净化室与层流架相结合饲养繁殖裸鼠经验

为创造一个净化环境饲养裸鼠,我们将旧动物房改造成11M~2和9M~2两间净化室,一间为裸鼠繁殖室,一间为裸鼠实验室。净化室空气经过初、中、高效三级过滤,由鼓风机送风,室内保持正压,净化室内放层流架饲养繁殖裸鼠。进入净化室的一切物品经过严格消毒后由传递窗传入,层层拆包进入层流架,工作人员洗澡后更换无菌服进入净化室。经过一年多的使用,取得了一定的效果。裸鼠繁殖平均产仔数6.8只,平均成活率80％,一年内进行了四次空气菌落检测,均达到100级净化标准。此外,还在实验室进行了裸鼠肿瘤实验,均取得满意的效果。通过一年的裸鼠繁殖,实验证明在外环境条件比较差的情况下,利用旧房屋改造建立裸鼠室是可行的。只要严格管理,合理操作,同样能取得满意的效果。     

ICR／RMU—nu无胸腺裸鼠的培育

作者从一窝白色ＩＣＲ远交系小鼠群中发现突变裸鼠，采用回交一互交号法“ｎｕ”基因保留下来，随后用隔离器养的ＩＣＲ小鼠为代乳鼠，通过剖腹取胎净化该种群，微生物学检查其主要项目达到ＳＰＦ级标准，术后动物饲养于洁净层流架中，＾６０Ｃｏ灭菌饲料，酸化水、鼠盒、垫料均高压灭菌，以纯合雄鼠与杂合雌鼠１：１非近亲繁殖，扩大了种群，定名ＩＣＲ／ＰＭＵ－ｎｕ裸鼠。与此同时，对突变裸鼠进行了免疫生物学检查，剖检１０余只     

小型裸鼠屏障设施与管理

总结了裸鼠饲养繁殖与裸鼠实验研究二部分的屏障设施及其管理经验,包括无菌隔离器、层流架、洁净间、过滤帽鼠盒、高压蒸气消毒器等设备的布局,使用方法与检测要求。实践表明,建立小型屏障系统加之必需的辅助设备,可以完成裸鼠的扩大生产,并进行高水平的实验研究。     

SPF裸鼠在简易裸鼠饲育室培育的探讨

利用旧动物室改造成具有恒温、恒湿、洁净的饲育室,配合无菌操作技术,应用层流架饲养从上海肿瘤所引进的SPF裸鼠,经过四年对动物育种,饲养和无菌操作技术进行探讨。我们成功地培育了300只SPF裸鼠用于人胃高分化腺癌7911侈植瘤、人胃低分化腺癌MGC80-3裸鼠肝转移、人肝癌组织裸鼠移植瘤、人肝癌细胞株BEL-7102移植瘤、3.4苯丙吡诱发裸鼠皮肤癌等模型。在动物育种方面我们采用BALB/c非裸近交产生基因稳定核心群,BALB/c裸鼠与BALB/c核心群回交以保持BALB/c裸鼠基因的稳定性和一致,利用回交产生的雌性半裸鼠和维性全裸鼠生产裸鼠,淘汰半裸鼠。以此循环能准确断定仔鼠基因型,使留种,配种及繁殖方便准确。此繁殖方法生产断乳的仔鼠比杂交法断乳仔鼠平均体重增加2g,半裸雌鼠受孕率达82％,28和60日龄课鼠与同龄半裸或非裸鼠体重相差无几,已接近国内同行繁育裸鼠水平。在改造旧动物房繁殖裸鼠同时,我们严格采用无菌衣帽穿戴、消毒和无菌操作技术使层流架和房间每平皿菌落低于国外同类饲育室平均标准。     

超净生物层流架内裸鼠长期饲育的研究

用自行设计制造的超净生物层流架对NC裸鼠进行了二年多的饲育,共繁殖NC裸鼠197只,成功地建立了人大肠癌裸鼠移植传代模型,已传至19代,传代总成功率97％(105/108)。本所饲育的裸鼠已用于多种用途的研究,表明层流架可适于NC裸鼠的长期饲育,是易于管理、投入较少、适合国内中小型实验室的实验动物设施。     

应用层流柜饲养裸鼠的体会

裸鼠是先天性胸腺缺陷动物 ,T细胞缺乏 ,是现今进行人癌异种移植的理想动物。然而由于裸鼠的饲养条件要求较高 ,使其应用受到了很多的限制。我们教研室经过几年的探索 ,在无菌实验室内使用层流柜 ,再加上比较严格的管理制度 ,成功地饲养裸鼠 18批次 ,5 6 0余只 ,都顺利地完成了实验。所以 ,在实验室条件下使用层流柜短期饲养裸鼠是可行的     

