斑马鱼PKR的dsRBM1和dsRBM3重组及体外功能分析

为了重组斑马鱼(Daniorerio)双链RNA依赖的蛋白激酶(DrPKR)的双链RNA结合模体1(dsRBM1)和双链RNA结合模体3(dsRBM3)基因,并对重组基因表达的蛋白进行鉴定和功能分析,设计定向删除引物,应用PCR技术扩增DrPKR的ds RBM1和dsRBM3的基因片段,通过重叠PCR技术将dsRBM1和dsRBM3基因重组在一起得到dsRBM13基因,再将dsRBM13构建到原核表达质粒pET32a上并表达和纯化蛋白;通过表达蛋白的二聚化实验和pull down实验对重组蛋白dsRBM13进行体外功能分析。结果:DrPKR的ds RBM1和dsRBM3重组的蛋白dsRBM13可以进行二聚化和多聚化,且能结合Poly I:C(人工合成的dsRNA)。因此,重组DrPKR蛋白模体dsRBM13仍然具有二聚化和dsRNA结合活性,提示串联了三个dsRBM的Dr PKR激活过程中,串联两个dsRBM对DrPKR激活是必需的,并且在DrPKR结合dsRNA的激活过程中,因dsRNA的长短和空间结构的多样性,含有三个dsRBM的DrPKR可能存在更强和更多的结合方式,因此具有更强的抗病毒免疫反应功能。     

重组人胰岛素及C肽的分离纯化

对基因工程构建的含重组人胰岛素和C肽基因的毕赤酵母工程菌进行诱导表达，工程菌用甲醇诱导72 h后，离心去除菌体，上清液经中空纤维膜超滤后SP-Sepharose Fast Flow阳离子交换柱层析，0~400 mmol/L NaCl梯度洗脱，得到纯度大于92％的重组人胰岛素原。经Lys-C酶和羧肽酶B酶切后，Sephadex G-25柱分离，得到了重组人胰岛素和C肽。     

防空C 3 1 系统的建模与仿真方法论

防空 C3I系统是一复杂大系统 ,借助建模和仿真手段对其进行研究是唯一的途径。根据研究的目的不同对防空 C3I系统模型进行了分类 ,详细介绍了面向过程的模型 ,以及现有的各种建模和仿真方法。对防空 C3I系统的研制、评价提供了有效的方法和途径     

金藻富含半胱氨酸蛋白质CRP1的重组表达和功能分析

金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是动物、植物和微生物中广泛存在的一种小分子蛋白,富含半胱氨酸,具有维持细胞代谢中金属离子稳态和应激条件下重金属离子解毒的功能。文章从金藻Poterioochromonas malhamensis中鉴定了一种新的PmCRP1基因。该基因全长396bp,无内含子,编码131个氨基酸,富含26个半胱氨酸。PmCRP1蛋白的半胱氨酸残基主要排列形式有CCC,CXCC,XCCX,CXC,XXCXX(C是Cys;X是Cys以外的任何氨基酸残基)。这种保守的半胱氨酸排列形式,与金属硫蛋白类似。实时荧光定量分析表明Cd2+,Cu2+,Zn2+,Pb2+,Hg2+离子未能诱导PmCRP1基因表达上调。构建重组质粒pSUMO-PmCRP1并转化大肠杆菌BL21,获得PmCRP1的重组表达。大肠杆菌BL21/pSUMO-PmCRP1对Cd2+,Cu2+,Zn2+耐受性提高。表明PmCRP1具有螯合重金属离子能力,可能是一种新的金属硫蛋白,可用于环境中重金属离子的生物去除。     

基于S3C2410的Linux2.6下I~2C驱动研究

I2C总线是一种简单实用的总线,其驱动采用了特殊的架构。本文在分析I2C驱动总体架构的基础上,以S3C2410的I2C总线为例,分析并实现了I2C总线和设备驱动。     

拟穴青蟹细丝蛋白C的生物信息学分析及重组表达

为了探讨抗原表位与细丝蛋白C(filamin C,FLN c)结构之间的构效关系,对FLN c进行生物信息学分析及分段重组表达.生物信息学分析结果表明,FLN c二级结构以β折叠及无规则卷曲为主,确定其具有9个结构域,三级结构呈免疫球蛋白样折叠,具有典型的细丝蛋白家族特征.基于生物信息学分析,将拟穴青蟹(Scylla ...     

