一氧化氮吸入对缺氧性肺动脉高压患者一氧化氮合酶和内皮素的影响

探讨吸入一氧化氮（ＮＯ）对缺氧性肺动脉高压患者一氧化氮合酶（ＮＯＳ）和内皮素（ＥＴ）的影响。方法：１３例肺动脉高压患者行ＮＯ吸入，分别于吸入ＮＯ前、吸入３０ｍｉｎ时、停止吸入２ｈ和１２ｈ时采肺动脉血，测白细胞中的ＮＯＳ及血浆中的ＥＴ。结果：吸入ＮＯ前、吸入３０ｍｉｎ时、停止吸入２ｈ和１２ｈ，所测ＮＯＳ值分别为（０７０±０．２１）ｍｏｌ／ｍｉｎ·ｍｇ－１、（０７４±０１４）ｍｏｌ／ｍｉｎ·ｍｇ－１、（０６４±０２２）ｍｏｌ／ｍｉｎ·ｍｇ－１和（０６３±０１７）ｍｏｌ／ｍｉｎ·ｍｇ－１；所测ＥＴ为（７８８９±４６５９）ｐｍｏｌ／Ｌ、（８８２７±４５４１）ｐｍｏｌ／Ｌ、（８０７６±４２６６）ｐｍｏｌ／Ｌ和（６１０７±２９．４４）ｐｍｏｌ·Ｌ－１；后三者同吸入前比，均Ｐ＞００５。结论：缺氧性肺高压患者吸入ＮＯ对机体ＮＯＳ和ＥＴ未见明显影响     

视黄酸对BEL—7402细胞酶活性及基因表达的影响

人肝癌ＢＥＬ－７４０２细胞分别以５μｍｏｌ／Ｌ、２０μｍｏｌ／Ｌ和５０μｍｏｌ／Ｌ的视黄酸（ＲＡ）处理后,细胞生长明显受抑,平均细胞群体倍增时间延长,并呈ＲＡ浓度及处理时间依赖性关系．经２０μｍｏｌ／ＬＲＡ处理的细胞中,ｒ－谷氨酰转肽酶（ｒ－ＧＴ）活性自给药后第２天即持续下降,至第６天降至４４．５％,而酪氨酸－α－酮戊二酸转氨酶（ＴＡＴ）活性则持续增高,至第６天较对照组高近１倍．经２０μｍｏｌ／ＬＲＡ处理５ｄ后,ＲＮＡ斑点杂交分析表明ｐ５３基因转录加强,而Ｎ－ｒａｓ基因表达下降,提示该两基因的表达变化可能在ＢＥＬ－７４０２细胞的生长抑制及逆转过程中起重要作用,有关机制尚待深入研究．     

影响大白菜离体培养再生频率各因素的探讨

本实验以大白菜“０２号杂交早皇白”无菌苗的子叶作为材料,就组织培养过程中影响芽再分化的各种因素进行了初步探讨．用附加ＢＡ４．４×１０－６～３５．５×１０－６ｍｏｌ／Ｌ、ＮＡＡ０．５４×１０－６～３．２×１０－６ｍｏｌ／Ｌ、ＡｇＮＯ３１．２×１０－５ｍｏｌ／Ｌ的ＭＳ培养基培养子叶切段,能直接－诱导分化出芽和根;３～１１ｄ苗龄的子叶芽分化率稳定在８０％以上,其中４～５ｄ苗龄的效果较好;子叶比下胚轴易产生愈伤组织和再生芽;整片子叶比子叶切段易诱导分化出芽．芽分化率最高可达９７．８％．但每个外植体平均芽数以切去子叶柄的子叶切段为多．激素配比以ＢＡ８．９×１０－６ｍｏｌ／Ｌ、 ＮＡＡ２．７×１０－６ｍｏｌ／Ｌ为最好,在此培养基中再添加８．４×１０－５ｍｏｌ／ＬＣｏ（ＮＯ３）２对促进芽分化有一定作用,但效果不如ＡｇＮＯ３。     