相对洁净环境下使用IVC系统长期饲养SPF级动物的效果观察

在我国大小鼠的微生物级别“达到清洁级以上”才视为合格的实验动物。而这种级别的实验动物需要饲养在屏障或隔离系统中。目前的屏障／隔离系统有“传统的屏障系统、隔离罩、层流架和独立换气净化笼具”（简称IVC,下同）四种模式。用IVC系统取代传统的屏障环境,也是一种节能和节约资金的新尝试,理论上可替代传统的屏障系统来饲养SPF级实验动物。     

常用SS─1─B型斜口小鼠笼改进后的内微环境变化观察

按国内外有关法规，饲养环境的氨浓度应不超过２０ｐｐｍ。我们通过对常用的ＳＳ一１一Ｂ型斜口小鼠笼改进设计：将箱体左右两侧距笼底６ｃｍ处，水平钻成两排共１２个小孔（ｒ＝０．３ｃｍ，小孔的数量也可根据笼具的规格不同而定）。孔与孔之间左右上下间隔均为ｌｃｍ。改进后的鼠笼内微环境氨浓度比原先明显降低。４只刚断乳的雄性ＮＣ裸鼠饲养７２ｈ，氨浓度从原来的２０．１４±３．５２ｐｐｍ降至１２．１５±１０ｐｐｍ（ｔ＝３．１８，ｎ＝６，ｐ＜０．０１）。又发现：改进后的鼠笼内温湿度与饲养室内温湿度更趋于一致，这样，实验动物所需环境温湿度也就更接近最适值或目标值。另外，改进后的笼具便于消毒。因培育裸鼠的笼具常常数只套叠一起进行高压蒸汽灭菌，改进后的笼具能使处于死角的垫料消毒更彻底。     

过滤帽鼠盒饲养繁殖裸小鼠的观察

<正> 无胸腺小鼠(以下简称裸小鼠),系免疫缺陷动物,饲养于SPF环境中,能接受多种人类癌细胞移植。近年来我国病理学家和免疫学家用裸鼠做动物模型,在医学生物学研究中进行了大量的工作,在癌症机理研究方面取得了可喜成就,某些项目已进入国际先进行列。国内对裸鼠的需求量不断增加。过滤帽鼠盒可做为最简易的屏障用于饲养SPF动物,近年来国内外虽有这方面的介绍,但对其用来繁殖动物的安全性及使用时间的长短,未见详细报导。本文就过滤帽鼠盒性能,裸小鼠饲养繁殖的效果及微生物检测等几方面进行探讨。现将结果报告如     

常用SS-1-B型斜口小鼠笼改进后的内微环境变化观察

按国内外有关法规,饲养环境的氨浓度应不超过20ppm。我们通过对常用的SS-1-B型斜口小鼠笼改进设计:将箱体左右两侧距笼底6cm处,水平钻成两排共12个小孔(r=0.3cm,小孔的数量也可根据笼具的规格不同而定)。孔与孔之间左右上下间隔均为1cm。改进后的鼠笼内微环境氨浓度比原先明显降低。4只刚断乳的雄性NC裸鼠饲养72h,氨浓度从原来的20.14±3.52ppm降至12.15±2.10ppm(t=3.18,n=6,P<0.01)。又发现:改进后的鼠笼内温湿度与饲养室内温湿度更趋于一致,这样,实验动物所需环境温湿度也就更接近最适值或目标值。另外,改进后的笼具便于消毒。因培育裸鼠的笼具常常数只套叠一起进行高压蒸汽灭菌,改进后的笼具能他处于死角的垫料消毒更彻底。     

