饭豆铜锌超氧物歧化酶的纯化及性质

饭豆种子粗提液中有６条Ｃｕ·Ｚｎ—ＳＯＤ活性谱带，经氯仿－乙醇混合液处理，硫酸铵盐析，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶过滤和ＤＥＡＥ－纤维素柱层析被分离，获得了两组ＳＯＤ同工酶组分（ＳＯＤ—１，ＳＯＤ—２）．它们在酶分子结构上可能存在一定差异．ＳＯＤ－１含与粗提液相对的、电泳迁移率较小的活性谱带，它在聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）图谱上的活性染色带和蛋白染色带相互对在；在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦电泳图谱上均呈现单一区带，说明该酶已纯化到均一程度．该酶分子量为３１３００，亚基分子量为１６５００，等电点为４．２，在紫外区的吸收值为２６４．０ｎｍ．该必在０—７５℃范围内稳定．纯化的ＳＯＤ—１比活性为１７８９Ｕ／ｍｇ，ＳＯＤ—２比活性为２８４Ｕ／ｍｇ，ＳＯＤ活力回收率为３２％．     

微分脉冲极谱法测定EMD中,电解液MnSO4—H2SOR中微量Pb及Pb—A…

在ＥＭＤ中及电解液ＭｎＳＯ４－Ｈ２ＳＯ４中的微量Ｐｂ已用微分脉冲极谱法测定，此微量Ｐｂ来源于在制备ＥＭＤ过程中，新型Ｐｂ－Ａｇ－Ｃａ合金阳极的极微溶解。将ＫＣＬ分别加入用ＫＣＬ溶解ＥＭＤ所得的Ｍｎｌｅ２中及电解液ＭｎＳＯ４－Ｈ２ＳＯ４中，作为底液，分别测定其Ｄ．Ｐ．Ｐ图，峰形良好。     

酵母菌Y—216SOD的提纯及其性质研究

用筛选的高产ＳＯＤ酵母Ｙ－２１６进行发酵培养，分离提纯出ＳＯＤ，并对其性质进行了初步的研究。确定了酵培养后的ＳＯＤ提取过程；甲苯破壁法裂解酵母Ｙ－２１６得ＳＯＤ粗提液，并通过ＤＥＡＥ－纤维素－３２柱层及超滤等方法，得纯化的超氧化物歧化酶，此酶部分等电点为４．５、最大紫外光吸收波长为２６０ｎｍ，耐热性较好，Ｍｎ６２＋可能是其金属辅基。     

东方弧菌SOD的分离纯化和特性研究

从东方弧菌５１８菌株的细胞中提取超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）。先以硫酸铵分级沉淀取得粗酶，再经ＤＥ－５２，ＤＥＡＥ－纤维素柱层析，并以５－５００ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸钾缓冲液作线性梯度洗脱，再次分级沉淀而获纯化的ＳＯＤ，呈棕黄色，其分子量为３８０００道尔顿，为二聚体，亚基分子量为１８５００道尔顿，原子吸收光谱测定其金属辅基为Ｆｅ＾＋＋＋。该酶反应最适温度为２５℃，室温下溶液中很易失活。紫外及可见光吸收光谱测     

氨基偶氮苯磺酸类中间体合成方法研究

合成了４－氨基－３－基偶氮苯－４’－磺酸及４－氨基－３－甲氧基偶氮苯－４’－ＤＡＭＷＳＧＣＴ,ＲＰＹＦＢ ＡＹ ＥＰＶ ＷＤＴ Ｏ ＷＪＭ ＷＧＫ ＸＥＧＷ＃? ＧＮ ＴＧＪ ＲＮＯＯＦＨＬ ＦＪＴＦＴＧＪ ＲＮＯＯＷＪ     

黑曲霉胞外葡萄糖淀粉酶的纯化及特性

黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ７２８）的粗酶液，经硫酸铵沉淀，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５柱凝胶过滤脱盐，ＤＥＡＥ－Ｔｏｙｏｐｅａｒｌ离子交换柱层析和ＳｅｐｈａｃｒｙＳ－１００凝胶层析纯化，经ＰＡＧＥ鉴定为一条带ＳＤＳ凝胶电泳测定分子量为７００００．金属离子Ｆｅ３＋对该酶有一定的抑制作用，该酶的等电点为３．７，最适ｐＨ为４，最适温度为６０℃．Ｅ２８０１％为１５．７２，Ｋｍ值为０．１１２×１０－３ｍ．     

