变性剂诱导的多结构域蛋白质变性现象的研究

从蛋白质变性的构象渐变模型出发，分析了多结构域蛋白质变性过程的特点，用吸附动力学方法得到了可描述多个结构域变性的关系表示式，特别对典型双结构域蛋白质变性过程予以较详细的讨论。通过对比理论计算结果与实验观测结果，发现在一定参数条件下两者符合较好，从构象渐变的观点，对双结构域蛋白质变性过程中出现双S形变性曲线的原因做出了解释，同时对变性过程中可能出现的一些情况进行了预测和分析。     

蛋白质变性的渐变模型

通过对典型蛋白质变性实验的分析 ,证明了在目前蛋白质变性研究领域中普遍使用的二态模型与实际变性过程不符 .在分析已有实验结果的基础上 ,给出了反映蛋白质变性过程特征的新模型———渐变模型 ,该模型显示出蛋白质分子变性是一个构象渐变的连续稳态过程 .     

牛血清蛋白在盐酸胍水溶液中变性函数的研究

了解蛋白质在溶液中的结构稳定性是了解蛋白质生物活性的基础,因此研究蛋白质分子的一个关键性问题就是了解使蛋白质折叠的物理作用及其变性机理.利用化学热力学和光谱学的手段研究蛋白质变性的机理,主要侧重于研究蛋白质变性时所表现出来的热力学函数的变化,以及各种有关的变性参数[1].我们利用微量量热的方法和荧光测定技术研究了30℃和不同pH条件下牛血清蛋白与变性剂盐酸胍在水溶液中的相互作用及牛血清蛋白的变性.用Privalov提出的简单键合模型对量热数据进行了分析[2],得出了二者之间的键合常数k,单个键合自由能Δg及总的吉布斯自由…     

尿素诱导的蛋白质变性现象的研究

通过对典型蛋白质变性实验结果的分析，发现在蛋白质变性研究领域中普遍使用的二态模型所描述的过程，与真实蛋白质变性过程并不相符．在分析已有的实验结果的基础上，给出了反映蛋白质变性过程特征的新表示形式．这一形式表明蛋白质分子变性是一个构象渐变的过程，同时强调在一定浓度的尿素溶液中蛋白质分子均处于相同的构象态．从尿素分子与蛋白质肽链上的相邻二肽形成双氢键的假设出发，利用吸附反应动力学方法，得到了描述蛋白质变性特征的物理量与尿素浓度关系的表示式．结果表明理论值与实验值符合较好，说明建立的模型可较好地描述尿素导致的蛋白质变性现象．     

α-氨基酸在尿素水溶液中的粘度B系数

氨基酸是构成蛋白质的结构单元 ,尿素是较强的蛋白质变性剂 .因此 ,研究水溶液中氨基酸与尿素的相互作用对于探索蛋白质变性的分子机理、预测蛋白质的变性规律具有重要的意义 .在前期工作中 ,我们研究了 α-氨基酸在尿素 [1] 和乙酸钠[2 ] 水溶液中的体积性质 .作为水溶液中氨基酸与蛋白质变性剂相互作用系列研究的一部分 ,本文报道不同温度下 ( 2 78.1 5,2 88.1 5,2 98.1 5和 30 8.1 5K) ,甘氨基、DL-α-丙基酸、DL- α-氨基正丁酸、DL-缬氨酸、DL-亮氨酸、L-丝氨酸以及氨基酸分子的荷电端基 ( NH 3 ,COO-)和 CH2 基团在 5molkg-1…     

一种适用于胡杨叶片非变性蛋白质提取的方法

为探索适用于胡杨叶片非变性蛋白质的提取方法,以采自内蒙古额济纳旗天然胡杨林中胡杨成熟叶片为材料,采用咪唑法、Bis-Tris法、Tris-HCl法和新构建的Tris-SSAD法4种非变性蛋白质提取策略,分别用于提取胡杨叶片蛋白质样品;随后进行第一维非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(1~(st)-DE:Native-PAGE)。相比之下,只有Tris-SSAD法获得了清晰、条带数目较多的Native-PAGE图谱,且结合第二维变性凝胶电泳(2~(nd)-DE:SDS-PAGE)可成功分离出较多蛋白质复合体亚基或相互作用蛋白质分子,证明了Tris-SSAD法非变性温和提取特性。研究建立并优化了适用于胡杨叶片的非变性蛋白质提取方法,为后续进一步分析蛋白质与蛋白质相互作用及蛋白质复合体功能提供了实验基础。     

