细胞凋亡的相关基因及表达调控研究进展

细胞凋亡是由一系列基因控制的主动的细胞学过程．本文概述了细胞凋亡相关基因及表达调控，如ced基因家族、bcl-2基因家族、P53基因家族、ICE基因家族、Fas／Apo基因以及与凋亡相关的癌基因等，同时简介了一个细胞凋亡基因调控的新模式和该领域的研究新动向．     

人角质细胞生长因子-1在水稻中的表达

人角质细胞生长因子（Keratinocyte growth factor,KGF）在组织的损伤修复中起着重要的作用.植物细胞生物反应器是一种成本低、安全性好的蛋白生产系统.本研究将人KGF-1经农杆菌介导法转入水稻中,共获得38株抗性再生植株.Southern杂交和RT-PCR结果表明KGF-1基因整合入水稻基因组中且部分转化株中KGF-1基因得到转录.Western blotting检测结果显示有两株转化水稻中能够表达KGF-1.     

黄芪甲苷对非小细胞肺癌A549细胞增殖及凋亡相关蛋白表达的影响

观察不同剂量的黄芪甲苷(As-Ⅳ)在体外对非小细胞肺癌(A549)细胞的生长、凋亡等方面的影响,探讨黄芪甲苷抑制A549细胞增殖、促进凋亡的可能分子机制。实验结果表明,As-Ⅳ作用24 h后,肺癌细胞A549的增殖明显受到抑制,具有剂量依赖性。A549细胞中的E-cadherin蛋白表达呈药物浓度依赖性上调,Vimentin蛋白表达下调。经As-Ⅳ作用24 h后的A549细胞,其胞质蛋白Bax/Bcl2表达水平高于对照组,同时As-Ⅳ也促使Caspase-3裂解为cleaved Caspase-3。黄芪甲苷在体外能抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移并诱导其凋亡,其机制可能是通过抑制NEDD4/PTEN通路而激活并促进Bax表达的实现。该发现为临床上治疗非小细胞肺癌提供了有意义的实验依据。     

ING5在食管鳞癌中的表达及意义

为分析ING5的表达与食管鳞状细胞癌的发生之间的联系,在不同分期的食管鳞癌患者的癌组织中,通过RT-PCR的方法对ING5的表达水平进行检测.结果发现,RT-PCR检测到食管鳞癌组织ING5mRNA表达下调,ING5mRNA表达的下调可能与食管鳞癌的发生密切相关.     

Nodal在宫颈组织标本中的表达及临床意义

通过检测Nodal在宫颈临床标本中的表达,探索Nodal与宫颈癌发生、发展进程是否相关。收集正常宫颈(NC)、宫颈上皮内瘤变(CIN)、宫颈浸润癌(ICC)组织标本,利用免疫组织化学检测并统计Nodal在宫颈组织中的表达。结果显示:Nodal在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变、宫颈浸润癌组织中的阳性表达率分别为46.81%(22/47)、50%(2/4)和79.41%(54/68),经χ~2检验,Nodal表达在正常宫颈和宫颈浸润癌之间有明显差异,具有统计学意义(P0.001);免疫反应评分(IRS)分析也发现,Nodal的IRS评分呈现逐渐上升趋势,NC(3.574±0.520)、CIN(4.250±2.72)和ICC(6.912±0.490),方差分析结果显示具有统计学意义(P0.001)。结果表明:Nodal的表达在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变、宫颈浸润癌中的表达逐渐上升,Nodal在宫颈癌发生、发展过程中可能起着一定的作用。     

心理健康指导及干预在冠脉CT检查中的应用价值分析

探究心理健康指导及干预在64排螺旋CT冠状动脉血管造影(CTA)检查中的应用价值。方法:选取2017年3月—8月于我院放射科行CTA检查的患者120例,根据检查顺序随机分为观察组和对照组,每组60例,对照组检查前实施常规护理和操作,观察组在此基础上给予心理护理干预。观察2组患者检查过程中心率、血压、呼吸及焦虑情况,对比2组患者成像质量、检查所用时间及一次性成功率。结果表明:观察组患者心率、收缩压、舒张压、呼吸频率以及焦虑评分均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。观察组图像质量为Ⅰ~Ⅱ级患者所占比例高于对照组,Ⅳ~Ⅴ级患者所占比例低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);图像质量为Ⅲ级患者所占比例在2组之间的差异无统计学意义(P0.05)。观察组4例患者检查前用药控制心率,2例屏气不佳,1例因恐惧终止检查,最终53例患者检查一次性成功,一次性成功率为88.3%,高于对照组的76.7%(46/60),差异有统计学意义(x2=6.832,P0.05);观察组与对照组患者检查所用时间分别为(26.6±5.3)min和(34.1±6.2)min,差异有统计学意义(t=3.124,P0.05)。结论:对冠脉CTA检查患者实施心理健康指导及干预能够有效改善患者即时心理状态,控制检查前心率及血压,提高成像质量和检测一次性成功率,缩短检查时间,提高检查效率,值得推广。     

