蛋白质组分离方法及其进展

介绍了新兴的蛋白质组学领域中较为常用的分离方法二维凝胶电泳、高效液相色谱和毛细管电泳及电色谱的基本原理．对其应用、改进和发展做了一些讨论．     

人参多肽的分离纯化

运用生物化学的技术和方法,以人参为原料,经乙醇提取后,采用大孔吸附树脂、离子交换、凝胶过滤等层析技术,分离纯化出一种人参多肽,经过HPLC鉴定其纯度为95%以上,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其分子量为3.5 KD到10 KD之间.     

天然抗冻多肽的制备、 分离及细菌低温保护活性研究

利用热水抽提法提取鲨鱼皮明胶,控制酶法水解条件制备天然抗冻多肽.以细菌低温保护活性为指标,筛选蛋白水解酶种类及酶解时间,利用Sephadex G-50凝胶过滤色谱、SP-Sephadex C-25强阳离子交换色谱等分离手段进行分离,得到细菌低温保护高活性组分.结果表明,酶解鲨鱼皮明胶得到高活性抗冻多肽的最适蛋白水解酶为酸性蛋白酶,酶解温度50℃、pH 3.0、酶/底物3 000 U·g-1、底物浓度3%、酶解时间1 h;经过Sephadex G-50凝胶过滤色谱、SP-Sephadex C-25强阳离子交换色谱等分离手段得到阳离子的P2组分,经过细菌低温保护测试,当浓度为500μg·mL-1时,大肠杆菌的存活率达到80.8%.分离得到的抗冻多肽具有较高的抗冻活性,可望应用于食品、医药等产业中.     

土壤中邻苯二甲酸酯的净化分离方法研究

确定了土壤中邻苯二甲酸酯的高效液相色谱分析方法。用石油醚／丙酮（Ｖ／Ｖ∶３／１）超声萃取土壤样品，微型硅胶柱净化预分离，浓硫酸纯化，最后用高效液相色谱紫外检测器检测土壤中的邻苯二甲酸酯，土壤中邻苯二甲酸酯的添加回收率在８８５％～１０５０％之间，检测极限在８～１３ｎｇ／ｇ之间     

分子印迹技术在多肽、蛋白质分离中的应用

介绍了分子印迹聚合物(Molecularly Imprinted Ploymer,MIP)在分离生物大分子——多肽、蛋白质等领域中的应用进展，及其发展前景。     

制备型高效液相色谱分离装置的研制

立足于国产材料和设备，成功地研制了一套较为实用的制备型高效液相色谱分离装置。根据不同的制备量和分离要求，该装置可以使用不同内径及不同柱长的制备柱，用于生化产品的制备分离，制备量可达数毫克至数百毫克。     

生物碱基的反相高效液相色谱分离及血浆分析中的应用

以含１０ｍｍｏｌ．Ｌ＾０１ＫＨ＠ＰＯ４（ｐＨ４．０）缓冲溶液作流动相，在ＹＷＱＧＣ１８柱上，反相高效液相色谱法同时分离胞嘧啶、尿嘧啶、尿酸、鸟嘌呤、黄嘌呤、胸腺嘧啶和腺嘌呤等七种生物碱基，并用于人血浆中胞嘧啶、尿嘧啶、尿酸的测定，结果回收率在９５．２％－１０４．７５之间。     

滇池蓝藻“水华”微囊藻毒素的分离和鉴定

滇池不同季节微囊藻水华的冻融藻浆注射小白鼠,其ＬＤ５０分别为４３２ｍｇ／ｋｇ３１３ｍｇ／ｋｇ,２８７ｍｇ／ｋｇ样品含肝毒素或微囊藻毒素（Ｍｉｃｒｏｃｙｓｔｉｎ－ＬＲ）毒素用ＨＰＬＣ进行分析制备,得到如下结果：Ａ样,Ｂ样和Ｃ样均含Ｍｉｃｒｏｃｙｓｔｉｎ－ＬＲ,此外,Ａ样中还含Ｍｉｃｒｏｃｙｓｔｉｎ－ＲＲ,Ｂ样含Ｍｉｃｒｏｃｙｓｔｉｎ－ＹＲ,Ｃ样含Ｍｉｃｒｏｃｙｓｔｉｎ－ＲＲ和Ｍｉｃｒｏｃｙｔｉｎ－Ｙ     

肠道菌群模式菌株的HPLC分离条件优化及其表征

采用高效液相色谱分别考察了肠道菌群模式菌株及各单菌的色谱行为,成功建立了HPLC分离分析肠道菌群模式菌株的最佳洗脱方法,即阶梯式梯度洗脱.结果显示,肠道模式混合菌株经过高效液相色谱分离得到5个明显的洗脱组分,分别为0.10 mol·L~(-1)(脆弱拟杆菌和金黄色葡萄球菌)、0.20 mol·L~(-1)(青春双歧杆菌和鼠李糖乳杆菌)、0.25 mol·L~(-1)(粪肠球菌)、0.30 mol.L~(-1)(奇异变形杆菌、克雷伯肺炎杆菌和产气荚膜梭菌)和0.50 mol·L~(-1)(大肠杆菌和产气荚膜梭菌)洗脱峰.色谱柱的上样浓度为培养菌液(OD600=0.576)的5倍时,其最大上样量为500μL,且方法分辨率高、重现性好、结果稳定.     

