产超广谱β-内酰胺酶的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的检测及耐药性分析

按美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)2005年制定的标准方法,筛选产超广普β-内酰胺酶(Extended-Spectrum β-Lactamases,ESBLs)的大肠埃希菌(Escherichia coli)和肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumonia),并采用微量肉汤稀释法,对宁夏地区以上2种细菌产ESBLs的耐药情况进行了检测.发现63株大肠埃希菌和41株肺炎克雷伯菌中,45株为产ESBLs菌,总阳性率为43.27%,其中,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌阳性率分别为53.97%(34株)和26.83%(11株).45株产ESBLs菌对美罗培南的敏感率为100%.对头孢他啶的敏感率为76.47%,而对其他抗菌药物敏感率较低.实验证明,宁夏地区产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性严重,应限制广谱β-内酰胺类抗生素,特别是第3代头孢菌素的使用.从目前耐药性监测来看,美罗培南可作为治疗产ESBLs菌严重感染的有效药物.     

宁夏牛源克雷伯菌和大肠埃希菌分离株产超广谱β-内酰胺酶基因型检测

为了解宁夏牛源产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）肺炎克雷伯菌（Klebsiella pneumonia）和大肠埃希菌（Esche-richia coli）的耐药性和基因型分布,采用美国临床实验室标准化研究所（CLSI）2008年推荐的双纸片确证试验,对宁夏地区100株克雷伯菌和大肠埃希菌进行产ESBLs确定,并采用PCR扩增法和克隆测序法对产ESBLs菌株进行基因分型.结果显示,宁夏地区有42株产ESBLs菌株,阳性率为42%;其中31株菌扩增呈阳性,产TEM型菌17株,产SHV型菌14株,产CTX型菌15株;同时产3种基因型菌1株,同时产2种基因型菌13株,产单一基因型菌17株,分别占产ESBLs菌株的2.38%,30.95%,40.48%;多表现为多重耐药.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的检测及耐药性分析

目的 :了解本院临床标本中分离出的大肠埃希菌产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)的状况及其耐药性 ,从而为临床治疗提供依据。方法 :用美国临床实验室标准化委员会 (NCCLS)推荐的初筛和确证实验 ,对大肠埃希菌进行ESBLs的检测 ;并用纸片扩散法进行药敏试验。结果 :从 70株大肠埃希菌中检出ESBLs阳性 11株 ,占 15 .7% ;对亚胺培南、头孢吡肟、舒普深、头孢西丁、丁胺卡那的敏感率分别为 10 0 %、90 .9%、81.8%、72 .7%、72 .7%。结论 :本院大肠埃希菌产ESBLs情况尚好 ;临床治疗应在药敏试验的基础上选用亚胺培南、头孢吡肟、舒普深、头孢西丁、丁胺卡那等药物     

50例大肠埃希菌超广谱β─内酰胺酶检测结果及分析

目的：了解非临床标本中大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBb)的情况及检测最佳底物，以利于ESBLs菌的监控，防止ESBLs菌的传播和区域性流行．方法：用NCCLS推荐的双纸片协同筛选试验和表型确证试验对50例大肠埃希菌进行ESBLs的检测．结果：非临床标本分离的大肠埃希菌产ESBLs阳性率为896，用于ESBLs筛选的最佳底物是CTX，其次为CRO，而CAZ敏感性较差．结论：检测ESBLs，应用双纸片协同法进行初筛，对可疑菌株再用表型确证实验确证．对底物选择应使用两种以上的头孢类抗生素．     

2009年附属医院产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌耐药性监测

目的:了解大理学院附属医院2009年临床分离的产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的分布及耐药性.方法:按美国临床和实验室标准化研究所(CLSI)标准进行ESBLs初筛、表型确证试验和病例回顾性分析.结果:临床各科室共分离肠杆菌科细菌286株,其中大肠埃希菌170株,产ESBLs大肠埃希菌有72株,检出率为42.4%(72/170),产ESBLs菌株对亚胺培南、美洛培南、头孢哌酮/舒巴坦和哌拉西林/他唑巴坦的耐药率分别为1.4%、4.2%、16.7%和16.7%.结论:临床分离大肠埃希菌中产ESBLs菌株耐药性明显高于非产ESBLs菌株,因此加强产ESBLs大肠埃希菌酎药性监测很重要,有助于指导临床医生合理使用抗生素,防止产ESBLs菌株的广泛流行.     

