撰著提要

一、文学哲学史地类 五代时之文化——梁,唐,晋,汉,周,为五代,共五三年(九O七——九五九),凡八姓一三主,皆都汴。其中唐,周二代,攀附前朝;石敬塘父礼契丹,郭威袭夺汉祚,犹惺惺作态。将帅割地,各为强藩;兵士骄纵,不可究诘.贿赂公行,以致朝廷为人,率多滥进,后史在德倡文武官吏考试制,反为人阻梗。唐末以后,黄巢,秦宗权,相继作乱,中原涂炭,满目荒凉,数千里殆绝人烟。天灾人祸,交乘而来,人民困苦,不可言状。民男皆须从军;企盼黎军,时复屠杀无辜陬行所止,动家富户,以助用计。又胁时定差之下,契丹充斥,都人士献,若在涂炭。盗站一获,即籍没其财产,…     

解放思想 高移目标 推动学校事业科学发展

在学校事业发展的新阶段,必须解放思想,高移目标,不断提升人才培养工作水平,不断提升富民强校水平,努力实现办学层次的新提升和办学空间的新拓展。要以科学发展观为指导,坚持稳中求进,坚持好字优先,坚持改革创新,坚持以人为本,夯实基础,彰显特色,增创新的发展优势。要上下团结一心,协调一致,形成合力,共同担负起促进学校事业又好又快发展的重任。     

中国人物

一般来说,知道他,主要是通过两个故事以及这么一个成语——运筹帷幄之中,决胜千里之外。至于他是如何运筹又是如何决胜的,一般人就不会问了,无非权谋计算而已。他的第一个故事是,作为韩国的贵公子,为了替他的韩国报仇,他悉以家财,求得力士,制一百多斤的铁锥,埋伏在那博浪沙,冒险刺杀秦始皇,可惜那     

学会隐藏锋芒

<正>春秋时期,齐国生长着一棵千年栎树,树冠遮天蔽日,能容上千人乘凉,树干壮若一座小山,足有十多丈粗,树梢高顶尽斜阳,一眼望不到头。每天前来膜拜烧香的人络绎不绝,人们都把这棵树当做神一般敬仰。一天,有师徒两人路过这里,徒弟忍不住驻足停步,好奇地观赏这棵栎树,心想,这么大一棵树,要是砍下来,不知可以造多少艘大船,多少间房子,多少套家具……然而,面对这棵巨大的栎树,师傅只是随意地瞥了一眼,便匆匆地走开了。     

补陈书艺文志序

四史中志箸作者、六家(注一)而已。后贤补苴,渐臻究备,自级大昭补后汉,至金门诏志三史,其间作者无虑十数家,虽详略不同,瑕互见,亦足以砚一代学术之渊源,风气之变迁,人才之消长矣。惟梁陈二书,虽有补作(注二)、未见传本,夫有陈建国二十二载,版图弥蹙,斯文未遀:着文帝之崇尚儒术,说意典籍,复深     

江天一览

众所周知,乾隆皇帝多次南巡,途中喜欢舞文弄墨,题碑题匾,留下了不少趣闻轶事。有一天,秋高气爽,风和日丽。乾隆皇帝在金山寺遥望长江,见江水滔滔,白鸥点点,忍不住要给该寺题一匾额。于是,他吩咐左右备好纸、墨、笔。可当人们给他铺好纸,研好墨,他也提起笔之时,却举笔不定,犹豫不决。他环顾左右,只见随从大臣一个个眼睛直勾勾地望着他。乾隆皇帝心想,尽管自己的字写得相当不错,可     

爷爷的菜园

正爷爷的菜园不大,种的蔬菜可不少。有穿着紫袍的茄子,它们戴着绿帽子,像是参加晚会的贵妇人一样。玉米的长势最好,一株株像小士兵一样,昂首挺胸地站在田边,神气十足。要是有不认识的人靠近它,它会举起红缨枪,瞄准入侵者。西红柿挂满枝头,像一盏盏红灯笼,照亮了整个菜园。豇豆最文静,像亭亭玉立的少女,一阵风吹来,摆动纤细的身体,翩翩起舞,很是好看。辣椒最威风,它们有的穿着碧绿的外套,有的穿着大红袍,很是耀眼,生怕别人看不到它们美丽的衣裳。朝天椒虽然不太显眼,但可爱炫耀自己了,像骄傲的公主。     