债务重组准则的不足和改进建议

2000年12月财政部对<企业会计准则-债务重组>进行了修订,修订后的新准则在债务重组的定义、方式,债权人和债务人的会计处理等方面都有较大的变化.但其在执行过程中也还存在一些问题.本文就存在的这些问题进行了探讨,并提出了相应的建议.     

液下原子力显微镜对BA膜和C60复合LB膜的重组

利用Langmuir-Blodgett (LB)方法, 以二十二酸 (behenic acid, BA)、 二十酸(arachic acid, AA)、 十八酸 (stearic acid, SA) 和十八胺 (octadecanyl amine, OA)作为辅助成膜材料, 组装了C₆₀复合膜和BA膜, 液下原子力显微镜直接对LB膜在水相中的重组进行观察. 结果表明, C₆₀复合LB膜和二十二酸镉单层膜在水相中都发生了重组, 但前者的重组程度较小, 并且C₆₀聚集体颗粒的粒径均匀. 脂链的重组可能是由于水相中的Cd²⁺减弱了头基与云母基片之间的相互作用引起的, 相同条件下由于混合C₆₀膜中发生酸碱缔合使其重组程度较小.     

某C3I系统中通信技术的应用

论述了通信系统的功能,介绍了车内局域网技术、集群通信技术在某C3I系统中的应用。     

重组腺相关病毒的小量制备与体内体外感染研究

 重组腺相关病毒(rAAV)是近年来发展的较为成熟的一种病毒基因载体, 常用于过表达或者敲低等动物模型的建立与基因治疗等。本研究使用三质粒共转染的方法, 在HEK293细胞中包装出含绿色荧光蛋白(EGFP)基因的rAAV, 通过一系列实验, 确定纯化方法为脱氧胆酸钠裂解, 高浓度NaCl去除杂蛋白, 最后通过肝素层析柱纯化, 经超滤管浓缩后其滴度可达10¹³ gene copys/mL以上。将纯化后的rAAV 感染HEK293 细胞, 通过实验确定使用感染复数为10⁶、感染3 d 的细胞能够表达出高水平的EGFP。将rAAV注射入大鼠中脑黑质致密部, 经过3周的感染发现, rAAV可以特异性地感染多巴胺能神经元, 表达出EGFP。通过以上实验, 建立了一个在实验室小量制备rAAV的方法, 且此方法制备的rAAV完全满足体内与体外实验的要求。     

腐植酸核磁共振波谱的研究——几种甲基化腐植酸中各类碳的T_1值和相对含量

采用PRFT法估测了四种甲基化腐植酸中各类碳的纵向弛豫时间T_1值的范围。指出利用~13C—NMR波谱进行腐植酸结构定量研究时,脉冲重复时间PR设5～10秒为宜。T_1值较小说明腐植酸的分子量较大。记录了八种甲基化腐植酸的NNE~(13)-NMR谱图,并进行了定量估算,除巩县风化煤黄腐酸有明显的醌基吸收信号外,其它各样品均无明显醌基吸收,但芳碳信号都十分明显。数据表明,芳香碳及芳香碳与脂肪碳的比例均按土壤腐植酸、泥炭腐植酸、褐煤腐植酸、无烟煤腐植酸的次序递增,而脂肪碳含量则按相同的次序递减。     

具有多父代重组的遗传算法解0-1背包问题

遗传算法的创始人最初是从自然界获取灵感的,但是后来的遗传算法的研究者也试图将生物界不存在的特征引入遗传算法,多父代重组(或称为N父代重组,N>2)就是其中的一种。有文献显示这种机制在解很多不同的问题时都能有较好的效果。本文用几种多父代重组方法(包括一种新的面向特定问题的方法)解0-1背包问题,结果显示多父代重组确实有较好的性能。     

