ANXA2对肝癌细胞F-actin表达及细胞微结构的调节

为了研究ANXA2对人肝癌细胞F-actin表达的调节,通过siRNA技术抑制肝癌细胞SMMC-7721的ANXA2表达,以免疫荧光法观察了F-actin表达及细胞微结构的变化.结果显示:抑制ANXA2基因表达后,细胞聚合成束的F-actin明显减弱,并由聚集分布变成弥散分布,且细胞的伪足、微绒毛等微结构生长受到抑制.结果提示,ANXA2表达水平的变化可能改变了SMMC-7721细胞F-actin的表达、聚合、重排与分布,从而导致细胞的细胞骨架重建,进而引起细胞的运动力与形态发生一系列变化.上述结果对进一步阐明ANXA2如何影响F-actin的动态组装以及ANXA2在细胞骨架系统重塑过程中的作用机制等提供了证据.     

整合素α2β1对肝癌细胞粘附与趋化行为的影响

采用微吸管技术,研究整合素α2β1对肝细胞癌（HCC）细胞SMMC-7721与Ⅳ型胶原衬表面粘附力特性和该细胞对Ⅳ型胶原趋化行为的影响．观察Anti-α2、Anti-β1对SMMC-7721细胞与Ⅳ型胶原裱衬表面的粘附力的影响;采用双微吸管实验法,观察SMMC-7721细胞伪足形成过程以及Anti-α2、Anti-β1对SMMC-7721细胞伪足形成的影响．利用流式细胞仪对SMMC-7721细胞表面整合素α2、β1亚单位的表达进行分析．结果表明,SMMC-7721细胞与5μg／mL Ⅳ型胶原裱衬表面之间的粘附力为952±134（×10^-10 N,n=60）,加入5μg／mL Anti-α2粘附力减小到605±128（×10^-10 N,n=60）;加入10μg／mL Anti-α2时粘附力减小到579±57（×10^-10 N,n=50）．加入5μg／mL Anti-β1粘附力减小到449±119（×10^-10 N,n=60）;加入10μg／mL Anti-β1时粘附力减小到220±78（×10^-10 N,n=55）．双微吸管趋化实验表明：两侧微吸管加入相同浓度Ⅳ型胶原,细胞向两侧微吸管均有伪足形成;在此基础上,微吸管分别加入Anti-α2、Anti-β1的一侧,SMMC-7721细胞伪足生长曲线呈现明显的抑制,而未加入抗体的微吸管一侧与加入的对侧相比,该侧细胞的伪足明显增加．流式细胞仪分析表明,所研究细胞整合素α2、β1亚单位表达率达分别为23．17％和95．78％．上述结果表明,整合素α2β1是联系SMMC-7721肝癌细胞与Ⅳ型胶原裱衬表面粘附以及SMMC-7721细胞对Ⅳ型胶原趋化性伪足形成的重要受体基础．     

超氧化物歧化酶模型化合物对离体肝癌细胞的影响

探讨了外源抗氧化剂超氧化物歧化酶模型化合物MSOD(Cu2C21N14H27C13)对人肝癌细胞增殖的影响．采用离体培养的人肝癌细胞SSMC-7721细胞株,接种入96孔板,24h后加入MSOD模型化合物,采用MTT(methyl thiazolyl tetrazolium)实验,计算肝癌细胞生长抑制率;结果表明,不同浓度组的SOD模型化合物对肝癌细胞的增殖均有抑制作用,而且这种抑制作用呈时间和剂量效应．     

4种含RGD的短肽对细胞粘附作用的影响

从两方面对比研究了4种含Arg-Gly-Asp(RGD)的细胞粘附肽RGD,RGDS,RGD-(NH₂)₂即RGE-NH_{2和RGDS-NH2对细胞粘附的影响. 一方面研究了固定在聚乙交酯丙交酯共聚物（PLGA）膜上的4种细胞粘附肽通过其细胞定向作用对大肠癌细胞（HCT-8）和人成骨肉瘤细胞（OS732）细胞粘附性 的促进作用; 另一方面研究了外源性细胞粘附肽对HCT-8和OS732在纤维连接蛋白（FN）上粘附的竞争性抑制作用. 结果发现,除了RGD-(NH2)2,其他3种肽都具有明显抑制细胞粘附的作用且具有一定的浓度依赖关系,其中以RGDS和RGDS-NH2的能力最强,RGD稍弱. 对于HCT-8细胞,3种肽的最大抑制率分别为53.3%, 56.3%,37.5%;而对OS732细胞,3种肽的最大抑制率分别为50.9%,49.8%,34%.}     