草根的优雅——写在三月,写给这些年的成长

你路过了你的风景,也行使了你应该行使的里程,不要心有不甘,不要挂档倒退,把该记住的记住,该剔除的剔除。三月,注定是属于女人的,草长莺飞,季节变迁,城市里弥漫着对女人的关注和赞美。2010年1月,我获得了成都市2009年度第三届职业丽人提名奖,3月,又获得了2010年十大魅力女川商。同时,又因为工作的原因,获得了总公司记大功的奖励。     

玉树的民风

玉澍偶地名,使人发生一样美感,为什么呢?我国的文人描写女人的漂亮,多喜欢用个玉字,所谓「亭亭玉立,所谓「燕度佳人,美者颜如玉」,都说不了「玉字,所以玉树纵里面的一个玉字,已很容易使人以为它是一个风景美丽的地方,虽不敢奢望如杭州的西湖,至少也如山东的青岛吧,其实单一个玉字,不能尽其妙处,它是玉树呀,玉的树是多么实真的东西呵,所以玉树二字不特     

发刊词

西北大学,为西北最高学府,过去数年,整理行政,对于学术,颇少贡献,今者学校局,痛或文化使命之重,椎轮大路。先瓶本现,将以发扬我民族之精神,融合现世界之思想且特别研究民族发祥地之西北数省,以冀对西北建设有所赞益,其意义至深且大也,同人不敏,肩此艰巨,谨于本刊出生之日,略陈数。     

苏云金芽孢杆菌aiiA基因在毕赤酵母中的分泌表达

根据GenBank中aiiA基因设计引物,以苏云金芽孢杆菌基因组为模板扩增出aiiA基因后构建出pPIC9K-aiiA重组表达载体,线性化后转化毕赤酵母GS115,获得重组工程菌GS115/pPIC9K-aiiA,以体积分数为1%的甲醇进行诱导表达.表达产物经SDS-PAGE及Western blotting分析显示表达的蛋白具有较好的免疫特异性.抗病性实验显示表达的目的蛋白具有生物学活性和良好的抗病能力.     

β葡聚糖酶杂合基因bglHAM的克隆及在P.pastoris中的表达

采用PCR的方法,以Bacillus macerans总DNA为模板,构建出β-1,3-1,4葡聚糖酶杂合基因bglHAM,与巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9K重组,得到重组质粒pPIC9K-HAM,电脉冲转化法转化酵母菌GS115,KM71,在MM,MD平板上筛选表型,YPD-G418平板上筛选多拷贝重组子,重组菌株经甲醇诱导后,刚果红平板染色法检测到β-葡聚糖酶活性,SDS-PAGE证明表达产物的分子量约为24kD,摇瓶诱导培养筛选到的重组菌株,胞外每mL发酵液最高酶活达240U。     

链霉菌H197 mtg基因毕赤酵母表达载体的构建与鉴定

将酵母胞内表达质粒pPIC3.5k重组成带有谷氨酰胺转胺酶的新型表达载体pPIC3.5k/MTG,为谷氨酰胺转胺酶（MTG）在毕赤酵母中的表达研究提供了实验基础.利用PCR的方法扩增出MTG基因片段,将目的片段和质粒pPIC3.5k进行双酶切后进行连接,构成重组质粒,然后转化至E.coli DH5α感受态细胞中,筛选阳性克隆,经测序证明为目的基因片段.结果表明：经过PCR和酶切均证明已经将目的片段转到酵母表达载体pPIC3.5k内.     

