树鼩粪便中病毒三种浓缩方法的效果比较

目的 比较树鼩粪便中病毒的三种浓缩方法,评价各方法的浓缩效果,为病毒浓缩方法的最佳选择提供依据。方法 将指示病毒(树鼩呼肠孤病毒,tree shrew’s reovirus, TRV)加入经离心过滤处理后的野生树鼩粪便上清中,采用PEG(聚乙二醇,polyehhylene glycol)沉淀结合超声分离法、铁离子絮凝的化学方法和GBviroFast病毒浓缩试剂盒对树鼩粪便上清分别进行浓缩,经实时荧光定量PCR技术对指示病毒进行绝对定量,比较各方法的浓缩效果。结果 TRV病毒悬液的载量为1.34E+05;铁离子絮凝的化学方法浓缩的TRV载量为1.86E+04,浓缩效率为49.57%;GBviroFast病毒浓缩试剂盒浓缩的TRV载量为0.98E+04,浓缩效率为26.12%;PEG沉淀结合超声分离法浓缩的TRV载量为2.30E+03,浓缩效率为6.13%。结论 三种方法均能浓缩粪便上清中低浓度的肠道病毒,铁离子絮凝方法最佳,GBviroFast病毒浓缩试剂盒其次,PEG结合超声分离效果最差。     

病毒载体滴度对基因转移效率的影响研究

用改良的经典方法测定包装ＬａｃＺ基因的腺病毒和逆转录病毒载体的病毒滴度，以及用新建的简便方法测定逆转录病毒载体的病毒滴度．应用此两种病毒载体介导ＬａｃＺ基因分别导入１５种人或小鼠靶细胞，并以不同滴度的病毒上清液转染靶细胞Ｋ５６２，探讨病毒滴度对基因转移效率的影响．实验结果表明，病毒滴度与转染效率呈正相关，逆转录病毒滴度由１０６ＣＦＵ／ｍＬ降至１０４ＣＦＵ／ｍＬ时，用其转染Ｋ５６２细胞的转染效率由９０％降至２０％；ＣＡ启动子腺病毒滴度由０．４×１０９ＣＦＵ／ｍＬ降至０．２×１０７ＣＦＵ／ｍＬ时，对Ｋ５６２细胞的转染率由１００％降至３５％．同时表明，腺病毒滴度高，其转染率亦远比逆转录病毒高     

逆境胁迫对拟南芥细胞质、叶绿体和细胞外ATP水平的影响

利用荧光共振能量转移的ATeam蛋白作为ATP生物传感器,建立检测拟南芥细胞质、叶绿体和细胞外ATP的检测体系,研究植物在不同非生物胁迫(NaCl、 PEG 6000和低温)下细胞质、叶绿体和细胞外ATP水平的变化.结果表明,在较高强度的胁迫(200 mmol/L NaCl、 10%～20%w(PEG6000)和0～4℃)下,细胞质ATP水平下降.在各水平PEG 6000胁迫下,叶绿体中ATP水平保持稳定; 10℃低温处理导致叶绿体中ATP水平升高, 200 mmol/L NaCl处理导致叶绿体ATP水平下降,其他强度的NaCl以及低温处理未显著改变叶绿体ATP水平.在中等强度的NaCl和PEG 6000胁迫(100 mmol/L NaCl和5%～10%w(PEG 6000))下,细胞外ATP水平升高; 4～10℃低温胁迫处理导致细胞外ATP水平下降.     

盐分和水分胁迫对多裂骆驼蓬渗透调节及叶片抗氧化酶活性的影响

采用盆栽试验，分别用含有0～400 mmol·L-1NaCl和等渗于200 mmol·L-1NaCl的聚乙二醇6000(PEG6000)的Hoagland溶液处理多裂骆驼蓬(Peganum multisectum Bobr)幼苗，15 d后测定根和叶片中主要无机离子及有机溶质含量、渗透势和渗透调节能力及叶片超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活性.结果表明，NaCl胁迫下，幼苗无机离子总量及Na+、Cl-含量随NaCl浓度增大而增加，分别占计算渗透势（COP）的58     

甜菜坏死黄脉病毒的分离提纯及其生物化学特性的研究

在甜菜坏死黄脉病毒分离提纯的研究中,获得了一个较好的提纯程序。用刚显症的新鲜番杏病叶,加PH8.4、0.2m的硼酸缓冲液(内含0.5％巯基乙醇,0.1m脲素、0.005mEDTA),捣碎过滤,6％PEG沉淀后,通过SePharose2B柱层析染纯化病毒。病毒经6％PEG再次沉淀浓缩后,调节病毒悬液PH至酸性使病毒易悬浮,并通过病毒等电点沉淀法进一步纯化病毒。纯化病毒制剂呈典型的病毒核蛋白紫外吸收曲线,最大吸收值在270毫微米,最小吸收值在250毫微米。该病毒分离物OD_(260)/OD_(280)为1.123左右,核酸含量约4.5％,病毒等电点PH4.8～4.9。病毒的核酸电泳出现4条带,它们的分子量约2.25×10~6、1.8×10~6、1.05×10~6、0.75×10~6道尔顿。病毒粒体含一种外壳蛋白亚基,分子量约2.05×10~6道尔顿,由约16种199个氨基酸组成。病毒制剂在分析超速离心时出现了4个沉降界面,它们各自的沉降系数分别为200.8S,165S,125.8S和100S。     

