蛹虫草多糖分离纯化及性质的研究

以蛹虫草菌丝体粗多糖为材料进行分离纯化及性质的研究.提取液浓缩用3倍体积乙醇沉淀,等电点Sevag法除蛋白,10%H2O2脱色,得到的粗多糖经DEAE-DE52纤维素柱层析,用0～0.2mol/L的NaCl洗脱,可以得到未完全分离的多糖.将此多糖经Sephadex-G200柱层析,用蒸馏水洗脱.将多糖用Sepharose CL-6B柱层析进行纯度鉴定,经验证是单一多糖.对多糖进行纸层析,证明组分是D-葡萄糖和D-半乳糖.用高效液相色谱法测定多糖分子质量为3.76×104ku.以昆明种小鼠对多糖进行生物活性研究,多糖对小鼠S180肉瘤抑制率达到71.92%.     

蛹虫草虫草素和虫草多糖综合提取工艺的研究

蛹虫草（Cordyceps militaris）在我国本草文献中已有记载。近年来的研究更进一步证实了蛹虫草与冬虫夏草C.sinensis有相同或相似的化学成分和药理作用,是可供开发的新产品,并可以之作为冬虫夏草的替代品。现代科学论证蛹虫草不仅具有特殊的营养价值,而且有明显的药用价值。其中尤以虫草素、虫草多糖等多种生物活性物质的药用价值最为显著。虫草素是一种具有抗菌活性的核苷类物质,对核多聚腺苷酸聚合酶有很强的抑制作用。在DNA转录 mRNA过程中使mRNA成熟障碍,抑制癌细胞的生长。并有降血糖的作用。虫草多糖是一种高度分枝的半乳甘露聚糖,它能促进淋巴细胞转化,提高血清1gG的抗体含量和机体的免疫功能,增强机体自身抗癌抑癌的能力。因此分离纯化虫草素和虫草多糖,对此类抗癌药物的开发具有很大社会价值和意义。本次研究以蛹虫草粉末为原料,研究了蛹虫草中虫草素和虫草多糖的综合提取工艺技术,探讨了采用超声波水提法、超声波醇提法、水热回流法和醇热回流法4种提取方法,选择虫草素和虫草多糖的最优提取办法。并通过用正交试验方法研究考察了水热回流法中提取温度、提取次数、提取时间、料液比4个因素对虫草素和虫草多糖综合提取效率的影响。建立了从蛹虫草中综合提取虫草素和虫草多糖的最佳工艺。采用正交试验对蛹虫草中虫草素和虫草多糖综合提取工艺进行了研究,为进一步开发利用提供有价值的参考数据,也将会对今后产品开发研究具有重要的意义。     

粉被虫草菌丝体多糖的分离纯化及其性质

粉被虫草菌丝体经沸水浸提，醇析，透析，Ｓｅｖａｇｅ法脱蛋白，再经ＤＥＡＥ－纤维素和Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ－１００柱层析纯化，得菌丝体纯多糖ｐｓ１和ｐｓ２．高效液相色谱（ＨＰＬＣ）检测ｐｓ１和ｐｓ２的为单一物质，凝胶过滤法测得ｐｓ１和ｐｓ２的分子量分别为２４０００和１３０００Ｄａｌ，气相色谱分析表明ｐｓ１的单糖组分有Ｄ－甘露糖，Ｄ－葡萄糖和Ｄ－半乳糖，ｐｓ２的单糖组分有Ｄ－甘露糖和Ｄ－葡萄糖，ＩＲ分析     

蛹虫草发酵罐培养生产虫草多糖和虫草素条件的研究

采用摇瓶培养法通过单因素试验和正交设计试验初步拟定蛹虫草的发酵罐培养条件.基本上罐条件为初始pH6.5,温度21℃,转速150rpm,培养时间5d.在此基础上分别以菌量、多糖和虫草素为指标,调整通气量和装液量.当以获得菌量和多糖为目的时,通气量为0.9m3/h、装液量70%.若以得到虫草素为目的,通气量调整为0.7m3/h、装液量70%.     

蛹虫草液体培养联产胞外多糖与菌丝虫草素的实验研究

通过对蛹虫草(Cordyceps militaris)液体发酵产胞外多糖和菌丝虫草素的初步实验研究,获得了蛹虫草液体发酵联产胞外多糖和菌丝虫草素的适宜参数.研究结果表明,蛹虫草液体发酵联产胞外多糖和菌丝虫草素的较适宜的氮源是豆粕粉和6%~8%玉米浆粉;较适宜的碳源是玉米面;维生素B1添加量以10 mg/100 m L、微量元素锰添加量以0.01%Mn SO4为宜、培养基初始p H值以5.5为宜;培养温度22~24℃,接种量1%,培养基装量50 m L和5~7 d的培养时间有利于胞外多糖和菌丝虫草素的产生.     