石英谐振式NH_3敏元件

以在ＡＴ切型，Ａｕ做电极的石英振子上涂覆适当厚度的Ｌ（＋）抗坏血酸为敏感膜，制作气敏元件．实验表明，该元件对微量ＮＨ３（＜３．３×１０－６ｍｏｌ／Ｌ）具有很高的频率响应和灵敏度；对８．２×１０－５ｍｏｌ／Ｌ的Ｈ２，ＣＯ，ＣＨ４，Ｃ４Ｈ１０及８．２×１０－７ｍｏｌ／ＬＨ２Ｓ感度很低，有良好的选择性．     

四氢呋喃与六氢苯酐共聚的研究

研究了四氢呋喃（ＴＨＦ）与六氢苯酐（ＨＨＰＡ）共聚合的动力学行为,并测定了６℃和１８℃条件下ＴＨＦ的表观聚合速度常数分别是１．５×１０－２Ｌ／（ｍｏｌ·ｓ）和２．０５×１０－２Ｌ／（ｍｏｌ·ｓ）;ＨＨＰＡ的表观聚合速度常数分别是１．３８×１０－３Ｌ／（ｍｏｌ·ｓ）和１．６２×１０－３Ｌ／（ｍｏｌ·ｓ）．     

去甲肾上腺素在正常及去肾上腺大鼠海马调节机体细胞免疫功能 …

用噻唑蓝（ＭＴＴ）比色分析法检测了在正常及去肾上腺大鼠双侧海马内微量注射去甲肾上腺素（Ｎｏｒａｄｒｅｎｌｉｎｅ,ＮＡ）对刀蛋白（ＣｏｎＡ）刺激的脾淋巴细胞增加增殖反应的影响。结果：（１）在正常大鼠,ＮＡ（４μＬ,６．０＊１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ）、β１受体激动剂Ｄｏｂｕｔａｍｉｎｅ（Ｄｏｂ,４μｌ,６．０＊１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ）和β２受体激动剂Ｍｅｔａｐｒｏｔｅｒｎｏｌ（Ｍｅｔ,４μｌ,８．０＊１０＆     

流动注射化学发光法测定还原型辅酶Ⅰ

将还原型辅酶Ⅰ（ＮＡＤＨ）还原Ｆｅ３＋生成Ｆｅ２＋的化学反应与Ｆｅ２＋催化溶解氧氧化Ｌｕｍｉｎｏｌ的化学发光反应相偶合,同时采用试剂固定化技术将体系中的分析试剂Ｆｅ３＋及Ｌｕｍｉｎｏｌ全部电价固定在离子交换柱中,建立了一种测定还原型辅酶Ⅰ的流动注射化学发光新方法．该法对于ＮＡＤＨ响应的线性范围为１．０×１０－７～１．０×１０－４ｍｏｌ／Ｌ,检出限为５．５×１０－８ｍｏｌ／Ｌ,相对标准偏差小于５％（１．０×１０－７ｍｏｌ／Ｌ,ｎ＝７）．     

化工原料及制药中间体中二苯胺亚硝化衍生的极谱法测定

报道一种经亚硝化后用极谱定量二苯胺的极谱测定方法。在０．２ｍｏｌ／ＬＨＡｃ－０．０２５ｍｏｌ／ＬＨ＿２ＳＯ＿４－４×１０￣（－６）ｍｏｌ／ＬＮａＮＯ＿２底液中，二苯胺的亚硝化产物有一良好的极谱还原波，峰电位为－０．６１Ｖ（ｖｓ，ＳＣＥ），峰高与二苯胺浓度在２×１０￣（－７）～１×１０￣（－５）ｍｏｌ／Ｌ范围内有线性关系（ｒ＝０．９９９９）。     

Ce（IV）-SO32-化学发光体系测定氟喹诺酮类药物

发现氟喹诺酮类药物诺氟沙星（ＮＦ） 、盐酸环丙沙星（ＣＰ） 、氧氟沙星（ＯＦ） 、盐酸洛美沙星（ＬＭ） 均可在Ｃｅ（ Ⅳ） － Ｎａ２ＳＯ３ 化学发光体系中产生响应, 据此对上述４ 种药物进行化学发光测定． 方法的检出限分别为诺氟沙星０－３３μｍｏｌ／Ｌ, 盐酸环丙沙星０－３３μｍｏｌ／Ｌ, 氧氟沙星０－０４μｍｏｌ／Ｌ, 盐酸洛美沙星０－３３μｍｏｌ／Ｌ．     