亚砜类萃取剂萃取铀(Ⅵ)的研究

研究了在稀释剂甲苯中石油亚砜（ＰＳＯ）、二正辛基亚砜（ＤＯＳＯ）、二（２－乙基己基）亚砜（ＤＥＨＳＯ）、十二烷基对甲苯基亚砜（ＤＴＳＯ）、２－乙基己基对甲苯基亚砜（ＥＨＴＳＯ）、二苯基亚砜（ＤＰＳＯ）等亚砜类化合物对铀（Ⅵ）的萃取,其萃取能力按ＰＳＯ＞ＤＯＳＯ＞ＤＥＨＳＯ＞ＤＴＳＯ＞ＥＨＴＳＯ＞ＤＰＳＯ的顺序变化．求出了萃取反应的焓变,考察了硝酸浓度、萃取剂浓度、盐析剂浓度、络合阴离子（Ｃ２Ｏ２－４）浓度、温度对萃取平衡的影响．     

鼠脑钠离子通道IS4片段溶液构象的NMR研究

应用２Ｄ ＾１Ｈ ＮＭＲ技术确定了合成多肽ＩＳ４的溶液构象，利用２Ｄ ＤＱＦ－ＣＯＳＹ，ＴＯＣＳＹ和ＮＯＥＳＹ实验，对ＩＳ４的＾１Ｈ谱进行了完全的指认，ＮＯＥＳＹ谱相关峰的积分被应用于结构计算，应用ＭＡＲＤＩＧＲＡＳ程序可以产生比较精确的质子－质子之间的距离约束。在应用距离几何程序ＤＩＡＮＡ计算时利用由ＭＡＲＤＩＧＲＡＳ产生的距离约束，加上二面角的约束，结果得到５个重叠得比较好的结构，最后对这５个     

负载 SO_4~(2-)-M_xO_y 催化剂的制备及性能研究

本文采用固相焙烧法将ＳＯ２－４－ＭｘＯｙ固体超强酸负载于不同载体上，制备出分散负载ＳＯ２－４－ＭｘＯｙ型催化剂。戊烷异构化反应结果表明采用该法制备的催化剂具有强酸位，能在较低反应温度下，催化需要强酸位的反应。ＳＥＭ，ＸＲＤ等测试结果表明经焙烧后的ＳＯ２－４－ＭｘＯｙ在载体表面得到较好的分散，ＺｒＯ２以四方相存在。     

丙烯氨氧化催化剂物化性能研究：Ⅱ.催化剂失活前后的结构表征

采用ＸＲＤ，ＩＲ，Ｍｏｂａｕｅｒ ＥＳＲ，ＸＰＳ，ＳＥＭ和孔结构分析等分析测试手段，对比研究了新鲜，失活和再生三种丙烯氨氧化催化剂的体相结构和表面性质。结果表明，新鲜催化剂中各元素以Ｆｅ２（ＭｏＯ４），α－ＣｏＭｏＯ４，ＮｉＭｏＯ４，γ－Ｂｉ２Ｏ３．ＭｏＯ３，α－Ｂｉ２Ｏ３．３ＭｏＯ３，η－ＭｏＯ３，α－Ｂｉ２Ｏ３和β－Ｂｉ２Ｏ３形式存在２；失活催化剂中，部分Ｆｅ２（ＭｏＯ４）３转变为α－Ｆｅ－Ｍ     

芦荟超氧化物歧化酶的纯化与部分性质

芦荟粗提取液经丙酮沉淀、热处理、DEAE-琼脂糖柱层析和Sephacryl S-200凝胶过滤纯化后得到3种电泳纯的SOD组分,即SOD-Ⅰ、SOD-Ⅱ、SOD-Ⅲ.分子量分别为46000D,35000D,40000D;亚基分子量分别为23000D,17000D,20 000D,说明芦荟SOD三种组分均为二具体,其等电点分别为8.90,7.60,7.35。抑制剂敏感性实验和元素分析结果表明3种芦荟SOD组分均为Fe-SOD.     