六年中裸小鼠繁殖群动物自发性肿瘤发病情况研究

对饲养于ＳＰＦ条件下的４６６只ＮＣ系自育选留的繁殖群小鼠自发性中瘤发病情况进行了６年观察，研究其中包括纯合子雄鼠（ｎｕ／ｎｕ）１６４只，杂合了雄鼠（ｎｕ／＋）３０２只。每只动物的平均观察时间均达７个月以上，淘汰时均详细解剖学检查，检出病变者进行病理组织学及透射电镜观察确诊。多数肿瘤病例结合裸鼠间可移植性鉴定。共检出自发性肿瘤７例，发生于纯合子裸鼠（♂，ｎｕ／ｎｕ）５例，杂合子裸鼠（♂，ｎｕ／＋）２例。本结果表明，在相同饲养环境条件下，裸鼠（♂，ｎｕ、／ｎｕ）的自发性肿瘤发病率（３．０４％）比其同系的有胸腺杂合子裸鼠（♀，ｎｕ／＋）（０．６６％）明显增高，两者发病比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５），且前者的平均发瘤鼠龄比后者为短。结果支持了免疫功能缺陷的裸鼠比其同系免疫功能正常鼠有更高的自发性肿瘤发生的观点。且表明了ＮＣ系裸鼠的自发性肿瘤以恶性上皮性肿瘤为主。此外作者针对前人的观察结果，提出了对一裸群体的自发性肿瘤的正确评价，必须是在相同的生存环境条件下，相同的观察时间内与相同品系或相同基因背景的有胸腺小鼠进行比较，并经详细的病理学检查，才能得出较客观可靠的结论这一见解。     

裸鼠的饲养繁殖及应用于肿瘤学的研究

裸鼠的饲养繁殖及应用于肿瘤学的研究黄培根湛江医学院病理教研室１９８５年１０月经我室自行设计，建成了广东省第一个裸鼠实验动物室，开展了裸小鼠的饲养繁殖和应用研究工作。６年多来，我们成功地维持和保证了该室的正常运转，并充分发挥了该室在肿瘤学，尤其是鼻咽癌...     

应用层流柜饲养实验性糖尿病Scid小鼠体会

Scid小鼠缺乏T和B淋巴细胞免疫功能,实验性糖尿病又进一步增加其感染机会,饲养难度更大。应用层流柜划分饲养及工作区,并设立“污染手制度”,在清洁环境内局部控制为SPF环境;日常饲养中适量添加维生素,成功饲养实验性糖尿病(Sevore Combined Immunodeficience Scid)小鼠四批,最长9周,顺利完成实验。实践证明,通过严密的环境控制,严格的操作程序,在清洁级环境中应用层流柜局部控制为SPF环境,短期饲养实验性糖尿病Scid小鼠是可行的。     

BALB／C裸小鼠的引种及饲养管理

在遗传上有缺陷的动物，具有能够近似地模拟人类某些疾病的特性。因此，常被作为研究人类疾病的动物模型。其中Ｔ细胞缺陷的裸小鼠在国内外最常用，特别是在肿瘤研究中应用更为有效。为推广扩大该实验动物在我省的应用，我们本着投资少，见效快的方针，建立了小规模的饲养繁殖体系。保种及生产繁殖的裸小鼠饲养在隔离器中，实验用裸小鼠饲养在层流架中带滤帽的笼盒内。着重抓好环境控制，消毒灭菌，营养和人员素质等关键环节，取得了裸小鼠在我单位的首次繁育成功，并应用于食管癌移植瘤模型的建立等研究。     

SPF级动物实验室改造初探

目的根据实验动物环境及设施国家标准（GB 14925-2001）的规定,建立符合我校实际情况的SPF级大、小鼠实验设施。方法在原有土建的基础上,利用普通级大、小鼠饲养室的空调净化系统,室内进行必要的装修和改造,饲养室内安装IVC、净化工作台及配套设备,使动物饲养和实验全过程达到SPF级。结果改造后的SPF级实验室的环境设施各项指标均符合GB 14925-2001的要求,已成功饲养SPF级SD和Wister大鼠,远交系小鼠（KM和ICR）,近交系小鼠（C57BL/6转基因鼠、BALB/C、BALB/c-nu裸鼠）共20批次。动物的生长健康状况良好,成活率接近100%。结论这种在初、中效过滤环境下的IVC配置,大大节省了运行的电费和维持费用,便于管理,非常适合于以动物实验为主的实验动物使用单位。     

组合型防病鼠盒及其架具的研究

为了预防交叉污染、提高工作效率，采用椎、顶、档原理研制组合型防病鼠盒及其架具。组合型防病鼠盒由鼠盒壳体、活动挡扳、垫料盒和笼盖组成、架具由横梁、纵梁、立柱和位于底端的万向脚轮组成，架具分四层，每一层均由鼠盒悬挂梁和挂钩、活动搁板和支架构成。将灭菌后的组合型防病鼠盒吊挂在悬挂梁的挂钧上，每一层可悬挂六个。更换垫料时，将活动搁板从架具一侧推出横梁外，支架随之自动展开，承接和固定活动搁板后，把装有垫料的无菌垫料盒从鼠盒壳体的一端推入，壳体内的原有垫料盒随之被顶出到活动搁扳上，小鼠被自动换入无菌垫料盒内，待操作完毕，将活动搁扳和支架复位即可。将组合型防病鼠盒与旧式鼠盒进行了对比试验，用灵杆菌气溶胶喷雾定量染菌方法对小鼠体表染菌。结果表明，若小鼠体表携带灵杆菌，用旧式鼠盒饲养、更换垫料时，能导致全部小鼠体表接触性交叉污染，而组合型防病鼠盒能防止接触性交叉污染，并且对室内空气中的粉尘和细菌浓度的影响，比旧式鼠盒分别降低３．１倍和２．３倍，更换垫料的速度，前者比后者提高至少２倍以上。     