免疫分析试剂异硫氰酸异鲁米诺的发光标记性能研究

研究了新化学发光免疫分析试剂异硫氰酸异鲁米诺（简称ＩＴＣＩ）的发光及标记性能。在ＮａＯＨ－Ｈ_２Ｏ_２－Ｋ_３Ｆｅ（ＣＮ）_６介质中，测定ＩＴＣＩ的线性范围为３个数量级，检测限为６．６×１０^－１１ｍｏｌ／Ｌ，测定５０×１Ｏ^－９ｍｏｌ／ＬＩＴＣＩ，相对标准偏差为５．２％。标记酵母ＲＮＡ、ＡＦＰ抗体和羊抗人抗体（ＳａＨＩｇＧ）的反应条件温和，反应速度较快，标记率较高，每克酵母ＲＮＡ可与１．５×１０^－５ｍｏｌ／ＬＩＴＣＩ结合；标记ＡＦＰ抗体和羊抗人抗体的标记卒分别为０．４０和０．３５。     

Interaction between endogenous nitric oxide and carbon monoxide in the pathogenesis of hypoxic pulmonary hypertension

Hypoxic pulmonary hypertension, an important pathophysiological process in the development of a vari-ety of clinical cardiac and pulmonary diseases, has critical influence on the proceeding and prognosis of the dis- eases[1]. It is important to clarify the pathogenesis of the diseases. The discoveries of endogenous gas signal mole-cules, nitric oxide (NO) and carbon monoxide (CO), have been moving the research of hypoxic pulmonary hyper-tension to a very new phase. Our foregoing experiments …     

NO对新生大鼠心肌细胞PKC活性的影响

利用培养新生大鼠心肌细胞，检测NO前体L-精氨酸(L-arginine,L-Arg)和NO供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)对PKC活性的影响，并探讨内、外源性NO在PKC激动剂佛波指(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)激活PKC中的作用.实验结果表明：培养基中加入L-Arg，PKC活性呈剂量依赖性降低；用L-Arg进行预处理，30 min后加入PMA，PKC活性明显降低，与单纯PMA组相比有显著差异；NOS抑制剂L-NAME本身对基础状态PKC活性无明显影响，但可阻断L-Arg对上述2个效应的影响；培养液中加入NO供体SNP，PKC活性呈剂量依赖性降低；用SNP预处理心肌细胞，5 min后加入PMA，PKC活性与单纯PMA组相比有显著性差异.以上结果表明，内、外源性NO均具有剂量依赖性抑制PKC活性的作用，PKC可能是NO对心肌细胞作用的胞内信号传导通路的关键部位或重要信号分子之一；L-Arg通过NOS先生成NO，NO再对PKC起抑制作用.     

大脑皮质微血管内皮细胞培养及其缺氧性损害模型

建立改良的体外培养大鼠脑皮质微血管内皮细胞缺氧模型．取1～5d Wistar乳鼠脑皮质获得的脑微血管内皮细胞（BMEC）进行体外培养，缺氧组置入一个经改造的保鲜盒内，密闭并通入混合气体（95％N2和5％CO2）12h，检测缺氧细胞的形态结构、细胞死亡率及培养液中乳酸脱氢酶漏出量．结果显示缺氧BMEC形态结构损伤，细胞死亡率增加，细胞乳酸脱氢酶漏出量显著增加（p〈0．01）．该模型可使脑血管内皮细胞受到损伤，证实该模型具有一定的可靠性、操作简便，可重复性强，为体外研究脑血管疾病提供帮助．     

经皮肺动脉去交感神经冷冻消融术治疗犬肺动脉高压疗效评价

摘要:目的 通过野百合碱诱导的犬肺动脉高压模型,观察肺动脉去交感神经冷冻消融术后 6 个月的肺动脉平均压力( mPAP) 、肺毛细血管楔压( PCWP)及内皮素受体-1( ET-1)变化,评估冷冻消融去比格犬肺动脉交感神经的安全性和有效性。 方法 将 15 只比格犬随机分为 A 组(冷冻消融组) 、B 组(假手术组) 及 C 组( 对照组) ,对比观察比格犬手术前后 mPAP、PCWP 及 ET-1 水平变化。 结果 A、B 和 C 各组术后 6 个月,mPAP、PCWP 和 ET-1 值均低于术前水平,差异有统计学意义( P<0. 05) 。 结论 犬肺动脉高压经皮肺动脉去交感神经冷冻消融术安全且有效,术后表现出延续性降肺动脉压力效果。     

