嵌合抗原受体T细胞疗法专利态势分析

嵌合抗原受体T细胞疗法是最有可能战胜癌症的肿瘤免疫疗法,是生命科学领域极具发展前景的前沿产业,对知识产权的保护至关重要。本文对嵌合抗原受体T细胞疗法的国际和国内专利态势进行分析,包括对专利申请趋势、专利产出国、专利应用国、主要申请人、技术聚类主题等进行分析,从而比较我国与国际的差距与不足,有助于我国嵌合抗原受体疗法行业更好地运用专利手段保护自身知识产权,促进企业创新发展。本文研究发现,相比于美国,我国科研院所在嵌合抗原受体T细胞疗法领域的专利产出不高,反应了我国在该技术基础研究投入方面的不足,我国对全球范围内的专利布局也缺乏重视。建议我国应加大对嵌合抗原受体T细胞疗法的基础研发投入,开发和掌握关键技术;注重国际专利布局,增强国际市场竞争力;强化科研院所和企业之间的联动合作,以鼓励和促进专利技术的转化。     

嵌合抗原受体T细胞技术相关专利分析

近年来,嵌合抗原受体T细胞免疫疗法已逐步成为针对肿瘤治疗的研究热点。在对627项CAR-T技术专利进行系统研究的基础上,通过分析该领域的专利申请状况,提出了当前该技术的发展态势;通过分析判断该项专利技术的市场应用阶段及前景,研究提出了我国在该领域应重点突破的关键技术以及技术创新方向。     

嵌合抗原受体T细胞治疗恶性血液病关键技术的建立及其临床应用

血液系统恶性疾病是一个严重危害人民健康的疾病,特别是白血病、淋巴瘤、骨髓瘤.治疗该类疾病的较好方案是造血干细胞移植,但在造血干细胞移植之后,还是有少数病人会复发.浙江大学附属第一医院黄河团队的"嵌合抗原受体T细胞治疗恶性血液病关键技术的建立及其临床应用"项目,针对该问题提出了CAR-T(嵌合抗原受体修饰T细胞)疗法,项目成果获2020年度浙江省科学技术进步奖一等奖.     

Ph染色体在急性淋巴细胞白血病中的诊断

目的：探讨Ph染色体在急性淋巴细胞白血病中的诊断意义。方法选取2013年4月～2014年4月由我院血液科收治的24例成人初治急性淋巴细胞白血病患者和10例慢粒急淋变患者为研究对象。使用改良的染色体显带技术对患者的Ph染色体进行检测,回顾性分析34例患者染色体核型检测过程和检测结果。结果使用改良的染色体显带技术对34例急性淋巴细胞白血病患者进行Ph染色体的检测,检测出25例患者的ph染色体呈阳性,总检出率为73.5%,其中初治急性淋巴细胞白血病患者16例,检出率为66.7%,低于慢粒急淋变患者90%的检出率,两者在比较上,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论对急性淋巴细胞白血病患者采用染色体显带技术对Ph染色体进行监测,其检出率高,对ph染色体有一定的灵敏度,可作为临床急性淋巴细胞白血病的诊断标准。     

不同诱导化疗治疗急性淋巴细胞白血病分析

目的对比不同化疗方案治疗成人急性淋巴细胞白血病效果。方法将患有急性淋巴细胞白血病的50例患者,随机分为VDLP组25例和VTLP组25例。分别行VDLP和VTLP化疗治疗。结果对两组患者治疗后CR（完全缓解率）进行比较：VDLP组为84.0%,VTLP组为88.0%,无明显差异（P〉0.05）;比较两组患者完全缓解所需时间显示：VTLP组患者完全缓解所需时间为15~68天,VDLP组患者完全缓解所需时间为21~102天,差异明显（P〈0.05）,具有统计学意义。结论行化疗方法治疗成人急性淋巴细胞白血病方面,VTLP疗法完全缓解所需时间明显低于VDLP疗法,值得在临床广泛应用。     