脉冲电磁辐射对癌细胞的影响

通过对Hela细胞及艾氏腹水癌细胞进行电磁脉冲鼾，可以看到照射后HELA细胞较对照组有明显变化，且变化随照射时间的增加逐步显现、加强。艾氏腹水癌细胞经脉冲电磁场照射后摄取^3H-Td的量明显高于对照组，而且照射时间不同，对3h-tdr摄取量也不等。从而为电化学治疗癌病的理论研究提供科学的依据。     

抗坏血酸和亚硒酸钠对肝癌细胞逆转的研究

采用细胞倍增时间、分裂指数、生化变化和软琼脂克隆形成率等指标测定分化,研究了抗坏血酸和亚硒酸钠对人肝癌细胞逆转的作用.结果表明用抗坏血酸4mmol*L-1联合亚硒酸钠2μmol*L-1处理细胞后,细胞的生长率和有丝分裂指数都显著下降.一些与细胞恶性表型有关的指标,如细胞表面电荷明显下降,电泳率从1.74μm*s-1*V-1*cm-1下降到0.91μm*s-1*V-1*un－1,甲胎蛋白含量从331μg*g-1(蛋白)下降到90μg*g-1,γ-谷氨酰转肽酶活性从0.74U*g-1(蛋白)下降到0.19U*g-1.与细胞分化有关的指标,如酪氨酸-α-酮戊二酸转氨酶（TAT）的活性从14.7μmol*g-1(蛋白)升高至42.6μmol*g-1,软琼脂克隆形成能力下降94.7%.由此可见,抗坏血酸和亚硒酸钠联合能诱导肝癌细胞在分化,逆转肿瘤细胞的恶性表型.     

不同处理条件对细胞骨架形态的影响

从试验材料、抽提剂种类、抽提时间、抽提剂浓度、戊二醛固定时间5个方面对细胞骨架的显微观察结果进行了探讨。结果表明:大葱、小葱、韭菜可替代洋葱作为细胞骨架材料;以韭菜作为细胞骨架材料时,1%Triton X-100在25~30 min抽提杂蛋白的效果较好;Triton X-100浓度在1%~3%时能较清淅观察到细胞骨架;戊二醛固定时间在15~25 min时细胞骨架观察效果比较好。     

沥青与矿料粘附性的测定方法

探讨采用粘附功试验表征沥青与矿料粘附性的可行性,以润湿-吸附理论为基础,讨论了沥青与矿料的粘附性与粘附力的内在关系;分析了沥青矿料表面润湿性能对界面粘结强度的影响,提出了以粘附功作为沥青与矿料粘附性的表征指标,设计了以沥青表面张力γ以及沥青在矿料表面接触面θ为基本参数的试验方法;最后对微观分析和水煮试验结果进行了比较.结果表明,粘附功试验表征沥青与矿料粘附性是可行的,试验数据精确,可达到0.01×10-3 N/m.     

XTT-PMS法检测肝癌细胞的药敏性

目的 :建立检测肝癌细胞生长与药敏性的新方法。方法 :用XTT -PMS法检测肝癌细胞生长与药敏性。结果 :XTT -PMS法检测的适宜条件为XTT 0 2mg/mL ,PMS 5～ 5 0 μmol/L ,作用时间 2～ 6h。采用该法测定肝癌细胞药敏性的结果与MTT法相似。结论 :XTT -PMS法操作简单快速 ,测定结果准确可靠 ,可用于肝癌细胞生长与药敏性的检测     

银杏叶多糖对人脐静脉内皮细胞与HL-60细胞粘附的影响

根据人脐静脉血管内皮细胞(ECV-304)的显微和超微结构,研究了银杏叶多糖(GBLP)对ECV-304细胞和HL-60细胞粘附作用的影响.结果表明,正常生长的ECV-304细胞呈不规则形,细胞质丰富,细胞核呈圆形或椭圆形.电镜下,可见细胞表面有绒毛,细胞内具有Weibel-Palade小体.当ECV-304细胞受凝血酶(thrombin)刺激后,与HL-60细胞的粘附能力明显提高;而当用200 μg/ mL和500 μg/ mL剂量的GBLP处理ECV-304细胞后,与HL-60细胞的粘附率明显下降.这表明200 μg/ mL和500 μg/ mL剂量的GBLP对人脐静脉内皮细胞与HL-60细胞粘附有抑制作用.     

