HPLC法同时测定锡林郭勒产金银花中绿原酸与木犀草苷的含量

目的：建立同时测定锡林郭勒产金银花中绿原酸与木犀草苷含量的方法。方法：采用Agilent ZORBAX SB—C18色谱柱（250mm×4．6ram,5μm）,以乙腈-磷酸水溶液（0．10mol／L）为流动相进行梯度洗脱,流速1．0mL／min,检测波长：绿原酸327nm,木犀草苷348nm,柱温：30℃。结果：锡林郭勒产金银花花蕾中绿原酸含量达1．82％,木犀草苷含量0．125％,均高于2010年版《中国药典》规定含量。     

金银花中绿原酸含量测定和指纹图谱研究进展

通过对近几年来金银花中主要有效成分绿原酸的含量测定方法和药材的指纹图谱进行综述,为今后的深入研究提供参考。     

HPLC法测定金银花不同部位中木犀草素及其苷的含量

采用高效液相色谱法测定金银花不同部位(花,叶,茎的表皮和茎)中木犀草素及其苷的含量.应用Aglient Zorbax SB-C18色谱柱,以甲醇(φ甲醇=0.02%)-磷酸溶液(φ磷酸=50%)为流动相测定木犀草素,以乙腈(ρ乙腈=0.5%)(A)-冰醋酸溶液(B)按VA∶VB=1∶9,梯度洗脱至3∶7为流动相测定木犀草苷,流速0.3 mL/min,柱温30 ℃,检测波长350 nm.分析结果表明:木犀草素存在于金银花的花,叶和茎的表皮中;木犀草苷存在于金银花的花和叶中.该方法操作简便、结果准确、专属性强,可用于金银花植物中木犀草素及苷的含量测定.     

HPLC法同时测定忍冬的花、叶中木犀草苷和绿原酸含量

建立了HPLC法测定忍冬的花、叶中木犀草苷和绿原酸含量的方法。应用Shim-pack ODS色谱柱 (4.6×250 mm, 5 μm),乙腈/0.2 %甲酸水梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为350 nm。在此色谱条件下,各组分在30 min内均得到良好分离。用该方法测定了3个品种忍冬的花、叶中木犀草苷和绿原酸的含量,结果表明亚特、意大利和九丰一号忍冬叶中木犀草苷含量分别为5.856、2.454和4.633 mg·g^-1,明显高于花。     

基于UPLC方法同时测定准噶尔柳花中的芦丁、木犀草苷、绿原酸、槲皮素含量

利用UPLC法测定准噶尔柳花中的芦丁、木犀草苷、绿原酸、槲皮素含量。采用色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18 100 mm×2.1 mm,1.7 μm;流动相：乙腈（A） 0.2%乙酸水溶液（B）,梯度洗脱,流速：0.29 mL/min;检测波长：360 nm;柱温：30 ℃。实验结果表明,芦丁线性范围0.05~3.12 μg/mL（r=0.999 8）,平均回收率为99.9%,相对标准偏差为1.6%;木犀草苷线性范围0.03~9.00 μg/mL（r=0.999 5）,平均回收率为98.8%,相对标准偏差为0.8%;绿原酸线性范围0.01~5.00 μg/mL（r=0.999 7）,平均回收率为97.6%,相对标准偏差为1.7%;槲皮素线性范围0.001~0.050 μg/mL（r=0.999 8）,平均回收率为99.0%,相对标准偏差为2.0%。该方法准确可靠,重复性好,可以作为准噶尔柳花的质量控制依据。     

HPLC法测定仙桃草中芦丁、木犀草苷、木犀草素的含量

建立HPLC法同时测定仙桃草中芦丁、木犀草苷、木犀草素3种黄酮含量的方法.采用Venusil MP C18(2)色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长350nm,柱温为35℃.方法学验证结果表明,3种黄酮类化合物的分离度良好,且在各自质量浓度范围内线性关系良好,r≥0.999 1,平均加样回收率(n=6)在96.76%~98.03%,RSD为1.62%~1.93%.3种黄酮类化合物在不同批次仙桃草中的含量存在较大的差异,仙桃草中3种黄酮总量在373.458~673.413μg/g之间.由此表明,不同生产批次的仙桃草药材,其内在品质存在较大差异,本方法可用于仙桃草药材中多种黄酮类成分同步测定,同时可以为仙桃草的质量控制提供科学依据.     

HPLC法同时测定石韦药材中绿原酸、芒果苷和木犀草素的质量浓度

建立了一种反相高效液相色谱法,同时分离石韦药材中绿原酸、芒果苷和木犀草素,并测定其质量浓度.采用超声优化提取石韦的有效成分:Phenomenex Gemini 5 μm C18(150×4.6 mm,5 μm)色谱柱,甲醇-冰乙酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.8 mL/min;并用波长程序进行检测,柱温35℃,外标法定量.结果表明,绿原酸、芒果苷、木犀草素的线性范围分别为0.084～40.00,0.084～40.00,0.084～13.33 μg/mL(R＞0.999),平均回收率为96.3%～97.8%,相对标准偏差小于2.16%.     