北虫草菌Y3胞内与胞外多糖的免疫药理研究

对北虫草菌Ｙ３胞内与胞外多糖的免疫药理活性进行实验研究。结果表明,北虫草多糖可显著提高小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,增强血清溶菌酶活力,提高小鼠肝、红细胞ＳＯＤ活力,并可对抗不磷酰胺引起的外周血白细胞数目下降。北虫草菌Ｙ３多糖对小鼠迟发型超敏反应与溶血空斑实验都有促进作用,揭示其对特异性与非特异性免疫的增强作用。     

天门冬多糖的分离纯化及其部分理化性质

中药天门冬冷水提取物，通过脱蛋白、丙酮分级及柱层析纯化，得到三种级份多糖：ＰＡ－Ｗ、ＰＡ－Ｉ和ＰＡ－Ⅱ，凝胶柱层析测定，它们的分子量分别是１５８万、２１９万和２１９万。三种多糖中均含有葡萄糖，甘露糖和半乳糖，但各自的摩尔比相差很大。此外，ＰＡ－Ⅱ中还含有一种未知的糖醛酸。高碘酸氧化、Ｓｍｉｔｈ降解、红外光谱和１３Ｃ核磁共振谱表明，ＰＡ－Ⅱ含α和β两种构型，具有１→４和１→６两种糖苷键，二者比例为５～６：１，是一种具有高度分枝结构的半乳甘露聚糖。     

响应面分析法优化蛹虫草菌糠多糖提取工艺的研究

以蛹虫草(Cordyceps militaris)菌糠为材料,进行菌糠多糖提取条件的优化研究。单因素实验表明,提取温度、水料比及提取时间均不同程度地影响多糖提取率。根据Box-Behnken中心组合实验设计原理对提取温度、水料比、提取时间进行三因素三水平试验设计,采用响应面软件Design-Expert进行处理,获得蛹虫草菌糠多糖提取最佳的优化条件。即提取温度100 ℃,水料比50∶1,提取时间3 h 优化条件下多糖提取率达5.45 %, 多糖提取预测值为5.88 mg·mL^-1。建立的模型拟合度较好,可用来对蛹虫草多糖提取工艺的分析和预测。     

1株蛹虫草的液体发酵试验及蛹虫草多糖的提取

冬虫夏草是一种名贵的强壮滋补中药,但由于其严格的寄生性和特殊的生长地理环境,天然虫草资源越来越少,冬虫夏草的开发利用只有走人工培养之路.经研究蛹虫草的培养时间与菌丝体生产量的关系,虫草多糖的提取以及虫草多糖的测定,结果显示培养6d的菌丝产量最高,发酵时间对菌丝生长量的研究有重要意义,它可以控制大规模发酵生产大周期.多糖含量的测定用硫酸-苯酚法.经实验显示2次浸提比1次浸提的得率要高,摇瓶菌丝体的粗多糖得率为25.0%,精多糖得率为10.15%,均比已报道的虫草多糖得率高,这为人工控制大规模发酵生产大周期提供科学依据.     

HPLC法测定人工蛹虫草子实体中虫草素

为测定人工蛹虫草子实体及培养基中的虫草素，采用高效液相色谱法(HPLC)，以十八烷基硅烷键合相硅胶为固定相；磷酸盐缓冲溶液(pH6．5)-甲醇(85：15)为流动相；检测波长260nm；其流速为lmL／min。结果是人工蛹虫草子实体中虫革素含量在1．1l％～1．44％之间，平均值为1．29％，RSD为9．6％。天然冬虫夏草中仅测得痕量虫草素。结果表明：不同的人工蛹虫草样品中虫草素含量有一定差异，且高于天然冬虫夏草。     

优化条件对蛹虫草菌丝体与胞外多糖得率研究

采用摇瓶法对蛹虫草无性型菌种(ACCC 50383)菌丝体发酵培养,以菌丝体与胞外多糖得率为指标,通过单因素方差分析、S-N-K多重比较和回归方程分析,分别考察6种碳源和6种氮源,确定最适碳源为蔗糖,最适氮源为大豆蛋白胨;对发酵条件的研究表明,获得较高产率的发酵时间为6 d,最适发酵温度为(26.3±0.9)℃,发酵液初始pH值对发酵产率无影响,获得最大发酵产量时装液量为(208±28)mL。     