整合素在肝癌细胞侵袭和转移中的作用

癌细胞与细胞外基质（ECM）的粘附是恶性肿瘤侵袭首要步骤。肿瘤细胞与细胞外基质的粘附是通过细胞膜表达的特异受体介导的，其中整合素家族为重要的粘附分子。对整合素表达相关的细胞外基质的介绍及肝癌细胞侵袭与转移中整合素研究的综述，可了解相关的整合素所介导肝癌细胞与细胞外基质、肝癌细胞之间的相互作用。文中提及肝癌细胞趋化运动中相关的整合素，有助于进一步了解整合素在肝癌侵袭与转移中的作用。整合素参与了整个肝癌细胞的侵袭转移过程，寻找出干扰整合素与配体相互作用、特异性增加或减少整合素在肿瘤中的表达的物质，从而阻断肿瘤的侵袭与转移，对抗癌药物的研究有着深远的影响。     

整合素betal对肝癌细胞与Ⅳ型胶原粘附的作用

采用微吸管实验技术,研究了整合素beta1亚单位(CD29)的单克隆抗体(Anti-CD29)处理肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)细胞,观察Anti-CD29对细胞与IV型胶原裱衬表面的粘附力的影响,并利用流式细胞仪对HCC细胞表面整合素beta1亚单位的表达进行分析。结果表明,HCC细胞与5μg/mLIV型胶原裱衬表面之间的粘附力为932±134(×10-10N,n=60),加入5μg/mLAnti-CD29粘附力减小到449±119(×10-10N,n=60);加入10μg/mLAnti-CD29时粘附力减小到220±78(×10-10N,n=55);加入20μg/mLAnti-CD29时粘附力减小到222±67(×10-10N,n=65)。流式细胞仪分析表明,所研究细胞整合素beta1亚单位表达率达95.78%。上述结果表明,整合素beta1亚单位是联系HCC细胞与IV型胶原裱衬表面粘附的重要受体基础。     

细胞间粘附分子-1测定在肝细胞肝癌诊治中的意义

近年关于细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）与肝细胞肝癌（ＨＣＣ）的研究表明，８０％～９６％ＨＣＣ组织中ＩＣＡＭ－１的表达呈阳性，而血清中ＩＣＡＭ－１与组织ＩＣＡＭ－１的表达吻合率为８７％，体外实验性证实血清ＩＣＡＭ－１来源于肿瘤细胞表面脱落的ＩＣＡＭ１，由于血清ＩＣＡＭ－１来源及结构的特点，可干扰机体免疫系统对肿瘤的监控，使病情迅速发展；临床上观察到血清ＩＣＡＭ－１水平与ＨＣＣ病情的恶化程度成正比     

NVP-BEZ235诱导自噬在肝癌细胞凋亡中的作用研究

目的 以Hep3B和PLC/PRF/5两种肝癌细胞为研究对象,探讨自噬在NVP-BEZ235中引起细胞凋亡的作用.方法 人类肝癌细胞Hep3B和PLC/PRF/5在含有10%FBS的DMEM培养基中进行培养,然后再进行细胞活性检测,用于Western blotting检测及线粒体膜电位(MMP)分析.结果 NVP-BEZ235能够有效增加LC3-Ⅱ的表达,并同时降低p62的表达,由此推断,NVP-BEZ235也能够诱导产生自噬,与Atg5的siRNA或自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)联合应用时,肝癌细胞的生长被抑制.结论 NVP-BEZ235与Atg5的siRNA或者3-MA的联合应用能够促进细胞凋亡,NVP-BEZ235和自噬抑制剂的联合应用可为肝癌和其他恶性肿瘤临床治疗提供新的方法.     