ERK1／2通路和血管内皮细胞在15-KETE诱导缺氧大鼠肺动脉收缩中的作用

目的用组织浴槽血管环技术研究细胞外信号调节激酶1／2（extracellularregulatedproteinkinasesl／2,ERKl／2）通路和血管内皮细胞在15-KETE诱导缺氧大鼠肺动脉收缩中的作用。方法16只体质量为（220±20）g清洁级Wistar大鼠随机分为2组（n=8）,正常对照组置于正常环境中饲养（FiO,=21％）,缺氧组置于缺氧的培养箱中饲养（FiO2：10％）,连续饲养9d后处死,游离直径约为0．5—1．0inIn肺内肺动脉（PA）。剪成3mm长的动脉环,在组织浴槽内进行张力研究。比较在15一KETE给药前后肺动脉环张力变化;机械法去除动脉环内皮,比较内皮完整和去内皮后,15一KETE对缺氧性肺动脉环的收缩作用;用ERKl／2上游激酶抑制剂U0126孵育肺动脉环,比较U0126孵育前后15-KETE对缺氧性肺动脉环的收缩作用;机械法去除动脉环内皮,再比较U0126孵育前后15-KETE对缺氧性肺动脉环的收缩作用。结果1）15-KETE对缺氧大鼠肺动脉环有收缩作用,呈浓度-效应关系,与正常对照组比较差异显著（P〈0．05）;2）内皮完整和内皮去除的肺动脉环,15-KETE对其缩血管作用均受到抑制,但差异显著（P〈0．05）;3）内皮完整肺动脉环,在U0126孵育前后,15-KETE的缩血管作用均受到抑制,但差异显著（P〈0．05）;4）内皮去除的肺动脉环,U0126孵育前后,15-KETE的缩血管作用也受到抑制,差异显著（P〈0．05）。结论15-KETE可浓度依赖性地收缩缺氧大鼠肺动脉环;15-KETE引起缺氧肺动脉收缩可能与ERK1／2信号转导通路和血管内皮细胞有关,并且位于平滑肌的ERKl／2通路也参与15-KETE诱导缺氧大鼠肺动脉环的收缩。     

高原鼢鼠肌肉脂溶性物质对大鼠一氧化氮合成酶活性的影响

为了探讨高原鼢鼠肌肉脂溶性物质（FSC）的抗缺氧机制，40只SD大鼠随机分为4组：10％FSC组、10％FSC缺氧组、空白对照组和空白缺氧组。FSC组和空白组分别用10％FSC和蒸馏水连续灌胃30d，剂量为每天20mL/kg。灌胃结束后，10％FSC缺氧组和空白缺氧组大鼠在5000m海拔高度下，连续缺氧15d，每天8h，测定各组大鼠血清一氧化氮合成酶（NOS）活性。结果发现，在5000m海拔高度条件下，10％FSC在缺氧条件下能显著提高大鼠血清NOS活性和NO含量（P＜0.05)。     

新鲜冰冻血浆（FFP）通过AMPK/Akt/eNOS通路促肺内皮细胞一氧化氮释放及机制研究

探讨新鲜冰冻血浆(FFP)对人肺正常微血管内皮细胞(HPMECs)一氧化氮(NO)释放的影响及其机制.采用NO/Nitrite/Nitrate分析法检测了体外培养内皮细胞HPMECs经FFP处理后不同时间点细胞上清NO含量.结果显示:与培养基空白对照组相比,FFP显著增加内皮细胞NO生成;采用磷酸化蛋白激酶抗体芯片和免疫印迹方法筛选和鉴定FFP处理后内皮细胞相关蛋白激酶磷酸化,结果为FFP显著增加内皮细胞AMPKα1,Akt1和eNOS蛋白的磷酸化.进一步分别采用Compound C(AMPK抑制剂),LY294002(PI3K/Akt抑制剂)或L-NAME(NOS抑制剂)预处理细胞,阻挡AMPKα1/Akt1/eNOS信号转导通路.结果显示上述三种抑制剂均能抑制FFP诱导eNOS激活和NO生成,表明AMPKα1/Akt1/eNOS信号转导通路介导FFP诱导NO分泌参与血管保护.     

