部分通过上调IR1受体水平,激活PI3K-Akt生存通路,下调其下游关键蛋白CSK-3β磷酸化水平而实现.这表明游泳训练可以有效对抗T2DM引起的细胞凋亡事件的发生.