基因工程小鼠剖宫产生物净化技术的研究

目的 改进剖宫产手术,提高剖宫产生物净化效率,获得SPF级基因工程小鼠.方法 结合小鼠妊娠时间,触诊判断胎鼠发育情况推测剖宫产手术时间,优化剖宫产手术流程,缩短手术时间以提高手术效率;改进剖出仔鼠由SPF级ICR小鼠代乳以提高成活率;采用统计学方法对剖宫产净化数据进行分析.结果 以触摸胎鼠四肢清晰,头部与躯干长度相似,...     

ICR母鼠代乳在长爪沙鼠剖腹产净化中的应用

目的优化长爪沙鼠剖腹净化的技术方法。方法在超净工作台中对长爪沙鼠进行剖腹取胎,选择有2～3胎哺乳经验的ICR母鼠代乳,统计子鼠成活率和离乳率,绘制生长曲线。分别按小鼠微生物学和寄生虫学质量控制标准,对1月龄和2月龄的子鼠进行检测。结果代乳成活率超过50％,微生物学和寄生虫学检测均符合小鼠相关国家标准。代乳鼠与非代乳鼠其生长曲线没有差异。结论长爪沙鼠剖腹取胎,以ICR小鼠代乳方法,可以达到微生物净化的目的。     

Rag2 敲除大鼠剖腹净化

摘要: 目的 利用剖腹产的方法对基因工程 Rag2 敲除大鼠进行净化。方法 分别对见栓第 20 天和第 22 天的孕鼠 进行剖腹产手术,剖得仔鼠于 6—8 日龄时进行剪尾作 PCR 基因型鉴定,6—8 周龄进行微生物检测和基因型鉴定。 结果 大鼠剖腹产于见栓第 22 天进行,可以显著提高成活率,平均离乳率 84. 48% ; 净化后经检测,微生物等级符 合 SPF 级标准; 经基因型鉴定,可获得纯合子大鼠。结论 Rag2 敲除大鼠通过剖腹产净化可获得 SPF 级纯合子后 代,证明该方法可行。     

新西兰兔剖腹产人工净化

为了对新西兰兔进行生物学净化 ,剔除其体内外所携致病微生物 ,提高新西兰兔的微生物学等级。采用隔离器剖腹产净化 ,以全子宫摘除法对 11只临产新西兰孕兔施行剖腹产 ,选择出生体重 5 0g以上仔兔进行人工哺乳净化。结果发现对 34只仔兔进行人工哺乳 ,42d断乳成活 2 7只 ,离乳率 74 9%。经广东省实验动物监测所检测 ,达到清洁级标准。采用该方法对实验动物进行生物学净化取得了良好效果 ,达到了预期目的     

基因工程小鼠剖宫取胎的适宜条件

目的　净化升级基因工程小鼠。方法　采用统计学方法对基因工程小鼠剖宫取胎净化过程中的大量数据进行分析。结果　①按规律准确判断妊娠天数 ,可使剖得的仔鼠成活率达到 81 0 % ,②CD_1小鼠作为代乳母鼠剖得的仔鼠离乳成活率为 5 1 5 %。结论　适宜的剖宫取胎条件是提高剖出仔鼠和离乳仔鼠成活率的关键。     

SPF家兔种群的建立

目的对普通级实验家兔进行了剖腹净化,建立我国SPF家兔种子核心群,使普通级兔子升级换代,以满足科研、生产及检定工作不断发展的需要.方法采用剖腹摘取子宫术,在无菌隔离器内以吮吸法人工哺乳仔兔,离乳后将正常菌群植入仔兔体内,并转入SPF屏障设施内饲养、繁殖.结果建立了具有100只种兔的SPF兔子核心群,兔群生长发育正常.经多次微生物检测,符合SPF标准.SPF兔群将作为建立SPF实验用兔生产群的核心种群.     

2009—2013年北京地区实验动物质量抽检结果分析

目的通过对2009-2013年北京地区实验动物微生物、寄生虫、遗传质量抽检结果的回顾和总结,为实验动物的生产、管理和检测提供参考。方法按照现行国家和地方实验动物检测的相关标准,由北京市实验动物管理办公室依法对北京地区具备资质的实验动物生产单位进行抽样,委托检测机构进行检测,并发布质量报告。依据报告数据,对5年中北京地区不同级别大小鼠、豚鼠、兔、犬、猴、小型猪等实验动物的质量进行分析和评价。结果 5年抽检动物总数和批次逐年递增,批次合格率则有递减趋势。SPF级、清洁级、普通级动物均有不同程度的微生物和寄生虫感染,其中弓形虫感染在5年中均有检出。普通级动物的免疫抗体不达标率持续存在,并且有联合感染及上升趋势。有3个批次近交系小鼠遗传质量检测不合格。结论实验动物质量监督抽检是确保质量的有效手段,对实验动物行业发展和生命科学及生物医药卫生事业的发展至关重要。     