六年中裸鼠繁殖群动物自发性肿瘤发病情况研究

对饲养于SPF条件下的466只Nc系自育选留的繁殖群小鼠自发性肿瘤发病情况进行了6年观察研究,其中包括纯合子雄鼠(nu/nu)164只,杂合子雌鼠(nu/+)302只。每只动物的平均观察时间均达7个月以上,淘汰时均详细解剖学检查,检出病变者进行病理组织学及透射电镜观察确诊。多数肿瘤病例结合裸鼠间可移植性鉴定。共检出自发性肿瘤7例,发生于纯合子裸鼠(♂,nu/nu)5例,杂合子裸鼠(♀,nu/+)2例。本结果表明,在相同饲养环境条件下,裸鼠(♂,nu/nu)的自发性肿瘤发病率(3.04％)比其同系的有胸腺杂台裸鼠(♀,nu/+)(0.66％)明显增高,两者发病比较有显著性差异(P<0.05),且前者的平均发瘤鼠龄比后者为短。结果支持了免疫功能缺陷的裸鼠比其同系免疫功能正常鼠有更高的自发性肿瘤发生的观点。且表明了Nc系裸鼠的自发性肿瘤以恶性上皮性肿瘤为主。此外作者针对前人的观察结果,提出了对一裸鼠群体的自发性肿瘤发病率的正确评价,必须是在相同的生存环境条件下,相同的观察时间内与其相同品系或相同基因背景的有胸腺小鼠进行比较,并经详细的病理学检查,才能得出较客观可靠的结论这一见解。     

组合型防病鼠盒及其架具的研究

为了预防交叉污染、提高工作效率，采用推、顶、挡原理研制组合型防病鼠盒及其架具。组合型防病鼠盒由鼠盒壳体、活动挡板、垫料盒和笼盖组成，架具由横梁、纵梁、立柱和位于底端的万向脚轮组成。架具分四层，每一层均由鼠盒悬挂梁和挂钩、活动搁扳和支架构成。将灭菌后的组合型防疫鼠盒吊挂在悬挂梁的持钩上，每一层可悬挂六个。更换垫料时，将活动搁板从架具一侧推出横梁外，支架随之自动展开，承接和固定活动搁板后，把装有垫料的无菌垫料盒壳体的一端推人，壳体内的原有垫料盒随之被顶出到活动搁板上，小鼠被自动换人无菌垫料盒内。待操作完毕，将活动搁板和支架复位即可。将组合型防病鼠盒与旧式鼠盒进行了对比试验，用灵杆菌气溶胶喷雾定量染菌方法对小鼠体表染菌。结果表明，若小鼠体表携带灵杆菌，用旧式鼠盒饲养、更换垫料时，能导致全部小鼠体表接触性交叉污染。而组合型防病鼠盒能防止接触性交叉污染，并且对室内空气中的粉尘和细菌浓度的影响，比旧式鼠盒分别降低３．１倍和２．３倍。更换垫料的速度，前者比后者提高至少２倍以上。     

双向出风水平层流净化工作台的研究

本文提出了一种新型结构的净化工作台——双向出风水平层流净化工作台。分析了该工作台的结构特征及设计注意事宜。通过与常规水平层流净化工作台的比较及实验结果分析，指出了该产品的经济性、优越性及应用前景     

层流架内应用带空气过滤罩的鼠盒繁育Scid小鼠研究初报

采用带空气过滤罩的鼠盒在层流架内饲育Ｓｃｉｄ小鼠获得成功。平均窝产仔数４．８只，肥孕率６６．７％，离乳率较高可达９６．６％，其骨髓活化ＮＫ细胞用于异基因骨髓移植可促进骨髓植入和造血功能重建，预防移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ），并增强抗肿瘤效应（ＧＶＴ）。该法可以作为缺乏现代化馈养设施又急需Ｓｃｉｄ小鼠的单位进行中短期饲育。