产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌的临床感染分布及耐药性分析

目的-探讨医院产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌的临床感染分布及耐药情况,为临床抗感染治疗合理选择抗生素、减少耐药发生提供依据。方法：收集2010年8月-2011年12月从临床送检标本中分离的大肠埃希菌264株,药敏试验采用K～B纸片扩散法。根据美国临床检验室标准化委员会（CLSI）推荐的纸片扩散法,严格按照其制定的标准进行ESBLs确证实验。采用wHONET5．4软件进行统计学分析。结果：264株大肠埃希菌中检出134株（50．8％）产ESBLs大肠埃希菌,标本分布以痰标本最高（47．76％）,而科室分布以普外科最高（12．61％）。在药敏实验中,产ESBLs菌株对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮／舒巴坦、阿米卡星、哌拉西林／他唑巴坦、呋喃妥因、头孢西丁的耐药性较低（0％。15．5％）：环丙沙星、左氧氟沙星、庆大霉素、复方新诺明,阿莫西林／克拉维酸的耐药性较高（41.3％～82．8％）;青霉素类、头孢菌素类及ATM耐药性高（100％）,临床不宜选用。结论：产ESBLs大肠埃希菌存在多重耐药性,临床实验室应加强产ESBLs菌株的监测,根据,临床药敏结果合理选用抗生素。     

产超广谱β-内酰胺酶阴性杆菌的耐药性检测

目的了解产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）细菌的耐药特点,以指导临床用药。方法用表型确证实验检测224株阴性杆菌产生ESBLs的情况,惠州阳光微生物半自动分析仪SS-100010型系统提供药敏结果。结果在224株受试菌中,共检出产ESBLs细菌78株,总阳性率为34．8％。其中,大肠埃希菌阳性率38．6％;肺炎克雷伯菌阳性率46．7％。产酶菌株对头孢他啶（CAZ）、头孢噻肟（CIX）的耐药率高达97．3％．100％。而不产酶菌株耐药率仅为10％。产酶菌株对氨基糖甙类、喹诺酮类、磺胺类的耐药率分别为：98．5％、86．3％、97％。所有受试菌均对泰能敏感。结论产ESBLs菌株的阳性率近几年有所增高,应引起临床和实验室工作人员的注意并加强对其的检测工作。     

大肠埃希菌ESBLs检测及其耐药性分析

目的探讨本地区大肠埃希菌分离株中超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的阳性率及产酶株对β-内酰胺类抗生素的耐药性。方法采用双纸片协同法检测菌株的ESBLs,并用Kirby-Bauer法检测了415株产ESBLs的大肠埃希菌对16种β-内酰胺类抗生素的耐药性,并对其标本来源和病区分布进行了分析。结果ESBLs总检出率为50．8％,其中ESBLs检出率较高的科室为普外科、脑外科、肾内科、骨科、呼吸内科。所有大肠埃希菌分离株均对Imipenem和Meropenem敏感。产ESBLs株对其他14种β-内酰胺类抗生素的耐药性均高于非产酶株。结论本地区ESBLs检出率较高,分布科室有特殊性,产ESBLs株对抗生素的耐药性高于非产酶株。     

产超广谱β-内酰胺酶的肠杆菌科细菌的研究

目的探讨临床分离的肠杆菌科细菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况,为临床用药提供参考依据.方法采用纸片扩散初筛法、纸片扩散确证试验检测ESBLs.结果 254株肠杆菌科细菌中确证法检出产ESBLs者107株(42.1%).结论 ESBLs是导致肠杆菌科细菌耐药的主要酶.     

肠杆菌科细菌产AmpC酶及超广谱β-内酰胺酶的研究

目的探讨临床分离的耐药性肠杆菌科细菌产AmpCβ-内酰胺酶(AmpC酶)和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况,为临床用药提供参考依据.方法采用纸片扩散确证试验检测ESBLs,三维试验法检测AmpC酶.结果207株肠杆菌科细菌中产ESBLs者95株(占45.9%),产AmpC酶者52株(占25.1%).结论 AmpC酶和ESBLs是导致肠杆菌科细菌耐药的两类主要酶.     

SHV-12型超广谱β-内酰胺酶的原核表达及免疫原性分析

利用PCR技术扩增了SHV-12 ESBLs目的基因,并将目的基因亚克隆到表达载体pET-28a(+)中,获得重组质粒pET-28a-SHV-12转化于表达菌株BL21(DE3)中诱导表达,表达蛋白纯化后经SDS-PAGE电泳分析.结果表明,目的蛋白SHV-12 ESBLs相对分子质量为30 KDa,经蛋白质印迹检测证...     

两种提取牛源大肠杆菌内毒素方法的比较研究

对提取牛源大肠杆菌内毒素粗制品的两种方法进行了比较,为获得含量较高的牛源大肠杆菌内毒素免疫原提供了简便方法和切实可靠的理论依据。实验采用热酚-水法和酚-氯仿-石油醚法提取牛源大肠杆菌内毒素,鲎试剂凝集活性和终点显色法测定热酚-水法提取内毒素粗制品含量约为0．16EU／ng。酚-氯仿-石油醚法提取内毒素粗制品含量约为0．31EU／ng。实验结果表明：酚-氯仿-石油醚法提取的内毒素含量比热酚-水法高,此法不需要透析袋透析,因此更适用于内毒素的大量提取。     

