2种三疣梭子蟹居群线粒体Cyt b和S-rRNA基因片段序列变异研究

目的：通过对2种三疣梭子蟹居群样线粒体C弘b和S-rRNA基因片段的序列分析,探讨其遗传变异,为种质资源的管理、保存和利用提供依据．方法：采集山东潍坊和福建厦门两个不同居群的三疣梭子蟹样,提取其线粒体DNA．由Genebank获得三疣梭子蟹完整线粒体DNA序列（登陆号：NC_005037）,设计扩增Cyt b和S-rRNA基因片段引物,经PCR扩增获得预期产物,纯化后测序．结果：以提取的线粒体DNA为模板扩增出特异性强的Cyt b和S-rRNA基因片段,与预期条带长度429bp和465bp吻合;2个基因片段的AT含量均高于GC含量;Cyt b基因片段有3个位点发生了突变,S-rRNA只有1个位点发生了突变;在两种居群的4个突变位点中,2个位置突变为相同的碱基,且所有突变位点均呈转换方式．结论：Cyt b基因序列比S-rRNA基因序列具有相对高的突变率;研究的2个基因片段的突变位点的碱基置换主要呈转换方式;来自2个三疣梭子蟹居群样本的线粒体S-rRNA基因的突变发生在同一位点且突变为相同碱基,表明2个居群具有较近的亲缘关系．     

内蒙古苜蓿盲蝽属Adelphocoris Reuter的记述——(异翅亚目:盲蝽科)

本文首次对内蒙古苜蓿盲蝽属Adelphocoris Reuter 的17种昆虫进行了系统的记述,其中黑唇苗蓿盲蝽A.nigritylus Hsiao,三环苜蓿盲蝽A. triannulatus(Stal),光胸苜蓿盲蝽A.laeviusculus Vinokurov,中黑苜蓿盲蝽A.suturalis(Jakovlev),淡尖苜蓿盲蝽A.apicalis Reuter,淡缘苜蓿盲蝽A.luridus Reuter,短小苜蓿盲蝽A.ponghvariensis josifov 等7种为我区首次记录的害虫,四点褐苜蓿盲蝽A. piceosetosus Kulik 为中国新记录种。文中例出该属内蒙古种类分种检索表,并简要描述了上述新记录种的特征。     

利用线粒体 DNA Cytb 基因 PCR-RFLP 分析方法鉴别青鱼和草鱼

建立了一种以线粒体细胞色素 b（Cyt b）基因为标靶,应用 PCR -RFLP 技术进行草鱼和青鱼种质鉴定的分析方法。设计一对引物 QYCYT -S 和 QYCTY -A 分别对青鱼和草鱼的 Cyt b 基因进行了 PCR 扩增,并选用 BglⅠ和 EcoRⅡ两种限制性内切酶对扩增产物进行酶切分析。结果表明,草鱼和青鱼都可以扩增出1111 bp 的条带,两种酶切检验发现,草鱼扩增产物能被 BglⅠ切成247 bp 和864 bp 两个片段,而青鱼的 PCR 产物能被 EcoRⅡ切成140 bp 和971 bp 两个片段,这表明,mtDNA Cyt b 基因 BglⅠ和EcoRⅡ的酶切位点都可作为鉴定青鱼和草鱼的有效分子标记。利用 PCR -RFLP 分析 mtDNA Cyt b 基因的方法操作简单,是一种快速鉴别草鱼和青鱼的可靠方法。     

苜蓿盲蝽属(Adelphocoris)细胞色素B基因片段序列分析(半翅目:异翅亚目:盲蝽科)

用蛋白酶K消化法提取并正反链双向测序获得半翅目盲蝽科盲蝽亚科苜蓿盲蝽属（Adelphocoris）6个种以及苜蓿盲蝽Ad．lineaolatus的3个种群的线粒体DNA细胞色素b基因片段的序列,应用Mega计算该8个cytb432bp片段序列的碱基组成、核苷酸的种间变异率和所编码的144个氨基酸的变异率,序列的碱基组成中A＋T的平均含量较高且在第三位点最高。平均达到81．6％,表明该基因在密码子的使用上具有偏向性,变异位点和信号位点多发生在三联体密码子的第三位点,第二位点最为保守,不同异型序列间的转换＋颠换（ns＋nv）值最高的为100,最小的为0;转换／颠换（ns／nv）值最高为9．33,在Ad．fasciaticollis与Ad．sutualis之间,最低为0．88,在Ad．lineaolatus的宁夏和甘肃种群之间。几种颠换类型都能够在本属的异型序列之间看到,苜蓿盲蝽属的不同异型序列间的差别大小各异,差异最大的是苜蓿盲蝽Ad．lineaolatus的甘肃种群（Ad．lineaozatus2）与内蒙古种群（Ad．lineaolatus3）之间,具有100个碱基的差异,宁夏种群与甘肃种群之间的核苷酸变异率为7％,而二者与内蒙古种群的变异率分别为23％和28％,大于或等于与其他种类间的变异,所以该2个种群与内蒙古种群（典型的Ad．lineaolatus）已处在种化过程的末期,已经形成不同的新种,种间差异最小的是Ad．rufescens与Ad．luridus,变异率为0,应为同一个种,所以Ad．rufescens的分类地位有待于进一步研究证实。     