大豆蛋白质在榨油过程中的变性

大豆经过榨油后所剩下来的油饼在工业和农业上有许多用途。特别在作为工业原料方面,主要是取决于油饼中大豆蛋白质的性质,亦就是大豆蛋白质在榨油过程中的变性情况。豆蛋白质在榨油过程中因加热加压而变性,其变性程度因操作之具体条件而不同。结合具榨油厂而检查其油饼中大豆蛋白质的变性情况,将会给某些有关工业生产提供些参考。作大亲自到吉林省几个榨油厂作了调查访问,并对该厂油饼样品中大豆蛋白质的变性问题作了体     

H+对溶菌酶热变性过程的促进机制

利用自发拉曼光谱方法研究了H⁺在溶菌酶热变性过程中对其起始变性温度的影响,分析了H⁺在溶菌酶变性过程中与其分子上氨基酸残基相互作用的动力学过程.在变性过程中同步记录并分析了所有的拉曼谱带.研究表明,H⁺加速了溶菌酶的热变性过程,在此过程中,H⁺削弱了溶菌酶分子残基间形成的氢键,该氢键是维持蛋白质稳定三级结构的次级键的组成部分之一.此外,在此过程中,溶菌酶更靠近分子内部的氨基酸残基的起始变性温度表现出低于外层氨基酸残基的变化.这直接揭示了溶菌酶热变性过程在H⁺的作用下遵从由内到外的变性机制.本研究不仅揭示了H⁺在溶菌酶热变性过程中的促进机制,还说明了同步拉曼分析是研究离子对促进蛋白质变性机理的有力方法.     

液态簧振动力学谱在蛋白质水凝胶-脂肪溶胶复合体系脱水变性的应用研究

本课题组首次用液态簧振动力学谱(RMS-L)方法对天然蛋白质水凝胶鸡蛋清的脱水过程进行了测量与分析,初步表明该方法对蛋白质变性检测是可行、有效的.进一步用RMS-L对天然蛋白质水凝胶(protein hydrogel)-脂肪溶胶(fat sol)复合体系(这里简称为PH-FS)鸡蛋黄的脱水变性过程进行了测量与分析.结果表明,随含水量的降低,PH-FS至少存在4个力学谱的显著变化过程.基于此结果并结合相关分析,推测随含水量的降低,PH-FS至少依次存在下述4个状态:(1)Ⅰ-状态,类体水的PH-FS态;(2) Ⅱ-状态,键合水的PH-FS态;(3)Ⅲ-状态,键合水和键合蛋白质以及脂肪颗粒的混合态;(4)ⅣV-状态,键合蛋白质-脂肪颗粒凝聚态.蛋白质的空间构型(spatial configuration)转变即变性,主要发生在拥有键合永的蛋白质通过失水向键合蛋白质转变的混合态.这表明RMS-L对鸡蛋黄脱水变性过程的检测是有效的,即进一步验证了RMS-L对蛋白质脱水变性过程检测的有效性.     

食品蛋白质的热变性——食品蛋白质的热变化(之一)

食品蛋白质在加工、贮藏中必不可免地要遭受热的影响。在受热时,食品蛋白质会发生怎样的变化?它们对食品的营养有什么影响,对食品的色、香、味、质构又会有什么影响,对实践的总结和理论上的探讨,将有助于工艺的开发,有助于新型食品、新食品资源的开发。本文仅讨论热变化之一———热变性。文中讨论了食品蛋白质热变性对食品营养方面的影响,对加工工艺的影响,对食品机能特性的影响。对变化的机理也进行了一些探讨。还简要讨论了肉、乳、蛋、小麦、大豆等蛋白质的热变性。     

中国对虾肌动球蛋白变性后ATPase活性的研究

在中国对虾肌动球蛋白经冷冻变性和热变性后，对Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ、Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性及蛋白质溶解度进行了研究。冷冻变性之后，肌动球蛋白Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性呈逐渐下降趋势，一般贮藏温度越低，活性降低超快。     

