Logistic方程在蜡蚧轮枝菌液体发酵中的应用

分析了蜡蚧轮枝菌Verticillium lecanii(Zimmermann)Viegas在19L发酵罐液体发酵培养过程中的菌体生长和产孢量增长变化趋势，提出可以应用Logistic方程模拟该增长变化趋势，运用实验数据计算出方程的参数，建立了蜡蚧轮枝菌液体分批发酵中生物量和产孢量的动态变化模型。仿真计算结果表明：Logistic模型预测值与实验数据拟合度较好，能很好的反映蜡蚧轮枝菌液体分批发酵的过程。     

硫磺菌液体培养条件的优化研究

以齿孔酸含量为评价指标,进行硫磺菌液体培养的培养基条件优化和硫磺菌菌丝体中齿孔酸含量检测方法研究.以葡萄糖、黄豆粉、KH2PO4、干木瓜为液体培养基成分,采用正交试验法设计确定培养基中上述各组分的最佳配比.用此条件进行硫磺菌液体培养15d后,收集硫磺菌菌丝体,采用反相高效液相色谱法,色谱柱:Diamonsil C18(250mm×4.6mm,5μm),以乙腈10%~100%,超纯水90%~0%,为流动相进行梯度洗脱;柱温25℃;检测波长:203nm;流速1.00mL/min,运行时间40min,以齿孔酸为对照测定硫磺菌菌丝体中齿孔酸含量.结果表明硫磺菌液的最佳配比为:葡萄糖15g/L、黄豆粉1.5g/L、KH2PO42.0g/L、木瓜煎液(相当于干木瓜)100g/L;硫磺菌菌丝体总干重为3.35g,其齿孔酸总含量为23.98mg.研究所建立的硫磺菌液体培养的培养基条件简单可行;硫磺菌菌丝体中齿孔酸检测方法稳定性、精密度、重复性良好,适用于硫磺菌中齿孔酸的含量测定.     

应用RNAIII抑制肽（RIP）抑制葡萄球菌毒素产生的实验研究

通过体外实验研究RNAⅢ抑制肽(RIP)抑制葡萄球菌产生肠毒素和溶血素的效果。将200μL浓度为2.5%的二甲基亚砜(DMSO,对照组)和1mg/mL的R IP分别加入到200μL浓度1×108/mL的TECRA菌液,培养3h后,定量检测两组菌液中SEB的含量。将分别含有0.75% DMSO、100μg左氧氟沙星、40μg RIP和40μg RIP+100μg左氧氟沙星的菌液与50μL含有4%家兔红细胞的PBS液共同培养1h后,用酶标仪检测各组上清液中血红蛋白的含量。在ELLISA反应的5、10、30min三个时间点,RIP组菌液中SEB含量均明显低于DMSO组,两组数据具有极显著性差异(p<0.001);RIP组和左氧组菌液中的溶血素的含量明显低于空白组(p<0.05,p<0.01),联合用药组菌液中的溶血素含量明显低于空白组和RIP组,与左氧组相比差别不显著。说明RIP可以有效抑制金葡菌肠毒素和溶血素的产生,与抗生素联用有一定的协同功效。     

溶磷真菌的分离鉴定及其对新疆加工番茄种子萌发的影响

溶磷真菌是能够将难溶磷转变为可溶性磷的一类微生物。为了提高磷素利用率,本研究采用平板培养法从加工番茄根际土壤中分离筛选到2株溶磷能力较强的菌株,分别命名为3-1和3-2,结合菌落形态特征和ITS r DNA序列分析,将菌株分别鉴定为黑曲霉(Aspergillus niger)和黄曲霉(Aspergillus flavus)。用以Ca3(PO4)2为唯一磷源的培养基对其溶磷能力进行测定,发现菌株3-1和3-2对Ca3(PO4)2的溶磷量分别是368.7 mg/L、142.2 mg/L。通过不同浓度的单菌菌液和混和菌液处理新疆加工番茄里格尔(87-5)种子,发现不同菌株、不同的菌液浓度对加工番茄种子萌发影响显著,发芽指数随菌液浓度的降低而增加;菌株3-2菌液OD600光密度值为0.1时,发芽率最高,达(94.5±1.0)%;单菌株处理组的发芽势随着菌液浓度的降低而增加。本研究结果为获得有益于新疆加工番茄生产应用的溶磷菌株提供了重要参考。     

