胃癌细胞活性与细胞周期相关蛋白表达相关性分析

目的 探讨胃癌细胞活性与细胞周期相关蛋白(CAPRIN1)表达的关系.方法 通过pEGFP-5X-3质粒转染人胃癌细胞SGC-7901,将上调CAPRIN1的表达设为研究组(转染pGEX-5X-3-CAPRIN1质粒),同时设置阴性对照组(转染pEGFP-5X-3空载体质粒)、空白对照组(常规培养).CCK-8法、Tr...     

半边莲生物碱的提取及其对胃癌细胞的抑制作用

以半边莲为材料,对全草中的生物碱进行了粗提,并对胃癌细胞BG-38生长抑制作用进行了测定.结果表明半边莲生物碱对胃癌细胞BG-38有一定的抑制作用,随着生物碱浓度的升高,抑制作用加强;当药液浓度为300mg.L-1时,对胃癌细胞的抑制率最高,达85.6%.随着作用时间的延长,总体趋势是抑制作用也加强,当作用时间达16h时,达到最大值(90.3%),但时问再延长抑制率反而略有下降.     

α2及5-HT2受体与甘氨酸受体之间的对话

在新鲜分离的神经细胞模型上,运用制霉菌素(nystatin)穿孔膜片钳方法研究α2及5-HT2与甘氨酸受体之间对话的分子机理.发现:刺激α2受体,抑制腺苷酸环化酶,减少cAMP的生成,使PKA活性降低,从而增强甘氨酸受体的功能;刺激5-HT2受体,激活磷脂酶C(PLC),增加甘油二酯(DAG)的生成.DAG增强不依赖Ca2+的新型PKC(nPKC)的活性,从而增强甘氨酸受体的功能,α2及5-HT2受体与甘氨酸受体之间的对话具有重要的生理意义.     

视黄酸对胃癌细胞NM—IF系统变化的影响

选择性抽提整装扫描与透射电镜观察显示,人胃腺癌ＭＧｃ８０－３细胞核骨架纤维和中间纤维数量较少、分布不均匀,核纤层为厚薄不一结构,与两类纤维联系不密切．经１０－６ｍｏｌ／ＬＲＡ处理后,细胞核骨架纤维和中间纤维数量增多、结构层次丰富,分布均匀并相互交织成规则网络,两类纤维通过薄层均一的核纤层发生密切联系,形成贯穿整个细胞核质区域的完整体系．表明经ＲＡ诱导处理后ＭＧｃ８０－３细胞的核骨架－中间纤维系统产生了与正常细胞相似的恢复性改变．这种变化是癌细胞恶性表型逆转的重要形态特征和功能表现．     

胰高血糖素样肽1受体N端片段与exendin-4的亲和位点分析

通过易错PCR(epPCR)方法建立了一个鼠肺的胰高血糖素样肽1受体(GLP-1R)N端片段的噬菌体随机突变展示肽库.根据筛选出的突变体来分析突变后胰高血糖素样肽1受体N端片段(nGLP-1R)与exendin-4结合活性.实验结果显示:保守的半胱氨酸C26发生突变后并未引起nGLP-1R与其配体exendin-4结合能力的改变,第101位和108位氨基酸是nGLP-1R与exendin-4结合的潜在位点.     

肝癌患者血清可溶性白介素2受体检测及其临床意义

应用夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测了45例肝癌(HCC)患者及42例健康成人的血清可溶性白介素2受体(sTL-2R)水平,结果显示HCC患者sTL-2R水平较健康成人明显增高(p＜0．01),其升高幅度与肿瘤体积大小有关(p＜0．05),而与AFP及HBsAg阳性与否无关(P＞0．05),故HCC者测定血清sTL-2R不仅能了解肿瘤患者的机体免疫功能状态,且在一定程度上能对疾病的严重程度,疗效及判断预后作出评估。     

溴代香豆素对胃癌细胞的细胞毒活性与致死机制研究

为探究合成化合物溴代香豆素的生物活性,将该化合物作用于胃癌细胞进行了体外研究.本研究分别采用磺酰罗丹明染色法和生长曲线法研究了药物的细胞毒活性和癌细胞的致死过程.以彗星电泳技术和瑞士—吉姆萨染色法观察了化合物对细胞核形态变化和核酸损伤效应,最后以琼脂糖凝胶电泳法检测了药物对细胞总DNA的影响.结果显示,溴代香豆素对胃癌细胞具有显著的细胞毒活性,其IC50为21.56μg/m L.药物对细胞的增殖抑制效应和致死效应都具有显著的时间—剂量依赖性.药物作用癌细胞后可引起细胞核形态变化和染色质凝集断裂,并损伤细胞DNA,在电泳中呈梯度降解状态.结果表明,溴代香豆素对胃癌细胞的生长与增殖具有显著的细胞毒活性,并能诱导胃癌细胞发生凋亡.     