PEG6000模拟干旱对栀子幼苗生理特性的影响

采用不同浓度的PEG6000(0%,5%,10%,15%,20%)模拟不同程度的干旱环境,通过测定第10 d,第15 d,第20 d栀子幼苗叶片内的抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性及可溶性蛋白含量等生理指标变化,了解栀子幼苗的耐干旱能力。结果表明:(1)相同处理时间内,POD、SOD活性和可溶性蛋白的含量随着PEG6000浓度的增加,呈现出先增后降的变化趋势;CAT活性在第10 d和15 d先增后降,第20 d CAT活性下降;PEG6000浓度为10%时,各指标数值最大。(2)相同胁迫强度,随着胁迫时间的增加,POD活性先增加后下降,在第15 d有最大酶活;SOD和可溶性蛋白的含量随胁迫时间的持续而下降;CAT活性在PEG6000浓度为5%和20%时下降,10%和15%时先升后降。(3)结论:较低浓度的PEG6000(≤10%)或较短的处理时间内(短于15 d)使栀子花幼苗生理活性增强;高浓度的PEG6000(≥15%)或较长的处理时间(长于15 d)使栀子幼苗生理活性下降。     

激素和PEG对华重楼种子萌发的影响

为研究不同浓度的赤霉素(GA3)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和不同浓度的PEG4000、PEG6000、PEG8000和PEG10000对华重楼种子萌发的影响,采用培养皿培养法,用不同浓度的2种激素和4种PEG浸种处理,观察记录了种子萌发率和萌发开始时间(胚根突破种皮所需的天数)、第120 d时胚根长3 cm的种子所占的比例,筛选了促进华重楼种子萌发的最适浸种试剂和浓度.结果表明:500 mg/L GA3,0.5 mg/L 2,4-D,25%(质量比)PEG4000和25%PEG8000浸种能有效打破华重楼种子休眠并促进种子萌发,其中500 mg/L GA3效果最佳.这是国内首次关于华重楼种子萌发条件的全面研究报道.     

PEG6000浓度对YVO_4:Eu~(3+)发光薄膜性质的影响

用溶胶凝胶法制备不同浓度(0.04、0.06、0.08、0.10 g.mL-1)聚乙二醇6000(PEG6000)作用下的YVO4:Eu3+发光薄膜.采用X射线衍射仪(XRD)、傅立叶变换-红外光谱(FT-IR),扫描电子显微镜(SEM)及荧光分光光度计,对薄膜结构、形貌和发光性质进行了表征.结果表明:浓度从0.04 g.mL-1增加到0.06 g.mL-1时,颗粒之间的间距变小,样品致密,样品的发光强度增强;当浓度进一步增加(从0.08 g.mL-1到0.10 g.mL-1)时,颗粒聚集形成团簇,样品的发射强度减弱.     

水分胁迫对粳型巨胚稻发芽与出苗的影响

用粳型巨胚稻西巨胚1号和合系22-2(小胚)为试验材料,用不同质量浓度的PEG—6000(聚乙二醇)溶液对种子进行不同的处理,试验结果表明:西巨胚1号的发芽势、发芽率、发芽指数都不及合系22-2;先用清水浸种24h后再用PEG溶液浸润会抑制西巨胚1号的萌发,且发芽率随浓度的增加而下降;用不同浓度的PEG溶液浸泡种子24h后再用清水培养对种子的发芽和出苗有促进作用,但以浓度为5%的PEG溶液浸种对西巨胚一号的促进作用最大。     

不同药剂浸种对芹菜种子发芽的影响

通过不同药剂处理对芹菜种子,结果表明:321mg.mL-1的PEG(6000)浸种极显著地提高了芹菜种子的发芽率、发芽势以及种子活力;NaCl、CaCl2及低浓度的赤霉素(0.01~0.1mg/mL)混合液浸种也具有相同的效果;而混合液中高浓度的赤霉素(1 mg/mL)浸种则会降低种子的发芽率、发芽势以及种子活力。     

用聚乙二醇分离人血清免疫球蛋白

作者用聚乙二醇(PEG)分离了人血清免疫球蛋白(IgG),实验表明该方法比经典的硫酸铵沉淀法具有更高的特异性和回收率。探讨了PEG的分子量、浓度及体系的pH、离子强度对分离人IgG的影响。表明在pH7.8的0.025M PBS体系中采用16％的PEG(M.W.1000)效果最佳。     

番茄种子萌发的交叉耐性研究

研究不同温度和水分胁迫对番茄种子萌发速率的影响,温度、NaCl和PEG6000预处理对番茄种子萌发和幼苗生长的交叉耐性诱导.在15℃、25℃和30℃中,50％萌发需要的时间分别是186h、43h和48h;50％萌发需要的热时间(thermal     

鸭肝炎Ⅰ型琼脂扩散试验的研究

本试验用不同的鸭肝炎病料,通过氯仿去脂和反透析法进行病毒的提纯浓缩,研究鸭肝炎的琼脂扩散试验.结果显示用抗原检测抗体或用抗体(血清)检测病毒病原,均可达到80%的阳性检出率.试验中还发现,试验最佳的凝胶配方为pH为7.2,w(NaCl)为8%和琼脂糖的质量分数为1%,病雏鸭肝浓缩抗原最为理想.     