黔产忍冬叶中木犀草苷含量测定

目的:通过对黔产忍冬叶中木犀草苷的含量进行测定,为拟定忍冬叶的地方标准提供依据。方法:采用高效液相色谱法测定忍冬叶中木犀草苷含量,色谱柱:Agilent ZORBAX SB-Phenyl(250 mm×4. 6 mm,5μm);流动相:乙睛-0. 5%甲酸梯度洗脱;检测波长:350 nm;柱温为35℃;进样量10μL,并记录相应的色谱图。结果:木犀草苷在进样量0. 1646～1. 6460μg,线性关系为y=2023. 8x-39. 58,R²=0. 9997,加样回收率范围为96. 89%～110. 52%,RSD=1. 39%(n=6)。结论:该方法精密、准确、快速、重现性好,通过方法学的系统考察,建立了测定忍冬叶中木犀草苷含量的方法,为忍冬叶药材的质量控制提供参考和依据。     

豫金银花指标成分的HPLC测定分析

采用高效液相色谱法测定豫金银花指标成分,分析密银花与封银花的差异及封银花不同部位的成分差异。结果表明,绿原酸含量:封丘红银花3.10%(对照)>封丘大毛花2.87%(p<0.05)>密县大毛花2.22%(p<0.01),木犀草苷含量:封丘红银花0.181%(对照)>封丘大毛花0.095%(p<0.05)>密县大毛花0.075%(p<0.05);封丘大毛花不同部位绿原酸含量:花蕾2.87%(对照)>叶0.84%(p<0.01)>芽尖0.67%(p<0.01)>枝0.61%(p<0.01),木犀草苷含量:芽尖0.488%(对照)>叶0.397%(p<0.01)>花蕾0.095%(p<0.01)>枝0.066%(p<0.01);封丘红银花不同部位绿原酸含量:花蕾3.10%(对照)>叶1.34%(p<0.01)>芽尖1.29%(p<0.01)>枝0.92%(p<0.01),木犀草苷含量:芽尖0.329%(对照)>叶0.299%(p<0.01)>花蕾0.181%(p<0.01)>枝0.063%(p<0.01)。豫金银花花蕾的指标性成分含量均高于药典规定的最低标准且质量较好,相较而言封银花的品质优于密银花,叶和芽尖可为金银花综合开发提供新原料。     

豫道地金银花化学指纹图谱研究

目的:建立河南道地金银花药材HPLC标准指纹图谱.方法:高效液相色谱法,色谱柱填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶,检测波长265nm,进样量10μL,流动相A为乙腈和流动相B为1%的醋酸水溶液进行梯度洗脱,流速为0.8mL/min.结果:该方法能够很好地分离河南道地金银花的各类成分;不同产地金银花药材指纹图谱相似度较好,建立了含有15个特征指纹峰的豫道地金银花标准指纹图谱;同时标定了绿原酸和木犀草苷的位置;HPLC标准指纹图谱具有良好的重现性和特征性.结论:本实验建立的金银花药材HPLC指纹图谱可用于对河南道地金银花药材的综合评价和质量控制.     

应用超声波法提取金银花中绿原酸

应用超声波法提取金银花中的绿原酸.采用紫外分光光度法测定不同提取工艺下制备的提取物中绿原酸的含量,并与传统的水提法、乙醇回流提取法比较,根据绿原酸的得率及抑菌效果确定金银花提取的优化工艺.实验结果表明,超声波法的绿原酸提取率高于水提法、乙醇提取法,但超声波法、水提法及乙醇提取法制备的绿原酸提取物对大肠杆菌的抑菌效果没有明显差异,其最小抑菌浓度(MIC)均为250μg/g.     

金银花中绿原酸的分离纯化

目的建立金银花中绿原酸的色谱分离纯化方法.方法采用亲脂性吸附树脂与葡聚糖凝胶色谱纯化技术,将其水提物经亲脂性吸附树脂柱色谱预分离后,0.1mol?L-1盐酸调节pH到4.0左右,葡聚糖凝胶sephadexLH-20精制纯化,洗脱溶剂为50%丙酮水溶液.结果产品经MS、红外、紫外和HPLC图谱鉴定,并与对照品比较对照,结果显示所得的绿原酸纯度>98%.结论该方法简单,重复性较好,可用于绿原酸单体成分的制备.     