多巴胺D2受体PET成像在制备帕金森病大鼠模型中的作用

将23只帕金森病(PD)成功模型大鼠分别进行11C-Raclopride PET显像,ROI方法测量模型大鼠两侧纹状体/小脑比值并进行统计分析,比较两侧有无显著性差异。正常与模型大鼠分别进行TH免疫组化染色。结果表明,模型大鼠毁损侧纹状体放射性明显上升,两侧纹状体/小脑比值统计比较,p值为0.000,具有显著性差异;同时,模型大鼠TH染色黑质处阳性神经元数量减少。通过PET多巴胺D2受体成像在体显示PD模型大鼠毁损侧纹状体D2受体状态,再结合行为学观察可作为证实模型成功的标准之一,为基础研究和临床诊断PD提供了一种分子成像工具。     

前列腺素E_2受体EP_3及其调节剂的研究进展

前列腺素受体类型繁多,可以偶联G蛋白介导多种生理病理过程.其中前列腺素E2受体有4种亚型:EP1、EP2、EP3和EP4.EP3受体由于其亚型多样性及偶联G蛋白的复杂性使其成为众多前列腺素E2受体中较特殊的"成员".EP3的抗凝血功能研究及新型调节剂的研发是目前该领域研究的热点.本文主要阐述EP3的分布、主要功能及其调节剂的研究进展.     

整合素α2β1对肝癌细胞粘附与趋化行为的影响

采用微吸管技术,研究整合素α2β1对肝细胞癌（HCC）细胞SMMC-7721与Ⅳ型胶原衬表面粘附力特性和该细胞对Ⅳ型胶原趋化行为的影响．观察Anti-α2、Anti-β1对SMMC-7721细胞与Ⅳ型胶原裱衬表面的粘附力的影响;采用双微吸管实验法,观察SMMC-7721细胞伪足形成过程以及Anti-α2、Anti-β1对SMMC-7721细胞伪足形成的影响．利用流式细胞仪对SMMC-7721细胞表面整合素α2、β1亚单位的表达进行分析．结果表明,SMMC-7721细胞与5μg／mL Ⅳ型胶原裱衬表面之间的粘附力为952±134（×10^-10 N,n=60）,加入5μg／mL Anti-α2粘附力减小到605±128（×10^-10 N,n=60）;加入10μg／mL Anti-α2时粘附力减小到579±57（×10^-10 N,n=50）．加入5μg／mL Anti-β1粘附力减小到449±119（×10^-10 N,n=60）;加入10μg／mL Anti-β1时粘附力减小到220±78（×10^-10 N,n=55）．双微吸管趋化实验表明：两侧微吸管加入相同浓度Ⅳ型胶原,细胞向两侧微吸管均有伪足形成;在此基础上,微吸管分别加入Anti-α2、Anti-β1的一侧,SMMC-7721细胞伪足生长曲线呈现明显的抑制,而未加入抗体的微吸管一侧与加入的对侧相比,该侧细胞的伪足明显增加．流式细胞仪分析表明,所研究细胞整合素α2、β1亚单位表达率达分别为23．17％和95．78％．上述结果表明,整合素α2β1是联系SMMC-7721肝癌细胞与Ⅳ型胶原裱衬表面粘附以及SMMC-7721细胞对Ⅳ型胶原趋化性伪足形成的重要受体基础．     

X线激发纳米TiO2对胃癌细胞SGC-7901的杀伤作用

观察X线激发纳米二氧化钛(TiO2)后对体外培养的胃癌细胞SGC—7901在不同TiO2浓度下对细胞增殖的影响。探讨其可能的抑瘤机制。首先通过MTT法测定不同浓度TiO2对细胞增殖的影响。然后通过Western blot检测凋亡相关蛋白的表达变化。MTT结果显示,通过X线激发纳米TiO2后可对胃癌SGC—7901细胞的增殖产生明显的抑制作用,呈浓度相关性,当纳米TiO2浓度为0.25 mg/mL时抑制效果最明显(抑制率)。Western结果显示实验组与对照组相比凋亡相关蛋白Bax的表达显著上调。说明X线激发的纳米TiO2可抑制胃癌SGC—7901细胞的增殖,促进凋亡发生。     

龙葵碱对HepG2细胞NAT1酶活性的影响

探讨龙葵碱对HepG2人肝癌细胞的N-乙酰基转移酶1(NAT1)酶活性的影响.采用高效液相色谱法(HPLC),以对氨基苯甲酸(PABA)为底物,以PABA被NAT1乙酰化为乙酰对氨基苯甲酸(Ac-PABA)的量反应NAT1酶的活性.观察不同质量浓度、不同时间龙葵碱对完整HepG2细胞NAT1酶活性的影响;龙葵碱对HepG2细胞细胞质中NAT1酶活性的影响.结果表明,在NAT1酶活性测定中,龙葵碱能显著降低HepG2完整细胞NAT1的活性;龙葵碱能够降低HepG2细胞质内NAT1的活性,且作用具有剂量依赖性;随着时间的增加NAT1转化产物的量逐渐增加,但龙葵碱能显著降低同一时段NAT1的活性.提示龙葵碱通过抑制HepG2细胞中NAT1的活性是龙葵碱抑制人肝癌细胞HepG2增殖的作用机制之一.     