无菌大鼠培育的技术创新及其繁育探讨

对清洁级SD大鼠进行剖腹取胎净化,经人工饲育建立无菌SD大鼠群,以满足科研单位对无菌大鼠的需求。在手术隔离器中剥离子宫,取35只仔鼠传入饲育隔离器,静置2 h后存活20只;用自行研制的灌胃注射器,和市售配方改良奶粉,对剖腹取胎仔鼠进行人工哺乳。每24 h人工哺乳5~6次。哺乳20只,离乳13只。粪便、垫料、棉拭子经无菌检查,均无细菌生长。通过优化人工乳配方,创新无菌鼠培育技术,成功建立无菌大鼠模型,并传代保种,解决了科学研究在国内买不到无菌大鼠的难题。     

实验鼠的剖腹产代乳净化

实验动物的生物净化方法主要有药物净化和剖腹产净化两种，一般要得到较高级别的实验动物主要是通过剖腹产净化的方法达到，目前国内多采用手术隔离器进行剖腹产手术，笔者利用北京实验动物研究中心的悉生工程设备，以澳大利亚引进的无菌ＮＩＨ小鼠和ＳＤ大鼠作为代乳鼠，分别对来自美国的清洁级ＮＩＨ小鼠和来自澳大利亚的清洁级ＳＤ大鼠首次进行了在超净工作中做剖腹产手术的尝试。     

2006～2008年北京地区常用实验动物微生物和寄生虫检测结果分析

目的对2006年～2008年北京地区普通Beagle犬、大耳白兔和清洁以上大鼠(Wistar和SD品系)、小鼠(KM和ICR品系)微生物和寄生虫的抽检结果进行分析,为实验动物生产管理提供参考。方法按现行国标《实验动物微生物学检测方法》和《实验动物寄生虫学检测方法》,抽检动物所携带的微生物和寄生虫。结果普通Beagle犬的质量虽在逐渐提高,但体外寄生虫时有检出;普通大耳白兔体外寄生虫的携带较为普遍;清洁大鼠和小鼠的微生物检测结果基本合格,但有体内寄生虫的阳性样本;SPF级大鼠和小鼠的供应数量较少,尚不能充分满足科研工作的需要。建议有关实验动物生产单位加强普通动物的防疫工作,同时改进饲养管理水平,以有效避免传染病和寄生虫病的发生;加强清洁动物的净化及物料的消毒工作,以确保清洁动物的质量合格、稳定;进一步提高实验动物的净化水平并扩大SPF动物的生产规模,以充分满足科研工作的需要。     

IRM-2小鼠SPF核心保种群的建立

目的为建立我国SPF级IRM-2小鼠核心群,以满足科研、生产及检定工作不断发展的需要,对普通级IRM-2小鼠进行了剖腹净化。方法采用剖腹摘取子宫术,在无菌隔离器内操作、饲养和繁殖。结果建立了具有12只SPF级IRM-2小鼠核心群,种群生长发育正常。经2次微生物检测,符合SPF级标准。结论通过剖腹技术成功地建立了SPF级IRM-2小鼠核心保种群。     

实验小鼠数量对重组人促红细胞生成素体内活性测定的影响

目的体内生物学活性是重组人促红细胞生成素（Recombinanthumanerythropoietin,rhuEPO）质量控制的关键指标之一,通过研究找出实验小鼠数量对rhuEPO体内活性测定结果的影响,减少检测的复试率和误判率,控制质量风险。方法根据《中国药典》三部的方法,按低、中、高3个剂量组,分别于皮下注射人促红细胞生成素（EPO）标准品和样品溶液,在注射后第4天从小鼠眼眶后静脉丛采血测定EPO活性。根据实验设计每剂量组实验小鼠分别选择为3只、4只、6只、9只、12只,通过实验观察每剂量组小鼠数量不同对rhuEPO内活性测定结果的影响。结果每剂量组小鼠为3只的EPO活性测定复试率、相对标准偏差、最大误差范围和误判率都远高于小鼠数为4一12只各组的EPO活性测定结果;每剂量组小鼠只数为4只和6只的实验复试率、相对标准偏差和最大误差范围相差不大;每剂量组小鼠为9只和12只的实验复试率、相对标准偏差、最大误差范围和误判率均低于其他3个实验。结论每剂量组小鼠数量越多,EPO活性测定的相对标准偏差、误差范围和误判率等越低,结合检测成本及实际可操作性,我们认为每剂量组小鼠数量设为9只为EPO生物学活性测定最佳的小鼠使用数量。     