血清型IgA在胃肠道肿瘤淋巴结转移中的表达及意义

探讨血液中血清型 Ig A含量的变化与胃肠道肿瘤是否合并有淋巴结转移的关系 .选取胃肠肿瘤合并有淋巴结转移及不合并有淋巴结转移的病例共 6 2例 ,进行术前血清 Ig A含量的测定并进行比较 .结果表明术前胃肠道肿瘤合并有淋巴结转移组的血清 Ig A含量高于不合并有淋巴结转移组的血清 Ig A含量 ,经过统计学处理 ,差异有显著性 ( t=2 .939,P<0 .0 5) .通过实验可以得出这样的结论 :术前胃肠道肿瘤患者血清 Ig A含量增高可以提示该患者已合并有淋巴结转移     

几何图形在高等数学中的作用及在Maple下的实现

高等数学由于其内容的高度抽象,逻辑严密成为学生学习的一大难点.探讨了几何图形在高等数学教学中的作用及在Maple下实现图形可视化的方法,为高等数学教与学提供一种辅助方法.     

翘嘴鳜miR-146a在胚胎发育过程中的表达及温度对其表达的影响

为了解翘嘴鳜胚胎发育中miR-146a的表达规律以及温度对miR-146a表达的影响,将翘嘴鳜受精卵分别在22℃和25℃水温下孵化,并利用实时荧光定量方法检测miR-146a在各个发育阶段的表达.结果显示,在22℃孵化时,miR-146a的表达在原肠期前处于较高水平且各时期表达没有显著性差异(P0.05),在尾芽期后出现显著性降低(P0.05),并在出膜时达到最低值;在25℃孵化时,miR-146a的表达直到神经胚期仍处于较高水平且各时期表达没有显著性差异(P0.05),发育进入尾芽期后表达显著降低(P0.05),在肌效期达到最低值;miR-146a在25℃水温孵化时的表达较22℃孵化同时期的表达都出现显著降低(P0.05).研究表明,miR-146a可能主要在胚胎发育后期起到调控胚胎发育的作用,在尾芽期后通过下调表达来促进胚胎的发育;并且温度能影响miR-146a的表达,温度升高会降低miR-146a在胚胎发育各个时期的表达,将有利于胚胎的发育.     

新型蛋白酶抑制剂基因hwtx-11在大肠杆菌中的克隆表达及杀虫功能研究

将化学合成的蜘蛛毒素蛋白酶抑制剂基因hwtx-11克隆至载体pGEX4T-1上,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达.重组菌株在IPTG诱导下,经SDS-PAGE和Western blot分析表明,表达的GST-HWTX-11融合蛋白的相对分子量约为33 kD.对重组菌株诱导表达后的产物进行生物活性测定,GST-HWTX-11融合蛋白对甜菜夜蛾(Spodoptera exiguaHubner)和棉铃虫(Helicoverpa armigera)在3d时的LC50分别为86.6μg/mL、119.4μg/mL;其与Cry1Ac对甜菜夜蛾和棉铃虫幼虫毒力也有明显的协同作用.     

ING5在食管鳞癌中的表达及意义

为分析ING5的表达与食管鳞状细胞癌的发生之间的联系,在不同分期的食管鳞癌患者的癌组织中,通过RT-PCR的方法对ING5的表达水平进行检测.结果发现,RT-PCR检测到食管鳞癌组织ING5mRNA表达下调,ING5mRNA表达的下调可能与食管鳞癌的发生密切相关.     

SLP-2基因在乳腺癌细胞系中的表达及对MCF-7细胞增殖的影响

人的SLP-2基因在乳腺癌组织的高表达与病人的存活率相关.为了研究SLP-2在乳腺癌中的功能,应用免疫印记的方法检测SLP-2在不同乳腺癌细胞中的蛋白表达水平,发现随着细胞癌化程度的增强其表达也增强.成功构建p CMV-Myc-SLP-2重组质粒,证明了其在MCF-7细胞的表达,MTT实验结果表明SiRNA转染乳腺癌细胞MCF-7可以抑制细胞增殖,同时发现SLP-2在乳腺癌细胞系中表达量与HER2/nue呈负相关.这些结果为深入研究乳腺癌的发生和发展奠定了基础.     