ANXA2对肝癌细胞F-actin表达及细胞微结构的调节

为了研究ANXA2对人肝癌细胞F-actin表达的调节,通过siRNA技术抑制肝癌细胞SMMC-7721的ANXA2表达,以免疫荧光法观察了F-actin表达及细胞微结构的变化.结果显示:抑制ANXA2基因表达后,细胞聚合成束的F-actin明显减弱,并由聚集分布变成弥散分布,且细胞的伪足、微绒毛等微结构生长受到抑制.结果提示,ANXA2表达水平的变化可能改变了SMMC-7721细胞F-actin的表达、聚合、重排与分布,从而导致细胞的细胞骨架重建,进而引起细胞的运动力与形态发生一系列变化.上述结果对进一步阐明ANXA2如何影响F-actin的动态组装以及ANXA2在细胞骨架系统重塑过程中的作用机制等提供了证据.     

转录因子E2F—1的DNA结合结构域与GST的融合表达和纯化

通过聚合酶链式反应方法扩增转录因子Ｅ２Ｆ－１中ＤＮＡ结合结构域的基因片段,并将其克隆到ｐＧＥＸ－２Ｔ表达载体中,转化ＢＬ２１菌株．经ＩＰＴＧ诱导,目的蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,其表达量达１５％．经ＧＳＴ－Ａｇａｒｏｓｅ亲合层析,目的蛋白得到了高度纯化．经胶迁移率改变实验（ｇｅｌｓｈｉｆｔｍｏｂｉｌｉｔｙａｓａｙ）证明目的蛋白具有与腺病毒Ｅ２启动子ＤＮＡ片段结合的能力．     

立体效应对烷氧基异恶唑类sigma-1受体抑制剂与sigma-1受体相互作用的影响

Sigma-1受体(Sigma-1 receptor,σ1R)主要参与调节细胞应激反应和细胞稳态,并与许多神经退行性疾病及肿瘤的发生发展密切相关。烷氧基异恶唑类化合物是一种新型的σ1R受体抑制剂,对σ1R具有较好的抑制活性,最优化合物与σ1R之间的结合常数小于1 nm。为了探究立体效应对这一类抑制剂与σ1R相互作用的影响,应用分子对接、分子动力学模拟和结合自由能计算;对比研究了3个σ1R抑制剂(20、37和54)与σ1R之间的相互作用方式和结合强度。研究表明,具有较大头端疏水区和质子供体N原子区的化合物54与σ1R之间的结合强度最大,这与实验测得的结合常数一致。此外,还计算了σ1R抑制剂与σ1R之间相互作用的能量分项。结果表明,范德华相互作用对该类抑制剂与σ1R之间的相互作用起主导作用;而静电相互作用的影响较小。基于氨基酸残基的结合自由能分解及对抑制剂与σ1R结合构象的分析表明,提高头端疏水区和质子供体N原子区的立体体积,有利于提高该类抑制剂与σ1R之间的结合活性。     

癫痫患者血清可溶性白细胞介素2受体水平改变的初步观察

应用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法测定了７０例癫痫（ＥＰ）患者的血清可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）水平，与正常对照组比较，发现ＥＰ患者ｓＩＬ－２Ｒ水平显著增高（Ｐ＜０．０１），揭示ＥＰ患者免疫功能处于抑制状态，不同发作类型，病史长短以及服用抗ＥＰ药物与否均没有显著差异（Ｐ＞０．０５）。提示ＥＰ患者免疫功能的低下可能存在某些内在因素，而不是受临床表现和抗ＥＰ药物的影响。     

亚硒酸钠对人胃腺癌细胞中c—Ha—ras和c—erbB2癌基因及其蛋 …

应用细胞原位杂交和免疫胶体金技术，观察亚硒酸钠处理人胃腺癌细胞前后，ｃ－Ｈａ－ｒａｓ和ｃ－ｅｒｂＢ２癌基因转录水平及其产物Ｐ２１和Ｐ１８５癌蛋白表达的变化。结果表明，两种癌基因在ＭＧｃ８０－３细胞中活跃表达，亚硒酸钠能抑制ｃ－Ｈａ－ｒａｓ和ｃ－ｅｒｂＢ２癌基因的转录水平及Ｐ２１和Ｐ１８５癌蛋白的表达，这对于诱导胃癌细胞向下沉细胞方向逆具有重要意义。     

亚硒酸钠对人胃腺癌细胞中c-Ha-ras和-cerbB2癌基因及其蛋白的影响

应用细胞原位杂交和免疫胶体金技术，观察亚硒酸钠处理人胃腺癌细胞前后，ｃ－Ｈａ－ｒａｓ和－ｃｅｒｂＢ２癌基因转录水平及其产物Ｐ２１和Ｐ１８５癌蛋白表达的变化，结果表明，两种癌基因在ＭＧｃｘ８０－３细胞中活跃表达，亚硒酸钠能抑制ｃ－Ｈａ－ｒａｓ和－ｃｅｒｂＢ２癌基因的转录水平及Ｐ２１和Ｐ１８５癌蛋白的表达，这对于诱导胃癌细胞向正常细胞方向逆转具有重要意义。