急性淋巴细胞性白血病并脾破裂1例

患者,男性,28岁。因低热,腰痛半月,牙龈出血,皮肤瘀点一周在院外抗炎对症治疗无效于1993年6月5日住院。既往无肝炎、疟疾史。查体,体温38℃,轻度贫血貌,颈部和上肢皮肤散在大小不等的瘀点,牙龈及舌面见有陈旧性血疱痂。胸骨压痛,腹软,脾肋下一指,左肾区叩痛。实验室检查:Hb120g/L,WBC70.4×10~9~/L,N0.12,L0.14,原淋 幼淋0.74.BPC34×10~9/L。骨穿,增生极度活跃,粒、红、巨三系明显受抑。淋巴细胞明显增生,占96％,其中原淋 幼淋占91.2％,细胞形态较小,胞核多呈园形,该染色质稍粗,核仁隐显不定,浆少,呈兰色,部分细胞浆内含有少数粗大紫红色颗粒。POX(一),B超:脾肿大。诊断:急性淋巴细胞性白血病。入院第三天夜间,患者于大便后突然感左中上腹疼痛,继之面色苍白,四肢冰凉,血压下降,急给于两路补液1500ml,输血800ml及升压等抢救,6月8日8时血压6/3kpa,心率120次/分,脉搏触不到,左中上腹压痛伴局限性肌卫。左下腹腔穿刺抽得不凝固暗红色血液。剖腹探查:见腹腔内有约4000ml暗褐红色不凝固血液,左中上腹充盈大量凝血块,脾脏为暗褐色,遍布灰白     

急性淋巴细胞白血病治疗前后血清sE-cad测定的临床意义

为探讨急性淋巴细胞白血病(ALL)患者治疗前后血清可溶型上皮细胞钙粘蛋白(sE-cad)的水平变化与疗效的关系。使用酶联免疫吸附双抗体法(ELISA)测定ALL患者组、对照组血清sE-cad的水平。结果表明:ALL患者初治组血清sE-cad水平(83.98±22.62)ng/mL及未完全缓解组血清sE-cad水平(75.68±14.01)ng/mL明显高于对照组(25.74±7.79)ng/mL及完全缓解组(27.77±10.21)ng/mL,差异均有统计学意义(P<0.01);ALL患者血清sE-cad水平治疗达完全缓解后血清sE-cad水平较治疗前(84.26±22.49)ng/mL明显下降,差异有统计学意义(P<0.01),未完全缓解组治疗前后差异无统计学意义(P>0.05);ALL患者高白细胞血症组血清sE-cad水平(111.18±21.23)ng/mL明显高于非高白细胞血症组(75.32±15.11)ng/mL,差异有统计学意义(P<0.01);ALL患者治疗前后血清sE-cad水平与骨髓原始幼稚细胞百分数呈正相关关系,相关系数为0.687(P<0.01)。结论血清sE-cad水平与ALL患者疗效相关,检测sE-cad对ALL患者的预后判断和疗效观察有一定意义。     

急性淋巴细胞性白血病并发空肠扭转一例报告

急性白血病的胃肠病变占白血病患者尸体解剖的13%,病理损害从贲门到直肠均有所发现·肠损害多呈斑状或呈息肉状,有者很大,可出现溃疡,甚至诱发肠套叠或肠梗阻,肠坏疽,甚至肠穿孔.致命性的胃肠道出血,于急性淋巴细胞性白血病较急性粒细胞性白血病尤为常见.笔者曾诊治一例急性淋巴细胞性白血病(L_1型),在治疗过程中死于并发空肠扭转、肠出血与肠坏死.查阅国内外资料,尚未见有类似报道,特报告于下,供同道们参考.     