柽柳沙鼠Cytochrome b基因的克隆和进化分析

目的对柽柳沙鼠线粒体Cyt b基因全序列进行测定,并对其进行鉴定及进化分析。方法根据已知柽柳沙鼠基因序列设计引物,采用PCR产物测序法,对目的片段进行测序鉴定。结合已公布啮齿类动物Cyt b基因序列,分析其碱基组成、遗传距离、并基于极大似然法和最大简约法构建系统进化树。结果获得柽柳沙鼠线粒体Cyt b基因全序列,其与长爪沙鼠和子午沙鼠均具有较高的同源性;进化分析结果显示,柽柳沙鼠与沙鼠属和仓鼠科动物遗传距离较近。柽柳沙鼠Cyt b基因碱基组成与沙鼠属和家鼠属动物相似,具有哺乳动物mt DNA基因特点。结论本研究为以柽柳沙鼠Cyt b基因序列为参考,初步计算了柽柳沙鼠与沙鼠属、家鼠属、仓鼠科及其它啮齿动物的进化关系,本研究为柽柳沙鼠及沙鼠属动物进化、线粒体的结构和功能研究奠定基础。     

苜蓿盲蝽成虫对马铃薯甲虫低龄幼虫的捕食功能反应

研究苜蓿盲蝽(Adelphocoris lineolatus Goeze)成虫对马铃薯甲虫(Leptinotarsa decemlineata Say)低龄幼虫的捕食功能反应,为新疆马铃薯甲虫天敌的有效利用提供理论依据,本研究采用室内饲养观察方法,并用HollingⅡ型圆盘方程对结果进行拟合。结果显示:苜蓿盲蝽成虫能够有效捕食马铃薯甲虫低龄幼虫;苜蓿盲蝽成虫对马铃薯甲虫1、2龄幼虫的捕食功能反应均符合HollingⅡ型圆盘方程;在一定范围内捕食量随马铃薯甲虫幼虫密度的增加呈增大趋势;苜蓿盲蝽成虫对马铃薯甲虫的控制能力1龄幼虫(16.0055)强于2龄(6.0659)。结论:室内饲养观察表明,苜蓿盲蝽具有杂食特性;苜蓿盲蝽对马铃薯甲虫低龄幼虫具有一定控制作用。     

苜蓿盲蝽属6种昆虫不同地理种群同工酶比较研究

应用聚丙烯酰胺凝胶垂直板型电泳技术,对内蒙古苜蓿盲蝽属(AdelphocorisReuter)的6种苜蓿盲蝽不同种群的酯酶同工酶(EST)、过氧化物同工酶(POD)、乳酸脱氢酶同工酶(LDH)进行比较研究.结果表明,6种苜蓿盲蝽属昆虫不同种群的酯酶同工酶(EST)谱带清晰、稳定,且不同种群间有差异;6种苜蓿盲蝽中,只有苜蓿盲蝽A.lineolatus的POD同工酶染出的酶带最多,且在雌雄两性间的活性差异较大,但染出的酶带数少于EST同工酶,活性也弱于EST同工酶,其余种类染出的酶带较少.POD同工酶特征的支序分析结果表明,苜蓿盲蝽A.lineolatus的4个种群分为2大支系,不同的地理分布和生态环境是导致同工酶酶谱趋异的主要原因.     

海南产花鳗鲡细胞色素b基因的克隆及序列分析

线粒体细胞色素b基因是目前研究鱼类分子系统进化的重要分子标记.笔者以日本鳗鲡线粒体基因组序列为模板设计并合成引物进行PCR扩增,并将扩增产物经琼脂糖凝胶电泳和纯化后,克隆到pMD18-T载体、测序,成功得到全长为1 140 bp的海南产花鳗鲡细胞色素b(Cyt b)基因序列.将该基因全长序列递交到Genebank数据库,获得序列登录号为EF690363.用DNA分析软件MEGA2比较了海南产花鳗鲡与递交到GenBank中的8种分布在中国东南沿海、日本海域及南太平洋海域的鳗鲡属(Anguillia)细胞色素b基因的地理差异,并构建了系统进化树.结果显示:日本产和夏威夷产花鳗的地理差异小于海南产花鳗与它们之间的地理差异.     