芥菜多糖的研究（Ⅰ）─—水溶性芥菜多糖的提取纯化和部分理化性质的鉴定

从芥菜干中投取水溶性多糖，经分离纯化后得棕色固体，再经双氧水缓慢氧化脱色得白色固体，经市效液相色语分析鉴定，本品含有葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖等六种组分．     

古尼虫草生理活性物质的检测与分析

测定了处于各个不同生长期的古尼虫草中虫草多糖、虫草氨基酸、虫草素三种活性物质的含量 .结果表明 :虫草多糖含量最高可达 2 8.2 mg/ g,氨基酸含量达 2 8.62 m g/ 10 0 mg干菌丝 ,虫草素含量达 13 5 0μg/ g.     

蛹虫草功效成分研究进展

蛹虫草除了含有蛋白质、脂类、糖类、维生素、微量元素等生命基本元素外,还含有虫草酸、虫草素、虫草多糖、超氧化物歧化酶等多种生物活性物质.综述了近些年来对蛹虫草功效成分的相关研究进展.     

紫孢侧耳多糖的提取、纯化及性质的研究

从紫孢侧耳「Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓ ｃｏｒｎｕｃｏｐｉａｅ （Ｐａｕｌ：Ｐｅｒｓ．）Ｒｏｌｌ．」子实体中加微量酶提取水溶性多糖，经脱蛋白，ＣＭ－纤维素层析柱分离纯化，得到２个组分多糖：ＰＣ－Ⅰ和ＰＣ－Ⅱ，层析分离后，用醋酸纤维薄膜和聚丙烯酰胺电泳鉴定均为单一组分。红外史收光谱分析，ＰＣ－Ⅰ为β－糖苷键型，ＰＣ－Ⅱ为α－糖苷键型。     

甘薯多糖提取纯化及理化性质初步研究

通过正交实验,确立实验室小量、快速、高效提取甘薯多糖的最佳操作条件,建立了一种新的提取方法,即中性条件下,溶液与溶质体积比为2,乙醇与浓缩液体积比为3,浸提时间为2 h,浸提温度为65℃,甘薯多糖提取率大于90%.利用这种改进的提取方法,分离纯化得到一种甘薯多糖.经纸层析、Sephadex G-200柱层析、紫外扫描、红外光谱分析,确定该多糖为均一多糖,相对分子质量为4.6×104,单糖组成为β-葡萄糖.     

蛹虫草多糖对亚急性酒精损伤小鼠血清肝功能指标的影响

目的探讨蛹虫草多糖(Cordyceps militaris polysaccharides,CMP)对酒精诱导的小鼠亚急性肝损伤功能的影响.方法 ICR小鼠被随机分为4组:正常对照组、亚急性酒精损伤模型组、蛹虫草多糖低剂量组(0.25 g/kg)、高剂量组(0.5 g/kg).除正常对照组外,其余3组分别给予30%乙醇12 m L/kg,在每日灌胃乙醇6 h后,灌胃相应剂量的蛹虫草多糖,对照组和模型组同时灌胃生理盐水,连续28 d后,处死所有小鼠,按试剂盒要求检测血清中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)活性,总蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,ALB)、血清球蛋白(globulin,GLO)、甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,CHOL)含量水平;取肝脏计算其指数.结果与对照组比较,模型组小鼠的肝脏系数、血清中ALT,AST,TG,CHOL均升高,而血清TP,ALB,GLO含量下降.CMP可明显降低酒精致肝损伤小鼠的肝脏脏器系数,降低血清ALT和AST活性以及TG和CHOL水平,升高血清TP,ALB,GLO含量.结论蛹虫草多糖具有明显改善酒精诱导的小鼠肝损伤功能.     

白虫草多糖的提取及其抗炎功能

用超声波提取法从白虫草（Cordyceps militaris Link）全草中提取多糖, 通过响应面法确定最佳提取工艺, 利用高效液相色谱（HPLC）法检测白虫草多糖的成分, 鉴定其主要的单糖组成, 并利用RAW264.7体外细胞抗炎模型检测白虫草多糖的抗炎效果. 结果表明： 最佳提取工艺为提取温度65 ℃, 超声波功率1 800 W, 提取时间3.0 h, 该条件下的提取率可达31.56%; 其单糖组成分别为Ara,Gal ,Xyl,Man,Glc和Rha; 白虫草多糖具有抗炎活性.