骨髓涂片检测急性淋巴细胞白血病微小残留病的意义

为了建立一种简便、快速的微小残留病的检测方法,采用聚合酶链反应技术,选择３年内的急性淋巴细胞白血病骨髓涂片标本,进行免疫球蛋白 Ｉｇ Ｈ 和 Ｔ 细胞受体ｒ 链基因重排的检测．其结果１８ 例初诊病例的骨髓涂片标本中, Ｉｇ Ｈ 阳性率７２ ．２ ％ ,与初诊骨髓液标本的 Ｉｇ Ｈ 阳性率７３ ．７ ％ 对比基本一致［１］ ．说明骨髓涂片能进行微小残留病的检测,这对于临床考察急性淋巴细胞白血病的缓解和预测其早期复发均具有一定的临床意义     

儿童急性淋巴细胞性白血病复发期miRNA的表达特征研究

儿童急性淋巴细胞性白血病(Acute Lymphoblastic Leukemia,ALL)是儿童常见的恶性肿瘤.尽管已有研究报道miRNA在ALL发病机理中起重要调控作用,但其与ALL复发的关系目前还不完全清楚.本研究采用第二代高通量测序技术分别对一例B淋巴细胞ALL(B-ALL)和一例T淋巴细胞ALL(T-ALL)患儿初发和复发期的骨髓细胞进行miRNA检测,比较初发和复发期样本miRNA的表达差异.在T-ALL和B-ALL中分别鉴定出复发期较初发期表达发生明显变化的miRNA 168和123种.其中在T-ALL样本中,复发期表达上调的miRNA有115种,表达下调的有53种;而在B-ALL样本中,复发期表达上调的miRNA只有38种,表达下调的有85种.比较两种类型ALL,共有17种miRNA在两种类型中发生相同的改变.通过realtime RT-PCR验证,证实Hsa-miR-17在复发期ALL中明显升高,而Hsa-miR-10a则明显降低.     

树突状细胞在肿瘤免疫治疗中的应用及研究进展

树突状细胞（dendritic,DC）是目前功能最强的抗原呈递细胞,且与肿瘤的发生与发展存在着一定的关系,因此被广泛用于肿瘤免疫治疗中。其抗肿瘤机制为经过不同方式致敏的DC疫苗可将肿瘤相关抗原呈递给T细胞,从而引发机体产生抗肿瘤免疫应答。近年来关于DC的生物学特征及DC疫苗的研究有了很大进展,先本文就此作一简要综述。     

急性非淋巴细胞白血病预后相关因素（附62例分析）

目的：为探索影响预后的因素，对62例急性非淋巴细胞白血病住院患者进行了回顾分析。万法：单变量和多变量分析24项影响完全缓解的变量及31项影响生存期的变量。结苎：表明仅就诊时脾无肿大和骨髓涂片巨核细胞数目≤1个／1．5&#215;2cm^2对CR有利。对CR患者仅第一次缓解期、脾脏有无肿大、治疗前白细胞数值及有无复发对生存时间有显著影响。菇论：以上结果的CR和生存期判断提供了具有参考意义的相关因素，值得临床上进一步扩大验证。     

原小檗碱衍生物诱导急性淋巴白血病细胞凋亡活性及PAMPA研究（英文）

测定了15个原小檗碱衍生物(3-17)及小檗碱(1)和药根碱(2)抑制急性淋巴白血病细胞(包括Reh和Nalm-6细胞)增殖的活性。其中化合物4(9-溴乙基小檗碱),5(9-氯乙基小檗碱)和6(9-溴丙基小檗碱)表现出最为突出的抑制活性:在Reh细胞中,IC50值分别为0.45、0.39和0.57μmol/L;在Nalm-6细胞中,IC50值分别为3.6,4.3和1.17μmol/L。活性均强于先导化合物小檗碱和药根碱(后两者的IC50值均大于20μmol/L)。此外,化合物4和5能够剂量依赖的通过裂解PARP诱导急性淋巴白血病细胞凋亡,降低procaspase-3的浓度,增加活性caspase-3水平,同时提高细胞质中的细胞色素C水平。进一步,Reh细胞用0.5μmol/L的4和5处理36 h,能够显著下调β-catenin蛋白的表达,以上实验结果证明了这类化合物抑制肿瘤细胞增殖的作用机制可能与Wnt/β-catenin通路相关。化合物1、4、5、7和11的PAMPA膜渗透实验说明,C-9位取代的小檗碱衍生物可以提高化合物的细胞膜渗透性。     