花生蛋白质变性规律初探

通过测定不同条件下花生蛋白质的水溶性氮指数,揭示了花生蛋白质的变性规律。     

料坯蒸炒的作用及其对制油工艺的意义

介绍了料坯蒸炒的概念及方法;描述了油脂、磷脂、棉酚等物质在油料细胞中的存在状态,探讨了蒸炒过程中油料细胞破坏、蛋白质变性、磷脂吸水膨胀和棉酚与蛋白质结合的机理,阐明了细胞破坏、蛋白质变性、磷脂吸水膨胀、棉酚与蛋白质结合等对制油工艺的意义,指出了蒸炒过程中湿润、蒸坯、炒坯环节应注意的几个问题。     

尿素、盐酸胍在溶菌酶分子上结合数的平衡渗析研究

蛋白质的活性及生物功能与其二级、三级和四级结构有重要联系,而这些结构主要是以氢键、疏水键等弱相互作用所维系.由于这些弱相互作用易受外界因素的影响,使蛋白质分子发生构象变化,从原来的折叠态变为去折叠态.这一变化使得蛋白质分子失去生物功能,称为蛋白质的变性.能够使蛋白质变性的化学物质被称为变性剂,尿素和盐酸胍是常见的蛋白质变性剂.     

Kiel骨理化性能的实验分析

对牛密质Kiel骨的理化性能进行了研究,分析了Kiel骨的理化性能和其临床应用之间的关系,以便对Kiel骨的性能进行改进并寻找异种骨材料加工的新方法.采用牛腿骨骨干根据Salama报道的方法制备了Kiel骨,并对材料进行红外光谱(FTIR)、X射线衍射光谱(XRD)、差热扫描分析(DSC)、单轴拉伸力学性能测试.结果表明经过一系列处理后,Kiel骨的无机成分主要是与人骨天然成分相同的羟基磷灰石,同时这种加工方法对有机成分的脱除并不彻底,经H2O2处理后,胶原蛋白只发生变性而并没有被脱除,这种结构变化使Kiel骨的力学性能下降.Kiel骨由于脱除了主要的免疫原性物质,其它的弱抗原物质发生蛋白质变性,其免疫原性较弱,但由于蛋白质变性降低了它的力学强度,同时也影响了胶原蛋白的生理功能,使植入材料的成骨性能较差,影响了其在临床上的广泛应用,采用温和的脱蛋白剂替代强氧化剂能够改善Kiel骨的理化性能.     

α－淀粉酶在脲变性过程中构象与活性的变化

本文利用蛋白质内源荧光和紫外吸收变化，研究了细菌α－淀粉酶在脲变性过程中的构象变化，并且与失活过程进行了比较．α－淀粉酶脲变性与失活的动力学数据表明，变性是单相过程过程，而失活是一个双相过程，快相失活的速度常数比变性速度常数至少大一个数量级．     

关于定点突变型蛋白质K49E HPr结构稳定性的研究

利用吸附反应动力学方法，对K49E HPr和wtHPr两种蛋白质变性过程进行了系统分析。结合K49EHPr蛋白质和wtHPr蛋白质所具有的空间结构特性，对K49E HPr蛋白质具有较强稳定性的原因做了进一步的讨论和解释。     

盐酸胍诱导的蛋白质变性现象研究

考虑常用变性剂盐酸胍（GuHCl)分子与蛋白质主链上的相邻二肽形成双氢键，利用吸附反应动力学方法，得到了描述蛋白质变性物理参量与盐酸胍浓度之间关系的式。结果表明计算得到的理论值与实验值符合良好，说明所给出的蛋白质分子与盐酸分子相互作用模型，能够较好地描述盐酸胍诱导的蛋白质变性现象。     

南充产半夏的蛋白质提取与鉴定研究

该文以南充产半夏的干燥块茎为研究对象,采用植物活性蛋白质提取试剂盒提取其总蛋白,通过用考马斯亮蓝快速染色法测定蛋白质浓度,然后用12%的SDS-PAGE变性胶分析南充产半夏的蛋白质组分,再用蛋白质质谱仪测定半夏蛋白质的类型和分子量,结果得到南充产半夏特有的两种约22kD和15kD的含量较高的蛋白质组分,且发现暂未被相应数据库收录。这为南充产半夏组分的类型与功效的进一步研究奠定了基础。     

四种淡水鱼在冻藏过程中蛋白质变性的测定

本文阐述了四种淡水鱼在- 5℃、-12℃及-18℃下冻藏近二个月,测定其冻藏期间鱼肌肉蛋白质变性程度。结果表明,四种鱼蛋白质变性大小顺序为:鳙鱼>鲢鱼>草鱼>鲤鱼。