解淀粉芽孢杆菌中性植酸酶基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达

采用PCR法从解淀粉芽孢杆菌BA11中克隆到一个中性植酸酶phyc基因,将该基因克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K上并电转化至宿主细胞GS115后进行诱导表达。SDS-PAGE试验表明:该重组中性植酸酶在毕赤酵母宿主细胞中实现了高效分泌性表达。植酸酶活性测定结果显示阳性克隆子在诱导72h酶活性达到最高值,活性为2330U/L。     

白藜芦醇合酶基因的克隆及对毕赤酵母的转化

目的建立白藜芦醇合酶基因的毕赤酵母表达系统。方法通过PCR、限制性内切酶消化、连接、电激等方法,构建表达载体,转化毕赤酵母GS115。结果从葡萄基因组DNA中扩增得到了 1 200 bp目的基因,并克隆至pBS-T栽体;成功构建了表达载体pPIC3．5K／RS;目的基因成功整合进毕赤酵母GS115基因组中。测序及PCR鉴定证明,白藜芦醇合酶基因的毕赤酵母表达系统建立成功。结论所得方法无需高质量的RNA,从而降低了试验条件,达到了快速简便的目的。     

人胰激肽原酶在毕赤酵母中的分泌表达

人胰激肽原酶(hPK)编码基因由本实验室设计、合成,并重组构建成表达质粒pPIC9k-hPK。经电穿孔将该质粒转化毕赤酵母GS115 (His^-Mut⁺) ,筛选His⁺Mut^s 型高拷贝菌株,摇瓶诱导表达重组hPK。经SDS-PAGE凝胶电泳分析确定表达重组蛋白相对分子质量为37500,产量达40mg/L,质量分数占总蛋白的30%以上。初步浓缩的重组hPK经测定具有酶活性,表明其在毕赤酵母中得到了正确的表达,每mL酶活达0.717nmol/s。     

大鼠组织型金属蛋白酶抑制剂-1在毕赤酵母中的重组表达

提取SD大鼠肝组织总RNA,通过RT-PCR扩增TIMP-1 cDNA片段.将扩增产物克隆至pUCm-T载体上,PCR、限制性酶切及测序证实后,EcoRI和NotI双酶切pUCm-T-TIMP-1重组体,回收TIMP-1,再将其亚克隆到酵母表达载体pPIC9K中,并将阳性克隆进行PCR、酶切和测序分析,构建pPIC9K-TIMP-1表达载体,电击转化到毕赤酵母,通过表型筛选和诱导表达得到蛋白表达工程菌,为进一步研究TIMP-1功能和作用机理等的研究创造了条件.     

表达人胰岛素前体的毕赤酵母菌株的构建

将人胰岛素前体 (HIP)基因插入到毕赤酵母Pichiapastoris的分泌表达质粒pPIC9K中,得到分泌表达质粒pPIC9K/HIP并用电转化法转化P.pastorisGS115。筛选出整合型His⁺Mut^s 菌株,进一步用G418筛选获得高拷贝转化子。经诱导培养后,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)证明HIP在毕赤酵母中能有效分泌表达。对毕赤酵母中外源基因的稳定性进行了研究,结果表明外源基因在毕赤酵母中很稳定.     

利用毕赤酵母表达植物甜蛋白（brazzein）的初步研究

实验将含有Brazzein基因的pPIC9K穿梭质粒通过电导入巴斯德比赤酵母（Pichia pastori）GS115中，并从22个阳性克隆中筛选出His^＋Mut^s高拷贝转化子2个，经诱导表达，产物进行Tricine-SDS-PAGE电泳鉴定，目标蛋白的相对分子量与理论值一致，又经小试（5～10L罐）蛋白产量可达385mg/L。利用大孔树脂D152初步分离，得到有微甜味的产物。进一步纯化后获得了¹D-NMR图谱。     

南极假丝酵母脂肪酶B在毕赤酵母的表达及酶学性质研究

为提高南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarcticalipase B,CALB)的表达量,根据毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子偏好性设计合成CALB基因,插入表达载体pPIC9K构建重组质粒pPIC9K-CALB.重组质粒转化毕赤酵母GS115,经过G418抗性筛选得到多拷贝转化子.摇瓶发酵120 h后上清液酶活力达到46 U/mL,通过金属螯合层析纯化发酵液将CALB纯化了5.23倍,比活力达到856.7 U/mg,去糖基化实验显示重组CALB比野生型CALB大5 ku.实验考察了不同反应温度、pH值和金属离子对重组CALB活性和稳定性的影响,发现重组CALB最适反应温度和pH分别为30℃和6.5,在pH 5.0~8.0之间以及40℃以下有较好稳定性,金属离子(10 mmol/L)Ca2+,Zn2+,Mn2+有助于CALB酶活力的提高,而Cu2+,Ag+,Fe3+强烈抑制酶催化反应.