苜蓿盲蝽的发生规律及防治

2002年苜蓿盲蝽在132团局部严重发生 ,对棉花生长遭成一定危害。为此 ,本文通过对苜蓿盲蝽的发生危害特点、发生原因进行了初步调查探索 ,并提出了相应技术措施     

涉案偶蹄目动物DNA条形码构建

【目的】利用线粒体DNA条形码标记鉴定涉案偶蹄目动物,为解决偶蹄目动物残体、制品的鉴定难题提供技术参考。【方法】对16个偶蹄目动物物种共67份样本,采用试剂盒提取DNA,扩增、测定物种的线粒体DNA的COI基因、Cyt b基因片段;在GenBank上Blast搜索进行同源性分析;利用MEGA 7.0软件分别比较这两个基因片段种内和种间遗传距离,构建系统发育树。【结果】在同源性分析中,西伯利亚狍(Capreolus pygargus)的Cyt b基因片段与GenBank中西伯利亚狍、欧洲狍(Capreolus capreolus)基因序列的同源性均为99.64%~99.82%,该片段不能区分西伯利亚狍与欧洲狍这两个近缘种。其余测序结果与数据库中参考序列一致且相似度较高。对于COI片段,种内遗传距离为0~1.4%,种间遗传距离为1.8%~18.8%。对于Cyt b基因片段种内遗传距离为0~0.5%,种间遗传距离为4.0%~15.8%。两个片段的种内遗传差异均小于种间遗传差异,存在较为明显的条形码间隔。COI和Cyt b基因片段的系统发育树中,同物种的不同个体均能形成具有较高支持度的单分支;不同物种之间界限清晰,每个物种的所有个体均能够形成具有较高支持度的单分支。【结论】基于COI和Cyt b基因片段构建的DNA条形码均可用于对涉案偶蹄目动物的物种鉴定。在物种鉴定中,可采用两个片段联合使用的方式,尤其是对于近缘种的鉴定,以降低错误风险。     

苜蓿盲蝽属10种昆虫同工酶的比较研究

运用聚丙烯酰胺凝胶垂直板型电泳技术,对苜蓿盲蝽属（Adelphocoris Reuter）10种苜蓿盲蝽的酯酶同工酶、过氧化物同工酶和乳酸脱氢酶同工酶进行比较研究．同工酶电泳图谱及聚类结果表明,苜蓿盲蝽属10个种的酯酶同工酶谱带清晰、多态性强、稳定性好,酯酶同工酶酶谱特征可以用于苜蓿盲蝽属昆虫的分类鉴定．应用系统发育分析软件包WinClada1．00．04对酶谱数据进行分析运算,获得10个种间的系统发育关系为：（A．ponghvariensis,A．lineolatus）（A．reicheli（A．ferrugineus,A．quadripunctatus））（A．melanocephalus（A．obliquefasciatus（A．triannulatus（A．fasciaticollis,A．tenebrosus））））．     

肠杆菌CB-2的生长特性及质粒特性

为研究微生物对氯苯的降解特性和生长特性,采用从活性污泥样品中分离得到的一株肠杆菌CB-2对氯苯进行降解实验.结果表明:肠杆菌CB-2在氯苯质量浓度为100mg/L的无机盐液体培养基中,24 h内对氯苯的降解率可达81.2%;肠杆菌CB-2不经诱导抗氯化汞的能力达20 mg/L;可以耐受的氯苯质量浓度为500 mg/L,并具有较宽的底物利用范围.为确定降解基因的位置,采用苯甲酸钠法对肠杆菌CB-2进行质粒消除.实验结果表明,质粒与氯苯的降解性有关,而与抗生素的抗性无关.     