农杆菌介导的棉花遗传转化过程中诸因素对出愈率的影响

研究了农杆菌介导的棉花遗传转化过程中影响外植体出愈率的一些相关因素.结果表明:卡那霉素(Kan)的浓度以50 mg/L或75 mg/L为最好,农杆菌菌株EHA105的浸染能力较强,7 d苗龄的棉花无菌苗下胚轴为最佳的遗传转化外植体材料,下胚轴外植体经预培养后再经农杆菌菌液浸染更有利于胚性愈伤组织的形成,同时农杆菌菌液浸染时间以3 min为最佳.     

何首乌茎段离体培养的研究

用何首乌种子经表面消毒后进行无菌发芽并建立了无菌材料，以无菌实生苗茎段作外植体进行离体快繁研究。试验了不同基本培养基(MS，H，1／2MS，B5和N6)，不同种类外源激素(IBA、NAA、KT)和不同浓度梯度的外源激素(0．0mg／L，0．1mg／L，0．Smg／L，1．0mg／L，2．0mg／L和4．0mg／L)以及不同蔗糖浓度(0．0％，1．0％，2．0％，4．0％，8．0％，16．0％)对茎段离体培养的影响。结果表明：MS基本培养基，0．5mg／L IBA(或0．5mg／LNAA)及3％的蔗糖比较适合于何首乌的茎段离体快繁。推荐用于何首乌茎段离体快繁的最佳培养基配方为：MS 肌醇100mg/L^ 盐酸硫胺素1．0mg／L 盐酸吡哆素0．5mg／L 甘氨酸2．0mg／L IBA0．5mg／L(或NAA0．5mg／L) 蔗糖3．0％ 琼脂0．75％，pH5．9。用该培养基对何首乌进行茎段离体快繁，每次继代培养可增殖4～5倍。     

一株解淀粉芽孢杆菌亚种产果聚糖培养条件优化

通过单因子试验和多因子的正交试验对解淀粉芽孢杆菌亚种LE-3液体摇瓶发酵产胞外果聚糖的培养条件(碳源、氮源、接种量、发酵时间)进行了优化,并提取纯化果聚糖,进一步测定了该果聚糖螯合Fe~(2+)的能力。结果表明:解淀粉芽孢杆菌亚种LE-3种子菌液培养24 h后按照10%(v/v)接种发酵培养基(蔗糖60 g/L、酵母膏2.5 g/L、KH_2PO_4 2.5 g/L、K_2HPO_4 2.5 g/L、NaCl 1.0 g/L、MgSO_4·7H_2O 0.2 g/L、FeSO_4·7H_2O 0.001 g/L,初始pH 7.0),37℃培养36 h,胞外果聚糖产量达到最高值18.36 g/L,约是未优化时的3.0倍。     

重组人碱性成纤维细胞生长因子类似物在大肠杆菌中的分泌表达研究

用带有大肠杆菌外膜蛋白信号肽序列的重组分泌型表达载体pSE-hbFGF，在大肠杆菌BL21中分泌表达了rhbFGF类似物。SDS－PAGE、免疫印迹结果表明，表达产物分泌到了细胞周质和培养液中，用间接ELISA测定出培养上清中的rhbFGF类似物为24.5mg/L，周质中为36.5mg/L菌液（O.D600nm=10)。同时探讨了发酵培养中影响rhbFGF表达的几个关键因素，如诱导时期的选择、诱导时间的长短、培养基的选择及诱导剂的浓度等。     