HCC细胞膜相关蛋白的快速鉴定

为快捷、特异地鉴定HCC（hepatocellular carcinoma, 人肝细胞癌）细胞的膜相关蛋白,用DOC（脱氧胆酸钠）对贴壁培养的HCC细胞系HepG2进行处理,使细胞皱缩并脱离培养面,收集未脱离的HepG2膜相关蛋白,经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,最后应用ESI-QUAD-TOF MS(electrospray ionization quadrupole timeofflight mass spectrometry),成功鉴定出包括热休克蛋白90α、玻璃体粘连蛋白前体、层粘连蛋白α5亚单位     

芳纶帘线／橡胶复合材料粘合疲劳性能的研究

使用自制的改性一次REL浸剂浸渍芳纶帘线，并采用TCAT（Tire Cord Adhesion Testing)抽拔法和电镜观察法研究了芳纶帘线／氯丁橡胶粘合体系，芳纶帘线／天然橡胶粘合体系疲劳前后的粘合性能。     

涤纶织物与橡胶的粘合研究

通过浸渍改性环氧树脂（ＳＪＲ－２）和预缩合间苯二酚甲醛树脂（ＳＪＲ－１）的水溶液，然后半固化，实现了涤纶织物的表面粘合活化，接着浸由ＳＪＲ－１配制的间苯二酚甲醛胶乳（ＲＦＬ）浸渍液，即可获得与ＮＲ、ＣＲ、ＨＮＢＲ、ＮＢＲ及氯醇胶（ＣＨＲ）等胶料优良的粘合性能．     

压电细胞传感芯片的HepG2细胞粘附行为分析

利用压电细胞传感芯片(PCSC)对HepG2肝癌细胞的粘附行为进行24 h实时检测,获得经典响应曲线,根据HepG2肝癌细胞行为特性将响应曲线分为游离期、粘附期、平台期3个行为时段,并分析和计算每个行为时段的基本特性和平均用时;结合SEM实验和双胰酶消化实验,正反验证PCSC的主要参数因子-频率与细胞粘附行为信息之间的良好对应关系,分析所获得的数据,从定量分析的角度找到频率变化△f与粘附细胞数量间的数量关系,建立了以肝癌细胞为基础的压电生物芯片传感技术平台.     

自体肝癌细胞裂解物致敏的树突状细胞诱导抗肝癌免疫的体外研究

从术后肝癌病人的外周血中诱导树突状细胞（DC），并经自体肝癌细胞裂解物致敏DC，用流式细胞仪、^3H-TdR掺入法及MTT法检测了DC表面分子的表达、DC刺激T细胞的增殖效应及DC诱导的T细胞对肝癌细胞的杀伤作用，进而比较经自体肝癌细胞裂解物致敏的DC与其它条件下的DC功能的差异．结果显示：肝癌细胞裂解物致敏DC的功能较未致敏DC显著提高，其可诱导自体混合淋巴细胞强的增殖效应，同时诱导的T细胞对自体肝癌细胞有较强的杀伤率．     

单核细胞增多性李斯特菌对人、鼠脑微血管内皮细胞黏附、侵袭、增殖差异性分析

为探究单核细胞增多性李斯特菌(LM)不同菌株对脑微血管内皮细胞黏附,侵袭以及在细胞内增殖的差异,本实验利用LM90SB2、LM3、LM4,塞氏李斯特菌(L.seeligeri),无害李斯特菌(L.innocua)感染脑微血管内皮细胞,采用BHI平板计数,测定细菌黏附率、侵袭率及不同时间细胞内增殖情况。结果表明:LM90SB2、LM3、LM4对脑微血管内皮细胞黏附率为3.14%~7.83%,统计学分析其差异不显著;LM90SB2、LM3、LM4对人/鼠脑微血管内皮细胞侵袭率(0.036%~0.128%)均大于L.seeligeri(0.0315%、0.00148%),L.innocua不侵袭脑微血管内皮细胞。LM90SB2、LM3、LM4对人/鼠2种细胞的侵袭率存在显著差异(P0.05),临床分离株LM90SB2增殖速度、菌量及持续时间明显高于其它菌株。以上结果提示LM不同菌株的毒力不同。