微生物絮凝剂的提纯及絮凝条件研究

絮凝剂生产菌(Pseudomonassp.F-8)的发酵液经离心沉淀后,其上清液经丙酮萃取,乙醚洗涤和冷冻干燥后即得到絮凝剂干制品.通过实验,确定该絮凝剂适宜的投加量为4 mL(浓度为0.1%),助凝剂CaO(浓度为1%)适宜投加量为2 mL,絮凝作用的最适pH为8.0,最适温度为40℃,搅拌速度为200 r/min.废水处理实验表明,对几种实际废水具有良好的净化效果.     

聚乙二醇(PEG)诱导鸡红血细胞和小白鼠腹水型肝癌细胞融合技术的初步探讨

1.用 PEG6000的不同浓度(30%,40%,50%)处理鸡红血细胞及小白鼠腹水型肝癌(Hca)细胞融合的结果,以40%对这两种细胞较为适宜,细胞融合的均数为2.9%.2.悬浮细胞的细胞融合是发生在 PEG 处理的10分钟后.3.PEG 加入细胞中时以边加边摇动细胞试管为好.     

外源Ca2+对干旱胁迫下金钗石斛幼苗生长的影响

分别用加有不同浓度的PEG6000(0,5%,10%,15%,20%,25%)的MS培养液模拟干旱胁迫,胁迫第3、9、15 d,测定植株增高、植株增重量、相对含水量和可溶性糖含量。用加有PEG600015%MS培养液胁迫的同时施加不同浓度(0,5,10,15mmol/L)的CaC l2,测定植株增高、植株增重量、相对含水量和可溶性糖含量。     

马铃薯植株的提取物对块茎形成和生长的影响

以80％的热乙醇浸提马铃薯(Solanum tuberosum)植株茎叶,提取液浓缩后溶于10％醋酸,以三氯甲烷萃取后醋酸液调pH等于10,加热得到沉淀,用95％乙醇重结晶后得到白色粉状物质,离体培养马铃薯的黄化萌条节段(MS培养基),100ppm的上述物质可使块茎形成率提高1倍,并促进块茎的生长。     

小麦谷蛋白亚基的快速提取分离及SDS-PAGE分析

用70％乙醇和50％异丙醇除去醇溶蛋白，以二硫苏糖醇(DTT)为还原剂，在50％异丙醇，0．08mol／L Tris-HCl(pH为8．0)缓冲液中提取总麦谷蛋白亚基，加入丙酮至浓度为40％时，高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)沉淀析出；继续加入丙酮至80％时，析出低分子量麦谷蛋白亚基(LMW-GS)．在3．3％浓缩胶和10％分离胶的不连续体系中进行SDSPAGE电泳，结果表明，该方法可以有效地除去醇溶蛋白对麦谷蛋白亚基电泳分析的背景干扰，HMW-GS和IMW-GS的提取、分离一步完成，操作简便，时间短，对大量小麦样品的HMW-GS和LMW-GS可以快速分离、提纯和鉴定．     

EGCG棕榈酸酯体外抗HCV作用的研究

为探讨表没食子儿茶素没食子酸棕榈酸酯(EGCG-P)抗丙型肝炎病毒(HCV)的作用,本研究采用cck-8法检测EGCG-P对Huh7.5.1细胞系的毒性作用,丙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒检测HCV滴度,通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)选择合适的病毒感染复数(MOI),进而研究药物抗病毒的作用效果。结果:EGCG-P浓度为0~50mg/L时对Huh7.5.1细胞无毒害作用,且抗病毒作用显著;当其浓度为25mg/L时病毒表达量为阳性对照的1/6,可见EGCG-P能高效抑制HCV的增殖。     

七叶一枝花组织培养和种子萌发条件的研究

为观察不同浓度赤霉素(GA3)、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、聚乙二醇6000(PEG6000)对七叶一枝花种子萌发的影响,采用了不同温度、光照和不同植物生长调节剂对七叶一枝花种子和根状茎愈伤组织进行诱导.结果表明:在17～22℃,光照12 h,添加0.5mg/L 6-BA和0.1mg/L NAA,种子和根状茎愈伤组织的诱导率高为57%,30mg/L GA3和35%PEG6000种子萌发效果最好,萌发率分别为39.3%和37.9%.故低浓度的GA3、2,4-D和PEG6000都能促进种子萌发.