金银花和金银木芦丁成分分析

观察金银花和金银木的生长特征,测定了它们的嫩芽、幼蕾、成熟花蕾和不同花色中的芦丁含量,发现其金银花的花期在5月1日～9月底;金银木的花期在4月14日-5月14日.金银花叶子中含2.108 5 g/100 g鲜叶,金银木叶子中含2.998 1 g/100 g鲜叶.若利用花期治病,金银木的花期刚好补足了金银花的空缺,都含有芦丁,且叶子的含量最高.     

金银花叶茎藤中黄酮与绿原酸同时提取分离工艺

超声辅助乙醇提取金银花叶茎藤中的绿原酸与黄酮,乙酸乙酯萃取分离黄酮与绿原酸,D101大孔树脂梯度洗脱绿原酸与黄酮,乙醇及正己烷分相法纯化黄酮与绿原酸.结果表明,乙酸乙酯萃取可将金银花叶茎藤中的黄酮与绿原酸较好的分离,经D101大孔树脂吸附、50%乙醇洗脱、浓缩过滤、沉淀用乙醇重结晶后得到的水溶型黄酮纯度达84.5%;经D101大孔树脂吸附、70%乙醇洗脱、浓缩干燥、pH值2.97条件下乙酸乙酯萃取、正己烷分相后,得到的绿原酸纯度达91.2%.方法已用于金银花叶藤中黄酮与绿原酸的同时提取、分离与纯化,结果满意.     

不同提取方法对金银花中绿原酸成分提取效果的影响

目的比较不同的提取方法对提取金银花中绿原酸的提取效果的影响,为金银花有效成分工业化提取提供选择依据。方法以水煎煮法、索氏提取法、醇提法、酸醇提取法、超声提取法等常见易行的几种方法对金银花中绿原酸进行提取,并以HPLC法对其含量进行测定。结果通过几种提取方法比较,以酸醇法提取率最高,索氏提取法提取率较酸醇提取法略低,但提取的杂质较少,综合考虑,以索氏提取法较优。结论索氏提取法提取率高且杂质少,操作简单,所需成本低,可用于工业化生产。     

苎麻叶中绿原酸的提取

研究了从苎麻叶中提取绿原酸的最佳工艺.在单因素实验的基础上,通过正交实验设计考察了提取溶剂的选择以及提取温度、料液比、提取时间和pH值等对绿原酸提取率的影响.得到的最佳工艺条件为:以pH=4.0,体积分数为70%的乙醇溶液浸提苎麻叶3次,料液比为1:10,提取温度为70 ℃,提取时间为2 h;采用该工艺,可使绿原酸呈分子形式被有效地浸出,绿原酸的提取率达83%.     

忍冬藤可溶性膳食纤维提取及性能分析

探讨纤维素酶法提取忍冬藤中水溶性纤维素的最佳工艺并对其性能进行分析。在单因素试验基础上,采用正交试验对提取工艺进行优化得到最佳工艺条件组合为p H=4.8,温度45℃,料液比1:12(g/m L),纤维素酶体积分数1.2%,提取时间6 h,浸提3次。在此条件下,水溶性膳食纤维的提取率为3.57%,所提取的水溶性纤维素持水力为6.1 g/g,膨胀力为5.3 m L/g,持油力为4.53 g/g,阳离子交换能力为0.58 mmol/g,DPPH自由基最大清除率为80.13%,具有较好的理化性能。研究认为,纤维素酶解法可用于提取忍冬藤中的水溶性膳食纤维。     

不同地区银杏花粉黄酮和内酯含量的差异性

以15个不同地区百年左右的银杏雄树花粉为材料,用高效液相色谱法(HPLC)检测了银杏花粉中黄酮和内酯的含量.结果表明:银杏花粉主要含有以山奈素为母核的黄酮醇苷,以槲皮素和异鼠李素为母核的黄酮苷的含量相对较少,银杏花粉总黄酮含量平均为20.44 mg/g;还发现银杏花粉中的内酯成分为银杏内酯A,其含量平均在2.22 mg/g;不同地区间银杏花粉之间的黄酮和内酯含量差异显著.相关分析表明,不同地区银杏花粉之间黄酮和内酯含量的差异与气候地理因子的相关性不显著.初步筛选出黄酮和内酯含量较高的重庆01、广德01、北京01、康县01等4个单株作为备选的优良单株.     

金银花U6启动子的克隆及转录活性分析

U6启动子是构建CRISPR/Cas9体系中驱动sgRNA转录的重要元件。利用聚合酶链式反应方法,从华金6号金银花中克隆到3种U6启动子,并分别构建5个不同长度的启动子驱动GUS的植物融合表达载体。以CaMV35S作为阳性对照实验,农杆菌作为阴性对照实验,采用农杆菌瞬时转化法对烟草原生质体进行转染,GUS染色后置于显微镜下观察原生质体的染色数量和效率。根据染色结果,成功筛选出Chr01 U6-F1这一高效转录的启动子,为后期开展金银花的基因编辑奠定了基础。