戊型肝炎病毒ORF2片段在毕赤酵母中的分泌表达及活性鉴定

为了寻求新型表达系统来研制戊型肝炎病毒基因工程疫苗，利用Pichia pastoris表达系统表达戊型肝炎病毒(HEV)结构区ORF2基因．利用PCR扩增HEV ORF2基因，然后将ORF2基因按正确的阅读框融合到Pichia postoris分泌型表达载体pPIC9K的a-因子信号肽编码序列3’端，重组表达载体在电击转化毕赤酵母，经过含G418的营养缺陷型培养基(RDB)筛选、重组酵母基因组总DNA进行PCR鉴定后，证实HEV ORF2基因已经整合到酵母基因组中并得到重组转化子．表型鉴定后对G418具有不抗性的重组菌株诱导表达，用双抗体夹心法ELISA筛选了表达外源蛋白的重组菌株，再经SDS-PAGE与Western blot证实ORF2基因在Pichia pastoris中实现了分泌表达，而且重组蛋白具有较强的特异性与生物学活性；同时用双抗体夹心法证实在Pichia pastoris表达的上清中存在衣壳蛋白聚体．     

DR5上调在5-烯丙基-7-二氟甲氧基白杨素增强TRAIL诱导人肺癌A549细胞凋亡中的作用

目的:观察5-烯丙基-7-二氟甲氧基白杨素(AFMC))是否协同肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导人肺腺癌A549细胞凋亡.并探讨其机制是否涉及死亡受体5(DR5)的上调.方法:体外培养人肺腺癌A549细胞和人胚肺WI-38细胞.碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)定量分析细胞凋亡率;DNA琼脂糖凝胶电泳观察细胞DNA梯形条带;Western Blotting检测DR5蛋白表达.结果:单独用亚毒性浓度的AFMC(1.0μmol/L)或TRAIL(30μg/L)处理A549细胞,细胞凋亡率不超过5%.AFMC(1.0μmol/L)联合TRAIL(30μg/L)的A549细胞凋亡率增高(37.80%,P0.01);而WI-38细胞仅有极少量的细胞凋亡(P0.05).DNA琼脂糖凝胶电泳显示:两者合用A549细胞呈现典型的DNA梯形条带图谱,而WI-38细胞未出现DNA梯形条带;Western Blotting分析发现:AFMC呈浓度和时间依赖性上调A549细胞DR5的表达,DR5特异性抑制剂DR5/Fc嵌合蛋白能有效降低两者合用诱导的A549细胞凋亡率(P0.05).然而,AFMC对WI-38细胞DR5表达无明显影响.结论:亚毒性浓度的AFMC选择性增强TRAIL诱导人肺癌A549细胞凋亡.其机制可能与其上调DR5表达有关.     

CK2β与E-cadherin在宫颈癌中的表达及对患者3年生存率的预测价值

探讨蛋白激酶CK2β与E-钙黏蛋白(E-cadherin)在宫颈癌中的表达及对患者3年生存率的预测价值。选择2013年3月—2017年2月江苏大学第四附属医院妇科收治的60例宫颈癌患者,应用免疫组化法检测宫颈癌组织和旁癌组织E-cadherin与CK2β的阳性表达情况,分析二者与临床病理参数的关系,并探讨其对预后的评估价值。结果显示：宫颈癌组织CK2β蛋白阳性率明显高于旁癌组织,而宫颈癌组织E-cadherin阳性率明显低于旁癌组织(P<0.05);宫颈癌组织E-cadherin、CK2β蛋白与临床分期、淋巴结转移及分化程度等标志物相关(P<0.05),而与肿瘤直径、病理类型、脉管瘤栓、深肌层浸润及宫旁浸润等指标无关(P>0.05);单因素分析结果显示,宫颈癌患者3年生存率与肿瘤直径、临床分期、分化程度、CK2β蛋白表达和E-cadherin表达等标志物差异有统计学意义(P<0.05);Cox多因素分析显示,临床分期(Ⅲ～Ⅳ)(OR=1.335,95%CI:1.029～1.733)、分化程度(低分化)(OR=2.018,95%CI:1.034～3.937)、淋巴...