基于区间分析的建设项目经济评估方法比较

为解决项目建设中的不确定性经济评估问题，对区间净现值（INPV）法、区间动态投资回收期（IPT）法及区间内部收益率（IIRR）法等3种项目经济评估方法进行了比较．给出了各区间评估方法的基本概念和评估准则，总结了其优缺点；并对这3种方法进行了比较研究表明，IPT法、INPV法、IIRR法对项目经济评估的结果基本相同，都可以有效地处理经济评估中的不确定性，每种方法能够给出项目某一方面的经济指标，可从一定侧面反映项目的经济可行性以及项目面临的经济风险．为此，对其进行了风险计算，各方法计算所得项目风险排序从小到大为IPT、INPV、IIRR．因此，保守的决策者优先采用的方法顺序为IIRR法、INPV法、IPT法；大胆的决策者采用的方法顺序为IPT法、INPV法、IIRR法．     

6种常用消毒剂对不同细菌消毒效果的比较

目的本研究旨在探讨6种消毒剂对沙门氏菌和大肠杆菌的抑菌效果,明确细菌对消毒剂的耐受效果,为实验动物屏障环境科学使用消毒剂提供重要依据。方法选用分离出的沙门氏菌和大肠杆菌,采用滤纸片法测定各种消毒剂的抑菌、杀菌效果。结果实验结果显示0. 05%古迪安对沙门氏菌和大肠杆菌的抑菌作用效果显著高于其他消毒剂(P <0. 05),其次是0. 05%百毒杀和0. 25%戊二醛溶液,0. 2%过氧乙酸、0. 1%二氯异氰脲酸钠粉和0. 25%新洁尔灭抑菌效果较差。结论本实验0. 05%古迪安对沙门氏菌和大肠杆菌的杀菌效果最有效,可为今后使用动物屏障环境消毒提供重要参考     

稀土药物对大肠杆菌作用的初步研究

目的探讨新的有效抗菌药物及其研究策略和新的抗菌活性筛选试验方法。方法用TAM air微量热仪测定了新合成的二种稀土药物[La（Hsal）2·（tch）]·2H2O和La（Hsal）2·（hq）在37℃时对大肠杆菌作用的产热曲线。结果实验表明药物[La（Hsal）：·（tch）]·2H2O在低浓度下对大肠杆菌有刺激作用,高浓度下为抑制作用,说明药物[La（Hsal）2·（tch）]·2H2O对微生物的生长具有双向生物效应。结论药物La（Hsal）2·（hq）的抑制效果优于[La（Hsal）2·（tch）]·2H2O。     

大肠埃希菌ELISA检测条件的优化

目的对ELISA检测大肠埃希菌方法条件进行优化研究.方法以大肠埃希菌为对象,通过Box-Behnken设计星点响应面实验进行优化实验.结果优化后ELISA检测条件:抗原包被浓度为6.25μg/m L,抗原包被最佳时间为7 h,抗体稀释度最佳为1∶625 0,大肠埃希菌ELISA检测OD值为2.12.结论经实验得证,通过星点响应面实验方法进行大肠埃希菌ELISA检测条件优化,结果合理有效,优化效果良好.     

肺炎克雷伯氏菌D-乳酸脱氢酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

以肺炎克雷伯氏菌（Klebsiella pneumoniae）基因组DNA为模板,应用PCR技术扩增并克隆出D-乳酸脱氢酶的基因（ldhD）,将其连接到表达载体pET-22b(+)质粒上,构建pET-22b(+)-ldhD重组质粒,测序结果100%正确。将重组质粒pET-22b(+)-ldhD转化到大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中,通过氨苄霉素抗性平板筛选,构建大肠杆菌BL21(DE3)-pET-22b(+)-ldhD基因工程菌。重组菌株经IPTG诱导表达,SDS-PAGE蛋白电泳分析,目标条带出现在分子量约37000处,表明D-乳酸脱氢酶基因ldhD在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达。采用紫外分光光度法测定其酶活,底物丙酮酸终浓度为10mmol/L时,在丙酮酸还原为D-乳酸反应方向D-乳酸脱氢酶表现出119.04U/mL的酶活力;底物D-乳酸终浓度为50mmol/L时,在D-乳酸转化为丙酮酸的逆反应方向中表现出0.89U/mL的酶活力。比酶活则分别为9.16U/mg和 0.07U/mg。通过Lineweaver-Burk双倒数作图法,计算出酶反应的米氏常数K_M为10.54mmol/L。经摇瓶发酵后,通过高效液相色谱测定产物,D-乳酸的产量达到3.09g/L。     

不同DDF构成的MZI的光脉冲压缩特性比较

比较了3种不同色散递减类型光纤构成的马赫-曾德尔干涉仪（MZI）的先脉冲压缩特性．结果表明：考虑高阶效应时,各种色散渐减光纤构成的MZI的脉冲压缩比例较大,脉座能量也大,对数渐减光纤构成的MZI压缩脉冲质量最好;不考虑高阶效应时,也是对数渐减光纤构成的MZI的压缩脉冲质量最好．