IVC系统和屏障系统对SPF级小鼠繁殖能力影响的比较研究

目的比较相对洁净环境下使用独立通风笼盒（IVC）系统和传统屏障饲养环境条件对SPF级BALB/c和C57BL/6两种近交系小鼠繁殖性能和生长发育的影响。方法将8周龄的SPF级BALB/c和C57BL/6小鼠以雌雄2∶1比例随机饲养在IVC饲养环境和传统屏障饲养环境下7个月,观察比较两种品系小鼠不同胎次产仔数、不同周龄的体质量变化、离乳率和交配间隔时间等繁殖和生长能力指标。结果在IVC饲养环境下两种品系的小鼠不同胎次产仔数、哺乳期及离乳后仔鼠体质量,离乳存活率和交配分娩间隔时间等指标与传统的屏障饲养环境下的相同指标相比无显著差异（P〉0.05）。结论在相对洁净环境下使用IVC系统与屏障环境相比,小鼠繁殖能力无显著差异,小规模的实验动物可以在IVC系统中进行生产繁殖。     

关于剖宫产腹壁切口方式的探讨

对40例腹部横切口剖宫产与50例传统腹部纵切口剖宫产按手术指征、术中情况及术后恢复等进行统计学处理。结果表明：两组在手术指征上无明显差异；在术中出血量上，腹部横切口少于腹部纵切口；在手术总时间、胎儿娩出时间上，腹部横切口剖宫产略长于腹部纵切口；术后疼痛、24小时开奶率、术后肛门排气、切口愈合、母乳喂养以及体表美等项指标，腹部横切口明显优于腹部纵切口。     

小鼠胚胎移植技术优化及对巨细胞病毒净化研究

目的 建立小鼠巨细胞病毒净化方法,以获得无MCMV感染的小鼠。方法 利用胚胎移植技术,通过使用不同激素、不同发情周期注射激素、受体鼠品系、不同的移植方法、不同时期胚胎移植,以及移植胚胎数量等对比试验,优化了净化条件。利用优化的胚胎移植净化方法,对供体鼠进行了净化。结果 SIGMA生产的激素,在10 IU剂量下超排得到的可用胚胎数量约为17枚/只;在小鼠发情间期超排得到的可用胚胎最多,超排的可用胚胎数约为23枚/只;选取C57雄性小鼠与ICR雌性小鼠交配的子一代作为受体鼠,产仔率达44.5%;输卵管移植较子宫移植效果好,产仔率为40.64%;移植2细胞胚胎的妊娠率为80%,明显优于单细胞和8细胞;受体鼠移植24枚胚胎时,产仔率达到了43.75%。利用优化的小鼠巨细胞病毒胚胎移植净化方法,净化得到了无MCMV感染的小鼠。结论 建立了小鼠巨细胞病毒净化方法,为获得无MCMV感染的小鼠种群提供了可靠的保障。     

2017年10月北京市啮齿类实验动物的病理检测

目的 通过检测北京市啮齿类实验动物的病理变化,为北京市实验动物质量监控及改进提供依据。方法 对送检的400只啮齿类实验动物,其中包括180只小鼠、80只大鼠、120只豚鼠及20只金黄地鼠,采集心、肝、脾、肺、肾、大肠和小肠,制成石蜡切片后进行HE染色,对镜检肝细胞肿胀的样品又分别进行了PAS染色和冰冻切片油红O染色,并于显微镜下观察。结果 此次进行实验动物质量的抽检,检出病变主要为小鼠、大鼠、豚鼠均出现不同程度的肝脏细胞肿胀,并均有糖原沉积病变检出,脂肪变性在豚鼠检出;此外小鼠及金黄地鼠,尤其是部分金黄地鼠出现明显肝脏坏死及炎性细胞浸润;小鼠和豚鼠的心脏发生增生性炎;小鼠肾脏炎性细胞浸润。结论 本次抽检的啮齿类实验动物基本健康,部分啮齿类动物的饲养管理仍需加强,本监测结果可为科研实验的准确性提供可靠有效的依据。     

剖宫产率上升的原因及剖宫产指征变化的分析

目的探讨剖宫产率上升的原因及剖宫产指征的变化。方法选择我院产科1998年1月至2007年12月10年间所有分娩病历8740例,其中剖宫产病历2652例,分析剖官产率上升的原因及剖宫产指征变化的关系。结果（1）剖宫产率逐年增加;（2）剖宫产指征中,以社会因素为手术指征的剖宫产率明显增加,并有逐年上升的趋势,而以其它因素为指征的剖官产率还较平稳。结论剖官产率上升的原因不纯是医学问题,也是社会问题,通过孕妇及家属、医务人员和社会的共同努力是可以降低的。