西北叶盲蝽区系调查一新种记述（半翅目：盲蝽科）

文章记述了我国西北地区半翅目盲蝽科叶盲蝽亚科的十九种昆虫，其中有一新种，多斑斜唇蝽Ｐｌａｇｉｏｇｎａｔｈｕｓｍｕｃｕｌｏｓｕｓｓｐ．ｎｏｖ     

(+)-4-(2-甲基丁基)-4′-氰基联苯的合成

以(+)-对甲苯磺酸-2-甲基丁酯与联苯基溴化镁反应,在催化剂作用下实现手性戊基与联苯偶联,再经碘化和氰化,合成了(+)-4-(2-甲基丁基)-4′-氰基联苯(CB-15)。总收率为15%(以左旋戊醇计算)。同时,就手性戊基与联笨偶联的机理等问题作了讨论。     

红足壮异蝽的生物学研究

本文对为害榆树、梨树的重要害虫——红足壮异蝽Urochela quadrinotata Reuter的形态及生物学特性进行了详细的研究报道,并提出防治措施。     

Effects of substituent position on the interactions between PBDEs/PCBs and DOM

Dissolved organic matters (DOM) have important influence on the environmental behavior and fate of organic pollutants, therefore rationalization of interaction mechanisms between pollutants and DOM has become a hot topic in the field of environmental studies. In this paper, polybrominated diphenyl ethers (PBDEs) and polychlorinated biphenyls (PCBs), widely detected pollutants, were chosen as target compounds. The effects of substituent position on the interaction between PBDEs/PCBs and DOM were explored. Equilibrium dialysis technique combined with quantum chemistry and molecular docking calculations were employed to reveal the interaction mechanism from the view of charge distribution and molecular conformation. It is shown that non-ortho-substituted isomers have larger volumes and stronger hydrophobicity than those of ortho-substituted, therefore non-ortho-substituted isomers bind more favorably with DOM by hydrophobic partition. By calculating the atomic charge distribution of target chemicals and Leonardite humic acid (LHA) molecular model, π-πinteractions between the aromatic rings of target chemicals with LHA are proposed and further proved in molecular docking calculations. There were 10, 8, 6 docking conformations demonstrating π-πinteraction with LHA for CB-77, BDE-77 and BDE-47, respectively, but none was found for CB-47. By comparing the change of dihedral angle of the aromatic rings and energy barrier, non-ortho-substituted PBDEs/PCBs have larger dihedral angle adjustment space and flexibility, which results in stronger interaction and binding capability with DOM than ortho-substituted isomers. This paper shed some lights on the effect of substituent position on the environmental behaviors of PBDEs and PCBs.     

Cloning,expression and binding specificity analysis of odorant binding protein 3 of the lucerne plant bug, <Emphasis Type="Italic">Adelphocoris lineolatus</Emphasis> (Goeze)

Credible evidence shows that odorant binding proteins (OBPs) are required for insect olfaction perception and play a key role in transporting hydrophobic odorants across the sensillum lymph to the olfactory receptors (ORs). In the present study, a novel OBP (AlinOBP3) gene from the lucerne plant bug, Adelphocoris lineolatus, was cloned and expressed. The expression pattern of AlinOBP3 was evaluated by qPCR, which indicated that AlinOBP3 was dominantly expressed in antennae. The binding properties of AlinOBP3 with 9 cotton volatiles and 5 sex pheromone analogs were measured by fluorescence competitive binding assays with the fluorescence probe 1-NPN. The results revealed that of 9 cotton volatiles, Myrcene, β-Ocimene and α-Phellandrene can bind with AlinOBP3. α-Phellandrene especially bound to AlinOBP3 with a high binding affinity, with a dissociation constant of 56.68 μmol/L. Of the 5 sex pheromone analogs, Hexyl butyrate had the strongest binding affinity with AlinOBP3, with a dissociation constant as 59.53 μmol/L. Butyl butyrate, trans-2-Hexenyl butyrate and Ethyl butyrate had medium binding affinities with AlinOBP3, with dissociation constants of 227.39, 108.77 and 143.47 μmol/L, respectively. The results suggest that AlinOBP3 might be a pheromone binding protein (PBP) with a dual-function for the perception of sex pheromones and plant volatiles.     

娇导蝽属及盲异蝽属新种记述(半翅目:异蝽科)

本文记述5个发现于我国的异蝽科新种及一个新组合，分隶于桥异蝽属UrostylisWest－wood（叉娇异蝽Urostylisfurca（Lin）（新组合）；猫儿山娇异蝽UrostrylismaoershanensisRen，sp．nov．（新种）；湖北娇异蝽UrostylishubeiensisRen，sp．nov．（新种））及盲异蝽属UrolabidaWestwood（保山盲异蝽UrolabidabaoshananaRen，sp．nov．（新种）；华夏盲异蝽UrolabidasinicaRenetLiu,sp.nov.（新种）；宫本盲异蝽UrolabidamiyamotolRen，sp．nov．（新种））计6种．并提出以下的异蝽科新异名关系：Urolabidanigromarginatus(Reuter,1881）（＝UrostylisguangdongensisChen，1994，syn.nov．）;UrochelasiamensisYang1938（＝UrochelalongmenensisChen，1994,syn．nov．）