北冬虫夏草多肽分离纯化及活性研究

目的对北冬虫夏草活性多肽进行分离纯化,并测定其抗氧化活性.方法优选北冬虫夏草多肽的提取方法;通过体外抗氧化DPPH清除率测定北冬虫夏草多肽的抗氧化活性;通过大孔树脂HP-20对北冬虫夏草多肽产物进行分离纯化,并分别测定洗脱后各浓度产物的蛋白含量和抗氧化活性,经Tricine-SDS-PAGE电泳法初步鉴定北冬虫夏草中多肽的分子量.结果 Tris-HCl作为提取液时DPPH清除率最高可达88.68%;经大孔树脂HP-20洗脱并分离纯化后,25%浓度的乙醇溶液和去离子水可作为洗脱剂; Tricine-SDS-PAGE结果显示:北冬虫夏草中富含小分子肽.结论此研究确定了北冬虫夏草多肽的最佳提取工艺,提高了初步提取多肽的产量;北冬虫夏草中的多肽具有一定的抗氧化活性.     

青岛海葵强心活性多肽的分离纯化与氨基酸组成分析

青岛侧花海葵经组织破碎后，进行乙醇浸取和氯仿萃取，所得水相用超滤截取相对分子质量１００００以下的部分，冷冻干燥后用Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－２５去除素与无机盐，活性部分利用中压系统进行阳离子交换层析，得到两个活性多肽吸收峰。这两个峰经反相层析后得到了在三甲基甘氨酸ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳上显示单一条带的纯品，相对分子质量均在６０００左右，氨基酸组成结果表明，这些活性多肽与已经报道的Ａｐ－Ａ及Ａｐ－Ｂ     

利用高效液相色谱分离丙炔菊酯对映体的研究

丙炔菊酯 (商品名 :益多克 Etoc)是由菊酸和丙炔酮醇 ( parallethroionic alcohol)反应生成 ,菊酸有四种立体异构体 ( d-顺式、L-顺式、d-反式、L -反式 ) ,丙炔酮醇有 d-、L-丙炔酮醇和 L-丙炔酮醇两种对映体 ,其中 d-丙炔酮醇的 d-反式菊酸酯是生物活性最强的组分 .对丙炔菊酯及其手性中间体的研究一直受到人们的重视 [1～ 4] ,文 [4 ]发展了合成几种手性醇和酸的有效生化过程 ,我们联合利用有精密选择性的水解酶催化反应和对映体手性中心反演或外消旋化反应两种过程 ,提高了高生物活性异构体的产率 .由于丙炔菊酯不同异构体的生物活性…     

反相离子对高效液相色谱法分离乙醛酸衍生物机理的探讨

采用不同添加剂对高效液相色谱分离乙醛酸衍生物的保留行为的影响进行了考察。结果表明：分子中的各基团均可参与色谱过程的相互作用，色谱过程在一定程度上保持样品分子的离解形态；在同一色谱过程中，可同时存在不同的保留机制。     

海带中脱落酸的分离纯化及高效液相色谱分析

探索了海带（Laminaria japonica）脱落酸的分离纯化条件,获得最适分离纯化方法为：常温组织匀浆,80%甲醇溶液浸提,乙酸乙酯萃取,硅胶脱色和纯化.在此基础上,利用反向高效液相色谱的方法对样品进行定性定量分析,结果表明样品中含有脱落酸,含量为30.5-60.5μg/kg.这为海藻脱落酸的分离纯化及其活性研究奠定了基础.     

嘌呤类化合物的反相高效波相色谱分离及其在药物分析中的应用研究

本文报道以含１０ｍｍｏｌ／ＬＮａＨ２ＰＯ４—Ｎａ２ＨＪＰＯ４（ｐＨ８．２）缓冲溶液的甲醇—水（１０：９０，Ｖ／Ｖ）作流动相，在ＳｐｈｅｒｉｓｏｒｂＣ１８柱上．同时分离测定了黄嘌呤（Ｘａｎ．）鸟嘌呤Ｇｕａ，）、腺嘌呤（Ａｄｅ．）、茶碱（Ｔｈｅ．）和咖啡因（Ｃａｆ．）五种碱基．并用于药物中茶碱和咖啡因的测定，标准加入回收率在９５．６—１０３．５％之间．     

多肽研究进展

本文较为全面地介绍了近年来多肽研究领域的现状，内容主要侧重于不同来源多肽的分离、纯化、鉴定以及应用等方面的研究进展．     

高效液相色谱法分离和测定知母不同炮制品中萨尔萨皂甙元

首次用反相高效液相色谱法（ＲＰ－ＨＰＬＣ）分离和测定了知母不同炮制品中萨尔萨皂甙元，建立了中药中萨尔萨皂甙元分离、测定的色谱方法，色谱条件，ＯＤＳ柱，以甲醇为流动相，以ＲＩＤ－６Ａ型示差折光检测顺检测，本方法为知母不同炮制品的质量研究提供了科学依据。     

淮山水溶性多糖的提取与高效液相色谱分离的研究

采用正交实验法探讨淮山水溶性多糖提取工艺条件，结果表明，水提多糖最佳条件为料液比1：8，70℃下浸提3h一次，当浸提液浓缩6倍，可得到多糖的最高沉降率；碱提淮山多糖最佳条件为料液比1：10，提取时间8个小时，NaOH浓度1.25％．同时，用高效液相色谱检测碱提粗多糖可能含有鼠李糖、阿拉伯糖、果糖、葡萄糖和半乳糖．