重组粘质沙雷氏菌几丁质酶C的纯化及酶学性质

为从已构建的重组大肠杆菌pET-22b-chiC获得高纯的几丁质酶C,通过降低培养温度,提高粘质沙雷氏菌几丁质酶C的可溶性表达.表达产物经镍柱亲和层析(IMAC)和Phenyl-Sepharose疏水层析(HIC)分离纯化后,得到电泳纯的几丁质酶.酶学性质研究表明,纯化的几丁质酶C为单体蛋白,相对分子质量为51.8ku;最适pH值为5.0,最适温度为55℃,在55℃的条件下保温4 h后仍有90%以上的酶活力.研究结果还表明,Cu2+,Hg2+,Co2+,Mg2+对酶活力均有明显抑制作用,而Fe2+,Zn2+,Sn2+,Ba2+对酶活力有一定促进作用,Mn2+对酶活力明显促进作用.     

基于S3C2410的I2C总线驱动程序设计

I2C总线是嵌入式系统的重要组成部分,在嵌入式微控制器与外围设备的数据通信中发挥着重要的作用。文章在研究嵌入式Linux驱动程序的基本结构,分析I2C总线工作时序及工作流程的基础上,基于隐藏硬件内部细节实现统一接口的思想,采用嵌入式Linux驱动程序设计方法,针对Samsung公司S3C2410处理器进行I2C总线驱动程序的设计。同时,以CAT1025设备为例进行I2C总线驱动程序的实现。通过实验,验证了基于S3C2410的I2C总线驱动程序设计具有一定的合理性、有效性和实用性。     

稳定同位素^13C防伪墨水的研制及检测

将稳定同位素^13C作为一种新型示踪剂加入到打印机墨水中,采用质谱检测方法寻求其最佳浓度。采用含有不同浓度^13C的打印机墨水,用双路进样的质谱方法检测。得到该墨水同位素浓度在大于（1：230）0．4％以上具有稳定的同位素丰度。用稳定同位素^13C作为示踪剂可以开发出大量防伪产品运用到公共安全领域。     

AD7994与S3C2440的ⅡC接口及Linux下驱动程序的设计

IIC作为目前通用的总线技术,由于它的接线简单,传输速度快,已广泛应用在时钟、EEPROM、小型LCD等设备与CPU的接口中。通过把AD7994与S3C2440的IIC接口相连,并编写相应的Linux驱动程序,使得AD7994可以在S3C2440下正常工作。阐述了嵌入式下如何连接具有IIC接口的外围设备,并详细论述了Linux下IIC设备驱动程序的编写及应用过程。     

债务重组会计准则存在的问题及改进建议

本文就债务重组会计准则存在的采用账面价值计价会产生负面效应．以及会计核算存在困难等问题,提出了改进建议。     

C.I.颜料红57:1晶相转移的研究

利用X-射线粉末衍射法,以α-、β-晶相各自的特征峰为依据,定量分析了β-晶相在水溶液中向α-晶相的转移情况。β相在水溶液中的溶解度大于α相,故易转变成α相。松香处理可减小β-晶相在水中的溶解度,具有延迟晶相转换的效果,延迟转换的作用随松香用量的增多而增强。松香处理还可改善β-晶相的透明度、鲜艳度和着色力。     

电信重组背景下中国移动面临的挑战和对策

中国经济的高速增长,电信市场需求的持续旺盛以及得天独厚的政策优势,为中国移动营造了良好的经营环境。本文在详细分析中国移动、中国电信和中国联通各自优劣势的基础上,探讨了严峻挑战下中国移动应采取的策略和措施,为公司今后的持续发展提供一些思路和建议。     

基于MATLAB的1/3倍频程FIR数字滤波器设计

在深入分析GB T 32 4 1- 1998规定的 1 3倍频程滤波器性能要求的基础上 ,建立了面向MATLAB信号处理工具箱中设计FIR数字滤波器有关函数参数接口的数学模型 ,并通过编程完成了 1 3倍频程数字滤波器设计 .验证表明 ,设计结果的各项性能指标均达到国标规定的 1级滤波器精度要求 .