依折麦布对高迁移率族蛋白1诱导血管内皮细胞激活的影响机制研究

目的探讨依折麦布对高迁移率族蛋白1(HMGB1)诱导血管内皮细胞激活影响的分子机制.方法分离、培养雄性SD大鼠胸主动脉内皮细胞,分为空白对照组、HMGB1刺激组、依折麦布组(HMGB1刺激前10μmol/L依折麦布预处理)、CLI-095组(HMGB1刺激前1μmol/L CLI-095预处理).荧光定量分析中性粒细胞与内皮细胞的黏附能力;RT-PCR和Western blot检测内皮细胞中TLR4,ICAM-1、可溶性E选择素mRNA和蛋白表达水平;EMSA法检测NF-κb-p65的DNA结合活性.结果 HMGB1活化的内皮细胞与中性粒细胞黏附活力均明显高于空白对照组,差异具有统计学意义(P0.05);依折麦布组、CLI-095组内皮细胞与中性粒细胞黏附活力均明显低于HMGB1诱导组,差异具有统计学意义(P0.05).HMGB1刺激组的内皮细胞TLR4,mRNA和蛋白表达量明显高于空白对照组,差异具有统计学意义(P0.05);依折麦布组和CLI-095组mRNA和蛋白表达量均明显低于HMGB1组,差异具有统计学意义(P0.05).HMGB1组内皮细胞NF-κb p65亚单位核位移明显强于空白对照组,差异具有统计学意义(P0.05);依折麦布组和CLI-095组较HMGB1组核位移明显减弱,差异具有统计学意义(P0.05).HMGB1组ICAM-1、可溶性E选择素表达水平明显高于空白对照组,差异具有统计学意义(P0.05).而经依折麦布、CLI-095干预后可明显降低ICAM-1、可溶性E选择素表达水平,与HMGB1组之间差异具有统计学意义(P0.05).结论依折麦布可通过调节黏附分子(ICAM-1、可溶性E选择素)的表达而有效抑制HMGB1诱导的血管内皮细胞活化效应,其机制与抑制TLR4的表达和NF-κb激活有关.     

大鼠急性局灶性脑缺血再灌注NO含量和NOS活性的变化及7-NI对其影响的实验研究

目的探讨一氧化氮和神经元型一氧化氮合酶是否参与了急性脑缺血再灌注的发病机制.方法采用栓线法复制大鼠大脑中动脉阻塞模型,观察血清和脑组织NO含量和NOS活性的变化及神经元型一氧化氮合酶抑制剂7-硝基吲唑对再灌注期间两者的影响.结果脑缺血45 min再灌注2 h后血清及脑组织中NOS活性及NO含量增加,再灌注8 h达高峰.7-NI能显著抑制再灌注期间血清及脑组织中NOS的活性及NO的含量.结论 NO和nNOS在急性局灶性脑缺血再灌注的过程中起着重要的作用.     

Vasorelaxant properties of the endothelium-derived relaxing factor more closely resemble S-nitrosocysteine than nitric oxide

Studies of cultured bovine aortic endothelial cells using quantitative chemiluminescence techniques have shown that the amount of nitric oxide released under basal conditions, or in response to either bradykinin or the calcium ionophore A23187 is insufficient to account for the vasorelaxant activities of the endothelium-derived relaxing factor (EDRF) derived from the same source. This observation contradicts previous suggestions that nitric oxide and EDRF are the same compound, but may be explained if EDRF is a compound that contains nitric oxide within its structure but is a much more potent vasodilator than nitric oxide. Such a molecule could be one of several nitrosothiols which may yield nitric oxide after a one-electron reduction. The present experiments were carried out to test the possibility that the biological activities of the endothelium-derived relaxing factor might more closely resemble those of one of these compounds, S-nitrosocysteine, than nitric oxide. Nitric oxide release from cultured bovine aortic endothelial cells was detected by chemiluminescence and bioassay experiments compared the vasodilator potencies of nitric oxide, S-nitrosocysteine, and EDRF. The results suggest that EDRF is much more likely to be a nitrosylated compound such as a nitrosothiol than authentic nitric oxide.