蜗牛肝超氧化物歧化酶的纯化及性质研究

实验以新鲜蜗牛肝脏为材料，经匀浆、盐析、氯仿－乙醇处理、透析和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－７５柱层析等步骤、纯化得到超氧化物歧化酶。对其理化性质鉴定表明，用此法纯化的ＳＯＤ纯度均一，比活力为６８００Ｕ／ｍｇ·ｐｒ，分子量为３０．３ＫＤ，紫外最大吸收峰２５９．６ｎｍ，Ｎ－末端分析表明为Ａｌａ。     

牛血超氧化物歧化酶脂质体的稳定性

采用“逆相蒸发法”制备含有牛血细胞超氧化物歧化酶(Cu,2n—SOD)的大单层囊泡脂质体,经过一次Sepharose 4B柱层析得到纯化的SOD—脂质体(SOD—Luv);SOD—Luv可以有效地抵抗6.Omol/L盐酸胍的钝化作用;SOD—Luv可以有效地抵抗胰蛋白酶的消化作用。     

超氧化物歧化酶—邻苯三酚自氧化测活方法的改进

本文对邻苯三酚自氧化测定超氧化物歧化酶活力的方法做了部分改进,使其操作更简便省时,节省试剂;并对该实验条件下反应的动力学做了初步研究,表明该法比较适合经部分纯化的酶活测定,结果比较稳定,认为是柱层析中大批量活性跟踪的首选方法,可作为自动分析的基础。     

钝顶螺旋藻分离纯化SOD的中试生产

以钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)干粉为实验原料,经过超滤、两步盐析、DEAE离子交换色谱柱层析和SuperdexTM200凝胶过滤柱层析,逐步纯化超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD).结果表明,在90 L粗藻液的中试放大体系中,所得酶液的平均比活力为4131 U/mg...     

超氧物岐化酶提纯研究

采用氯仿—乙醇提取液盐析、丙酮沉淀及ＤＥ（３２）纤维素柱层析方法，从牛红细胞中分离得到纯品铜锌超氧物歧化酶（Ｃｕ、Ｚｎ—ＳＯＤ）．纯化的酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳为一条蛋白带，活性染色在蛋白带的位置上呈现表示酶活性的亮斑，比活力为每毫克２４８７３单位，原子吸收测Ｃｕ、Ｚｎ含量及紫外吸收光谱测定结果制备样与标准ＳＯＤ样相同．     

水溶性海星皂苷的分离纯化及其抗真菌活性研究

为了分离纯化出具有强抗真菌活性的水溶性海星皂苷,以罗氏海盘车(Asterias rollestoni)腕为实验材料,利用水抽提方法获得水溶性海星皂苷粗品,依次利用大孔树脂和硅胶柱层析对水溶性海星皂苷进行了纯化,并对其抗真菌活性进行了测定。研究结果发现,在30％、50％、70％、80％、95％乙醇溶液的大孔树脂柱层析洗脱组分中,70％乙醇溶液洗脱组分对白色念珠菌和裂殖酵母菌的抗真菌活性最强。70％乙醇溶液洗脱组分经硅胶柱层析进一步纯化后,得到了SF-1、SF-2、SF-3和SF-4四种纯化样品,其中SF-1纯化样品没有抗真菌活性,SF-2纯化样品具有极弱的抗真菌活性,SF-3和SF-4纯化样品均具有很强的抗真菌活性。SF-3纯化样品在高压液相柱层析(HPLC)图谱中仅显示单一洗脱峰,表明其纯度很高,可应用于高效抗真菌药物的研制。研究结果为利用水溶性海星皂苷研制高效抗真菌药物奠定了基础。     

葡萄糖异构酶的纯化和性质

从国产玫瑰红链霉菌336菌体,经制成丙酮干粉、抽提、DEAE-52纤维索柱层析、硫酸铵分级、DEAE-Sephadex A-50柱层析、Sephadex G-200柱层析后得到电泳纯酶。对纯化酶的分子量、氨基酸组成、热稳定性等性质进行了研究。     

天冬氨酸酶的分离提纯及其变性复性的研究

以E.Coli J-3为原料,经菌体破碎、链霉素处理、热处理、硫铵分级、磷酸钙胶处理、DEAESephadex A-50柱层析、羟基磷灰石柱层析、Ultrogel AcA 34凝胶过滤、HPLC层析九个步骤,得到聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳纯的天冬氨酸酶。并探讨了各种环境因素对变性复性程度的影响。结果表明,不同的变性、复性条件会诱导不同构象的产生。诱导酶的性质与天然酶不同。     

从海带根中提取纯化褐藻硫酸多糖

海带根粉碎后，经过酶解，去除褐藻酸，得到酶解液；通过DE-41、DE-80离子交换柱层析，得到海带硫酸多糖(FGS)F1-F8的8种不同组分；再用Sepharose 2B凝胶柱层析纯化，获得层析纯F1-F8的FGS．我们初步测定了8种FGS的分子量、单糖组分及其摩尔比．FGS为一类含有鼠李糖、岩藻糖、木糖、甘露糖、半乳糖以及硫酸根的杂多糖．