白蜡花粉最佳离体萌发培养基筛选

【目的】筛选白蜡(Fraxinus sp.)花粉最适离体培养基，能够为后续的授粉受精和育种工作提供一定的参考依据。【方法】通过收集绒毛白蜡‘金箭’(F.velutina‘Jinjian’)和美国红梣‘鲁蜡5号’(F.pennsylvanica‘Lula 5’)的花粉，比较固体培养基和液体培养基上花粉的萌发情况，选用适宜的离体培养法观察培养时间对花粉萌发情况的影响，设计正交试验，筛选最佳离体萌发培养基。【结果】(1)固体培养基上‘金箭’的花粉萌发率均显著高于液体培养基，02和03号固体培养基上‘鲁蜡5号’的花粉萌发率显著高于液体培养基。(2)培养2.5 h左右的花粉适宜进行生活力的观测。(3)正交试验表明：‘金箭’花粉的最适萌发培养基为150 g/L蔗糖+20 mg/L硼酸+30 mg/L氯化钙，‘鲁蜡5号’花粉的最适萌发培养基为150 g/L蔗糖+40 mg/L硼酸+30 mg/L氯化钙。【结论】采用150 g/L蔗糖+20 mg/L硼酸+30 mg/L氯化钙的固体培养基培养2.5 h后适宜统计两种白蜡花粉的萌发情况，但不同种的花粉萌发率与花粉管长度的相关性有差异。     

6株拮抗细菌对致病疫霉抑制作用的比较

比较在前期获得的明显抑制致病疫霉菌丝生长的6株细菌的抑菌性能及其防病潜力,为开发生防制剂防治马铃薯晚疫病提供依据.采用对峙培养法和打孔法测定6株细菌活体、菌液和无菌体发酵液对病菌菌丝生长的抑制作用,利用块茎切片法评价拮抗菌菌液对晚疫病的离体防治效果.结果表明,6株菌的菌液对菌丝生长的抑制作用均明显优于活体和无菌体发酵液,抑菌带宽度均在27mm以上,且均可引起菌丝体畸变,其中以WL2菌株的抑菌作用最强,活体、菌液和发酵液的抑菌带宽均在26mm以上,致畸作用也最强;此外,6株菌的菌液在离体块茎切片上的防病效果也以WL2菌液处理最好,病情指数最低(13.7),相对保护率最高(80.5%).这表明菌株WL2比其他5个菌株在防治马铃薯晚疫病方面有更大应用潜力.     

粘盖牛肝菌菌丝发酵养条件研究

研究了武陵山粘盖牛肝菌菌丝体的液体培养基和培养条件.结果显示,粘盖牛肝菌菌丝体液体发酵的最适培养基为:玉米粉4.0%,麸皮5.0%,磷酸二氢钾0.10%,硫酸镁0.05%;最适培养条件为:培养液pH 6.0,装液量75 mL.250 mL-1三角瓶,接种量9.0%,培养温度28℃,摇床转速170 r.min-1,培养时间6 d.在此培养条件下,粘盖牛肝菌菌丝体生长好,菌丝体产量达到(0.414 8±0.009 0)g.l00 mL-1.     

利用重组大肠杆菌生产聚-3-羟基丁酸的研究

利用携带能合成聚-3-羟基丁酸的基因的大肠杆菌E. coli XL1-Blue,优化培养基和培养条件后,进行了补料分批培养.结果表明,重组大肠杆菌E. coli XL1-Blue(pKSS105)的最适培养基为R培养基.在最佳条件下,以葡萄糖为唯一碳源培养工程菌60h后,发酵液中菌体干重达183g/ L,P(3HB)的产量为133.8g/ L,P(3HB)含量为73.1%.实验结果为P(3HB)实际应用提供了可能性的基础.     