急性非淋巴细胞白血病预后相关因素(附62例分析)

目的：为探索影响预后的因素,对６２例急性非淋巴细胞白血病住院患者进行了回顾分析。方法：单变量和多变量分析２４项影响完全缓解的变量及３１项影响生存期的变量。结果：表明仅就诊时脾无肿大和骨髓涂片巨核细胞数目≤１个／１．５×２ｃｍ２对ＣＲ有利。对ＣＲ患者仅第一次缓解期、脾脏有无肿大、治疗前白细胞数值及有无复发对生存时间有显著影响。结论：以上结果的ＣＲ和生存期判断提供了具有参考意义的相关因素,值得临床上进一步扩大验证。     

T载体的应用及研究进展

T载体可直接用于克隆PCR产物,因此应用于大规模的基因克隆中,具有快速、高效、操作简单等优点。对T载体进行了综述,介绍了T载体在生物学众多领域的广泛应用,总结了当今T载体的技术创新和改良,特别介绍了目前最新的新型多功能T载体——定向克隆表达型T载体,并且探讨了T载体未来的发展趋势。     

Elf-1基因在急性髓细胞性白血病中的表达情况

目的:建立实时定量PCR检测Elf-1基因表达水平的方法,了解急性髓细胞性白血病(AML)患者外周血Elf-1基因表达水平.方法:采用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR和相对定量分析法检测33例AML患者:M2型17例、M3型6例、M5型10例和20例健康人外周血的单核细胞的Elf-1表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用公式2~(-△Ct)×100%计算Elf-1基因表达水平.结果:AML组Elf-1表达水平(13.518±19.197)%明显高于健康对照组(2.044±1.321)%(P<0.01),不同AML亚型之间Elf-1的表达水平没有显著性差异(P=0.52),但各亚型AML的Elf-1的表达水平均与健康对照组比较均有显著性差异(P<0.01).结论:建立SYBR Green Ⅰ荧光实时定量PCR分析外周血Elf-1表达水平的方法,检测急性髓细胞性白血病Elf-1基因高表达情况.     

以双侧胸腔积液为首发症状的淋巴瘤合并急性淋巴细胞白血病1例

患者女性 ,19岁。因咳嗽、咳痰10余日 ,伴胸闷、气短、乏力5d入院。患者于10余日前无明显诱因出现干咳 ,有少许白色稀痰 ,伴胸闷、气短 ,活动后症状加重 ,自按感冒治疗无效 ,来我院就诊。门诊摄胸片示 :①右侧胸腔积液 ,②右肺感染。收住我科。查体 :脉搏110次/min ,血压120/90     

cDNA芯片应用在急性白血病研究中的初步探索

基因芯片技术对肿瘤基因组学的研究提供了一种高效的手段．采用基因芯片技术观察了14例初发急性髓系白血病患者12800条基因的表达谱,找到了一些和白血病发生有密切关系的基因．用表达谱的聚类方法分析难治性白血病的基因表达特征,发现一些与耐药相关的基因在难治性白血病人和易治性白血病人中表达有明显不同,证明难治性白血病与耐药有一定关系。     

急性白血病T淋巴细胞及其亚群的研究

应用McAb检测31例急性白血病患者外周血T细胞及其亚群的改变。结果表明总T细胞(T_1)、T辅助细胞(T_4)和T抑制细胞(T_8)百分率均明显低于正常对照组(P<0.01～0.001),且伴有T_4:T_8值的下降(P<0.05)。经化疗缓解后,部分缓解组T细胞及其亚群均恢复正常,完全缓解组T_4细胞仍稍低于正常值(P<0.05)。化疗无效组T细胞及其亚群的改变与未治疗组类似(P>0.05)。急淋T-ALL型时,外周血T细胞及其亚群的改变与一般白血病表现不同,其T细胞标记及T_4:T_8值反而增高。病情缓解时逐渐恢复正常急淋其它型患者,其T细胞及亚群的改变与急非淋患者类似。结果提示,动态观察T细胞及其亚群变化,有助于对白血病患者疗效及预后的判定。