l－群根类的Jakubik反原子

对Ｊａｋｕｂｉｋ问题作了进一步深入研究，证明了满足Ｊａｋｕｂｉｋ问题的根类是真类     

具高分化潜能的枸杞胚性悬浮细胞系的建立及保存

本文主要报道了具有高度植株再生潜能的枸杞优质胚性悬浮系的建立与保存方法．首次应用枸杞髓部组织诱导出Ⅱ型胚性愈伤组织，Ⅱ型胚性愈伤组织在ＭＳ液体培养基中增殖快（３天即可加倍），分散好，两周左右即可建立起优质悬浮系；悬浮细胞在液体分化培养基中能得到大量的胚状体，未经过滤建立起的悬浮系比经过过滤建立起的悬浮系能得到更多的胚状体．长时间悬浮培养后，枸杞胚性悬浮系再生能力下降，在固体培养基上培养一段时间后，转回液体培养基可使再生能力得以保持与恢复     

除虫菊组织培养研究

本文成功地进行了除虫菊的试管繁殖。探索出除虫菊的快速繁殖方法，实验结果表明：在ＭＳ附加２ｍｇ／１ＢＡ及０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ中，下胚轴能够很好地诱导芽的产物，幼芽地此培养基中能够极快地增殖。     

茶饼病菌的分离培养及其刺激作用

通过油茶饼病菌在PDA培养基、PDA+新鲜油茶叶片培养基、PDA+烘干油茶叶片培养基,高氏一号培养基、高氏一号+新鲜油茶叶片培养基、高氏一号+烘干油茶叶片培养基、查氏培养基等13种培养基中的培养实验,结果表明：PDA+新鲜油茶叶片培养基最适合于茶饼菌的生长,22.5 ℃为茶饼菌的最佳培养温度;担子椭圆或圆柱形,顶部具有2～4个担孢子;成熟的担孢子微循环产孢形成分生孢子,而后以出芽方式进行生长繁殖;用外担菌发酵上清液浸泡水稻种子,发现能刺激种子萌发,促进根系生长.     

细茎石斛组织培养研究

以细茎石斛(Dendrobium moniliforme(L)sw.)的种子进行离体培养,获得无菌苗.截取无菌苗的茎段作为外植体,进行组织培养.结果表明:最适宜诱导细茎石斛原球茎生成的培养为MS 0.5 mg/L6-BA 2 mg/L NAA 10%CM;最适宜细茎石斛原球茎增殖及幼苗分化的培养基为MS 4 mg/L6-BA 1 mg/L KT 1 mg/L NAA 10%马铃薯浸汁;最适宜细茎石斛壮苗生根的培养基为MS 2 mg/L NAA 10%香蕉汁;最适宜细茎石斛瓶苗移栽的基质为纯苔藓.     

枸杞组织培养的培养基配方优化试验

通过对枸杞组织培养的培养基部分成分的改换,发现用普通白砂糖代替蔗糖、自来水代替重蒸水、回收琼脂代替实验用试剂级琼脂,并去掉肌醇,对枸杞分化苗的增殖、生根无明显影响,可大幅度降低枸杞组培苗的成本.     

磷酸三丁酯-Span80-二甲苯乳状液膜迁移、富集稀土元素La(Ⅲ)的研究

用ＴＢＤ－Ｓｐａｎ８０－二甲苯乳状液膜体系研究了Ｌａ３＋的迁移行为，确定了完全、快速迁移Ｌａ３＋的条件．在该条件下，能够使Ｌａ３＋从常见过渡元素Ｆｅ３＋、Ｃｏ２＋、Ｎｉ２＋、Ｃｕ２＋、Ｃｄ２＋、Ｍｎ２＋、Ｚｎ２＋等离子的混合液中得到完全分离．     

水鳖蕨幼叶的离体快速繁殖

 通过组织培养技术可以从水鳖蕨[Sinephropteris delavayi (Franch.)Mickel]的幼叶诱导出完整植株.研究结果表明,1/2MS+6-BA3.0mg/L(单位下同)+NAA0.5(蔗糖3%)适合于诱导绿色小球(GGB);适合于绿色小球的增殖培养基是1/2MS+6-BA2.0(蔗糖2%)+NAA0.2;适合于芽生长的培养基是1/2MS+NAA0.3;1/2MS(蔗糖2%不加任何外源激素)培养基适合于诱导生根,生根率可达100%.